臨床檢驗分析儀器課件

臨床檢驗分析儀器臨床化學(xué)分析儀電解質(zhì)分析儀血氣分析儀血液學(xué)測定裝置臨床檢驗分析儀器臨床化學(xué)分析儀1比色和分光光度儀比色和分光光度儀2朗伯-比爾定律及其應(yīng)用單色光經(jīng)過有色溶液時，透過溶液的光強(qiáng)度不僅與溶液的濃度有關(guān)，而且還與溶液的厚度及溶液本身對光的吸收性能有關(guān)：

A=KCbA為消光值:A=lg(I0/I)；K為溶液的消光（吸收）系數(shù)；C為溶液的濃度；b為光程，即溶液的厚度（有時也以L表示）。朗伯-比爾定律及其應(yīng)用單色光經(jīng)過有色溶液時，透過溶液的光強(qiáng)度3摩爾消光系數(shù)一種有色溶液對于一定波長（單色光）的入射光的K值具有一定數(shù)值。若溶液的濃度以mol/l表示，溶液厚度以cm表示，則此時的K值稱為摩爾消光系數(shù)，它是有色化合物的重要特征之一。摩爾消光系數(shù)一種有色溶液對于一定波長（單色光）的入射光的K值4光電比色計的基本原理若先配制一已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)朗伯-比爾定律，有：As=Ks·Cs·bs。待測濃度的溶液：Ax=Kx·Cx·bx。如使bx=bs，Kx=Ks，即光程和溶液已知，則有As/Ax=Cs/Cx

或：Cx=(Ax/As)Cs光電比色計的基本原理若先配制一已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)朗伯-5光電比色計結(jié)構(gòu)光源與聚光鏡

光源強(qiáng)度保持不變是獲得準(zhǔn)確測定結(jié)果的重要因素(穩(wěn)壓器)。光電比色計通常用6~12V的鎢絲燈泡作發(fā)光光源(320~1100nm)。聚光鏡使從光源射來的光成為平行光。光源濾光片比色皿光電檢測器放大顯示光電比色計結(jié)構(gòu)光源與聚光鏡光濾比光電放顯6濾光片濾光片的作用是只讓一定波長范圍的光透過，而將其余不需要的波長光濾去。常用的濾光片有吸收濾光片、截止濾光片、復(fù)合濾光片等。比色皿

比色皿是用來盛裝所分析的樣品液的。在可見光范圍內(nèi)，常用無色光學(xué)玻璃或塑料制作；而在紫外區(qū)，需要用能透紫外線的材料，如石英玻璃來制作。由于經(jīng)常用來盛裝各種化學(xué)溶液，比色皿除了應(yīng)具有良好的透光特性之外，還應(yīng)有較強(qiáng)的耐腐蝕性。濾光片7光電檢測器

在檢驗儀器中常使用的光電檢測器有光電池、光電管、光電倍增管等，是利用光電效應(yīng)把光能轉(zhuǎn)化為電能的器件，它必須滿足以下三個條件：光電轉(zhuǎn)換必須滿足恒定的函數(shù)關(guān)系。

波長響應(yīng)范圍寬。

靈敏度高，響應(yīng)速度快，產(chǎn)生的電信號易于檢測和放大，噪音低。

光電檢測器8分光光度法利用單色分光器產(chǎn)生波長可連續(xù)變化的電磁波照射溶液。因溶液中的分子吸收能量而在宏觀上表現(xiàn)為透射光強(qiáng)度變小。若將照射前后光強(qiáng)度的變化轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柌⒂涗浵聛?，就可以得到一張光?qiáng)度變化對波長關(guān)系曲線圖——分子吸收光譜圖。由于分子吸收光譜與物質(zhì)本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)，吸光度的大小與物質(zhì)的含量有關(guān)，利用吸收光譜的形狀和吸收程度的大小即可對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量的分析。這種方法就叫做分光光度法。分光光度法利用單色分光器產(chǎn)生波長可連續(xù)變化的電磁波照射溶液。9分光光度計紫外－可見光分光光度計光焰光度計原子吸收分光光度計熒光分光光度計等分光光度計紫外－可見光分光光度計10分光光度計儀器結(jié)構(gòu)：

從光源發(fā)出的光，經(jīng)單色器色散后，變?yōu)閱紊?。單色光?jīng)過比色皿中的被測溶液后照射到光電管上。光電管將這一隨溶液濃度不同而變化的光信號轉(zhuǎn)換成電信號，再經(jīng)放大器，由微安表將透光度T或吸光度A顯示出來。調(diào)節(jié)單色器可以使不同波長的單色光穿過比色皿，從而測量比色皿中的樣品對不同波長的光的吸光度。

單色器的主要部件是玻璃棱鏡或衍射光柵，轉(zhuǎn)動不同角度可獲得不同波長的單色光。光源最常用的是鎢燈（360-800nm），紫外線時要增加氫燈或氘燈來產(chǎn)生紫外光。分光光度計儀器結(jié)構(gòu)：從光源發(fā)出的光，經(jīng)單色器色散后，變?yōu)閱?1

分光光度計調(diào)零和調(diào)滿刻度在實際使用中，分光光度計需要進(jìn)行調(diào)零(T=0)和調(diào)滿刻度(T=100%)。調(diào)零時，關(guān)上光門使之沒有光線射入探測器，調(diào)節(jié)電位器2，提供一個合適的電壓以抵消光電管本身產(chǎn)生的暗電流或其它原因造成的零漂，使輸出信號為零(T=0)。調(diào)滿刻度時，將參比溶液置于光路中，通過調(diào)節(jié)電位器1來調(diào)節(jié)光源燈兩端的電壓，改變光源燈的亮度使輸出信號為滿刻度。常用的分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)有：單光束光學(xué)系統(tǒng)、雙光束光學(xué)系統(tǒng)和雙波長/雙光束系統(tǒng)等。由于對不同波長都需要作調(diào)零，采用單光束光學(xué)系統(tǒng)需要把參比溶液皿和樣品皿來回的換位，不利于光譜的掃描。使用雙光束光學(xué)系統(tǒng)可以便于光譜的掃描，分光光度計調(diào)零和調(diào)滿刻度在實際使用中，分光光度計需要進(jìn)行調(diào)零12721分光光度計外形及內(nèi)部結(jié)構(gòu)穩(wěn)壓電路板721分光光度計外形及內(nèi)部結(jié)構(gòu)穩(wěn)壓電路板13

火焰光度計每一元素都有其特定發(fā)射光譜，其譜波長為特異性的。以火焰為激發(fā)源，對某些金屬元素的發(fā)射光譜進(jìn)行光度分析的方法稱為火焰光度法。

14樣品經(jīng)噴口成霧狀，與燃料混合進(jìn)入火焰，待測堿金屬原子離解生成基態(tài)原子，并被火焰激發(fā)，輻射出自身的特征譜線。用單色器或濾光片選擇出所測元素的特征譜線，送入光電檢測器，經(jīng)放大并顯示結(jié)果。

霧化器與混合室、火焰共同組成火焰原子化器，是樣品原子化的場所。樣品經(jīng)噴口成霧狀，與燃料混合進(jìn)入火焰，待測堿金屬原子離解生成15

光源原子化器單色器檢測器信號處理檢測裝置樣品原子吸收分光光度計原子吸收光譜法（AtomicAbsorptionSpectrometry，AAS）是以測量氣態(tài)基態(tài)原子外層電子共振線的吸收作為基礎(chǔ)的分析方法，可對60多種元素作微量（ng/ml）定量測定（符合朗伯-比耳定律）。原子從基態(tài)到激發(fā)態(tài)吸收特定波長的光使入射光變?nèi)?、變暗，通常為線狀光譜。溶液是分子吸收光譜。光原單檢信檢樣品原16熒光物質(zhì)經(jīng)高能量射線（如紫外線）激發(fā)后，所發(fā)出的比原激發(fā)光波較長的可見光叫熒光。任何能發(fā)出熒光的分子都具有兩種特征光譜，激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。熒光物質(zhì)經(jīng)高能量射線（如紫外線）激發(fā)后，所發(fā)出的比原激發(fā)光波17光源激發(fā)單色器樣品杯發(fā)射單色器檢測器電子放大及控制顯示熒光分光光度計激發(fā)單色器從光源中選擇出合適波長的激發(fā)光，投射到樣品上。樣品杯里的熒光物質(zhì)吸收了激發(fā)光后，被激發(fā)發(fā)出該物質(zhì)的熒光光譜。熒光被發(fā)射單色器選出，由光電檢測器將此正比于物質(zhì)濃度的熒光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電信號，經(jīng)放大后顯示。激發(fā)光束和熒光光束相垂直，以防光源產(chǎn)生的激發(fā)光到達(dá)檢測器。光源激發(fā)單色器樣品杯發(fā)檢電顯熒光分光光度計激發(fā)單色器從光源中18自動生化分析儀自動生化分析儀19 生化分析儀是臨床診斷常用的重要儀器之一。它通過對血液和其他體液的分析來測定各種生化指標(biāo)：如血紅蛋白、膽固醇、肌肝、轉(zhuǎn)氨酶、葡萄糖、無機(jī)磷、淀粉酶、白蛋白、鈣等。自動生化分析儀就是把生化分析中的取樣、加試劑、去干擾物、混合、保溫反應(yīng)、檢測、結(jié)果計算和顯示、以及清洗等步驟進(jìn)行自動化的儀器。目前，絕大多數(shù)生化分析儀都是基于光電比色法的原理進(jìn)行工作的。其結(jié)構(gòu)可粗略看成是由光電比色計或分光光度計加微機(jī)兩部分組成。由于整個測試過程是自動完成的，所以除微機(jī)外，在采樣、進(jìn)樣、反應(yīng)等過程使用了一些特殊的部件。 生化分析儀是臨床診斷常用的重要儀器之一。它通過對血液和其他20生化分析儀分類可從不同的角度進(jìn)行分類。按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)：連續(xù)流動式、分立式和離心式三類。按自動化程序：全自動、半自動和手工型三類。按同時可測定項目：單通道和多通道兩類。單通道每次只能檢測一個項目，但項目可以更換。多通道每次同時可以測多個項目。按儀器的復(fù)雜程度及功能：小型、中型和大型三類。小型一般為單通道、半自動及專用分析儀。中型為單通道(可更換幾十個項目)或多通道，常同時可測2-10個項目，大型均為多通道儀器，同時可測10個以上項目，分析項目可自選或組合，不僅能進(jìn)行臨床生化檢驗，而且可進(jìn)行藥物監(jiān)測及進(jìn)行免疫球蛋白的測定。按規(guī)定程序可變與否：程序固定式和程序可變式分析儀兩類。生化分析儀分類可從不同的角度進(jìn)行分類。21連續(xù)流動式自動生化分析儀

單通道連續(xù)流動式生化分析儀是在微機(jī)控制下，通過比例泵將標(biāo)本和試劑吸到連續(xù)的管道系統(tǒng)中，在一定的溫度下，在管道內(nèi)完成混合，去除干擾物，保溫反應(yīng)，比色測定，信號放大，運算處理，最后將結(jié)果顯示并打印出來。因為這種檢測分析是一個標(biāo)本跟著一個標(biāo)本在連續(xù)流動狀態(tài)下進(jìn)行的，故稱之為連續(xù)流動式分析儀。樣品和樣品之間可用空氣來隔離，叫空氣分段式系統(tǒng)；也可用空白試劑或緩沖液來隔離，叫非分段式系統(tǒng)。

連續(xù)流動式自動生化分析儀單通道連續(xù)流動式生化分析儀是在微機(jī)22分立式自動生化分析儀分立式是指按手工操作的方式編排程序，并以有節(jié)奏的機(jī)械操作代替手工，各環(huán)節(jié)用傳送帶連接起來，按順序依次操作。放在傳送帶上的編碼試管架，可使試管升降。當(dāng)反應(yīng)試管加好樣品后，即向保溫水浴移動，至一定部位(在勻速行進(jìn)中，距離即等于反應(yīng)時間)時，又由另外的注射加液器加入反應(yīng)試劑，并伸入攪拌器攪拌均勻。反應(yīng)完畢后，由泵依次吸至流動比色池中進(jìn)行比色，經(jīng)信號處理后，記錄或打印出結(jié)果。分立式自動生化分析儀分立式是指按手工操作的方式編排程序，并以23離心式自動生化分析儀

全部檢驗過程在一個類似離心機(jī)轉(zhuǎn)頭樣的圓盤上進(jìn)行：將樣品和試劑放在特制的圓盤上(作為轉(zhuǎn)頭)，當(dāng)離心機(jī)開動后，圓盤內(nèi)的樣品和試劑受離心作用而相互混合，并進(jìn)行反應(yīng)。最后流入圓盤外圈的比色槽中，通過比色計進(jìn)行檢測。在整個分析過程中，各樣品和試劑的混合，反應(yīng)和檢測的每一步驟，幾乎都是同時完成的。特點是微量(樣品1~50mL，試劑120－300mL)、快速(每小時大于600個樣品)。離心式自動生化分析儀全部檢驗過程在一個類似離心機(jī)轉(zhuǎn)頭樣的圓24血氣和血氣分析儀

血氣和血氣分析儀25測量血氣的意義呼吸是新陳代謝的重要部分，也是機(jī)體對O2的攝吸與消耗(獲得能量)及CO2的產(chǎn)生與排出的過程。呼吸分內(nèi)呼吸和外呼吸兩個環(huán)節(jié)，內(nèi)呼吸為組織中毛細(xì)血管與組織間的氣體交換以及細(xì)胞氧化，外呼吸為肺泡通氣和肺泡壁的氣體交換。血液是運送從大氣吸入的O2到組織、同時又運送組織排放的CO2到肺部以排出體外的運輸工具。血液中O2和CO2是反映人體代謝狀態(tài)的重要指標(biāo)。測量血氣的意義呼吸是新陳代謝的重要部分，也是機(jī)體對O2的攝吸26血液中的氧氧在血液中的兩種存在形式：物理溶解（4％）與血紅蛋(Hb)結(jié)合成HbO2（96%）血氧飽和度： HbO2／(HbO2+Hb) 或：(O2含量－物理溶解的O2量)／O2含量； 正常人：動脈0.93－0.98，靜脈0.6－0.7。血氣分析中測量的氧分壓，是指血漿中物理溶解O2的張力，其參考范圍在10.66－13.33kPa(80－100mmHg)。血液中的氧氧在血液中的兩種存在形式：27血液中的二氧化碳CO2在血液中的存在形式有三種：物理溶解（7.3%）；與血紅蛋白(Hb)結(jié)合成氨基甲酸血紅蛋白(HbNH2+CO2→HbNHCOOH)，（占24.4%）；與水結(jié)合形成HCO3（68.3%）。血氣分析中測量的二氧化碳分壓也是物理溶解于血漿中的CO2張力。其參考范圍在4.65―5.98kPa(35―45mmHg)。血液中的二氧化碳CO2在血液中的存在形式有三種：28血液酸堿度人體血液酸堿度來源于食物、飲料和藥物中的酸堿物質(zhì)及體內(nèi)代謝后產(chǎn)生的酸堿物質(zhì)。維持酸堿平衡的因素有：緩沖系統(tǒng)、肺調(diào)節(jié)、離子交換、腎調(diào)節(jié)，并按上述順序分四級調(diào)節(jié)。在正常生理狀態(tài)下，pH應(yīng)穩(wěn)定在7.35－7.45之間血液酸堿度人體血液酸堿度來源于食物、飲料和藥物中的酸堿物質(zhì)29血液氣體的生理變化過程血液中H+濃度增高(pH變低)或CO2分壓增高時，Hb與氧親合力降低H+濃度降低（pH變高）或CO2分壓降低時，Hb與氧親合力增高。當(dāng)血液流經(jīng)組織時，因組織細(xì)胞的pH比血液低，而CO2分壓較血液高，有利于HbO2釋放O2，同時又促進(jìn)了Hb和H+、CO2的結(jié)合。當(dāng)血流經(jīng)肺時，肺泡的O2分壓高，HbO2的生成促使Hb釋放H+和CO2，同時CO2的呼出也有利于HbO2的形成。血液氣體的生理變化過程血液中H+濃度增高(pH變低)或CO230血氣分析儀血氣分析儀是對人體血液及呼出氣的酸堿度(pH)、二氧化碳分壓(PCO2)、氧分壓(PO2)進(jìn)行定量測定的儀器。可用來分析和評價人體血液酸堿平衡(紊亂)狀態(tài)和輸氧狀態(tài)。它還可以用于人體其它體液(腔液、胃液、腦脊液、尿液)的pH、PCO2、PO2的分析測量。由于該儀器分析快速、準(zhǔn)確、可靠，因此可以為分析病因和制定治療方案提供可靠的依據(jù)；在臨床中常用于昏迷、休克、嚴(yán)重外傷等危急病人的搶救、外科大手術(shù)的監(jiān)視、治療效果的觀察和研究；是肺心病、肺氣腫、氣管炎、糖尿病、嘔吐、腹瀉、中毒等病癥診斷和治療中所必備的儀器。血氣分析儀血氣分析儀是對人體血液及呼出氣的酸堿度(pH)、二31血氣分析儀的工作原理被測樣品在管路系統(tǒng)的抽吸下，被抽進(jìn)樣品室內(nèi)的測量管。測量管的管壁上開有四個孔，孔里面插有pH、PCO2和PO2三只測量電極和一只參比電極。待測液進(jìn)入測量管后，同時被四個電極所檢測，轉(zhuǎn)換成pH、PCO2和PO2三項參數(shù)所對應(yīng)的電信號。血氣分析儀的結(jié)構(gòu)可分為：電極管路電路血氣分析儀的工作原理被測樣品在管路系統(tǒng)的抽吸下，被抽進(jìn)樣品32血氣分析儀的管路系統(tǒng)恒溫測量室裝有四只測量電極，是整個管路系統(tǒng)的中心。為保證儀器的準(zhǔn)確性，測量室嚴(yán)格恒溫，保證電極、管道及所有進(jìn)入的液體、氣體均恒溫在37土0.1℃，其內(nèi)部設(shè)有溫度傳感器、加熱器、過溫開關(guān)和液位檢測器。

作用：系統(tǒng)通過管路進(jìn)行定標(biāo)(氣、液)。通過管路對電極、通道做清洗。測量樣品的通路。血氣分析儀的管路系統(tǒng)恒溫測量室裝有四只測量電極，是整個管路系33電解質(zhì)分析儀

電解質(zhì)分析儀34鉀鈉分析儀鉀鈉分析儀是采用離子選擇性電極測量血清、血漿、尿、腦脊髓或其它品液中鉀鈉離子濃度的分析儀器。有些儀器除了鈉鉀離子外，還有能測量其它多種離子的電極，因而也常稱為電解質(zhì)分析儀。鉀鈉分析儀鉀鈉分析儀是采用離子選擇性電極測量血清、血漿、尿、35鉀鈉分析儀的組成鉀鈉分析儀一般由鉀電極、鈉電極、參比電極、分析箱、測量電路、控制電路、驅(qū)動電機(jī)及顯示器等組成。鉀鈉分析儀的組成鉀鈉分析儀一般由鉀電極、鈉電極、參比電極、分36血細(xì)胞計數(shù)器

血細(xì)胞計數(shù)器37臨床檢驗分析儀器課件38血細(xì)胞計數(shù)血細(xì)胞計數(shù)主要是指計數(shù)單位容積中紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的個數(shù)。傳統(tǒng)的血細(xì)胞計數(shù)是將血液稀釋后，滴在有分劃的玻璃片上，在顯微鏡下用人工計數(shù)。最基本的血細(xì)胞計數(shù)器只能用來計數(shù)紅細(xì)胞(RBC)和白細(xì)胞(WBC)。較復(fù)雜的儀器還可以用來計數(shù)血小板(PLT)，測量血紅蛋白(HGB)。并根據(jù)以上四個參數(shù)，自動計算出紅細(xì)胞比容(HCT)、平均紅細(xì)胞容量(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)等項參數(shù)。血細(xì)胞計數(shù)血細(xì)胞計數(shù)主要是指計數(shù)單位容積中紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血39血細(xì)胞計數(shù)器根據(jù)對白細(xì)胞分類的能力，血細(xì)胞計數(shù)器可分為三分類和五分類兩種。血細(xì)胞計數(shù)方法有：變阻脈沖法(簡稱變阻法)、光電計數(shù)法和激光計數(shù)法等。

血細(xì)胞計數(shù)器根據(jù)對白細(xì)胞分類的能力，血細(xì)胞計數(shù)器可分為三分類40變阻脈沖法血細(xì)胞計數(shù)原理血細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體，如果構(gòu)成電路的某一小段電解液截面很小，其尺度可與細(xì)胞直徑相比擬，那么當(dāng)有細(xì)胞浮游到此時，將明顯增大整段電解液的等效電阻。如果該電解液外接恒流源，則可得到一連串脈沖，對這些脈沖計數(shù)，就可求得血細(xì)胞數(shù)量。由于各種血細(xì)胞直徑不同，所以其電阻率也不同，所測得的脈沖幅度也不同，根據(jù)這一特點就可以對各種血細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)。這就是變阻脈沖法原理。變阻脈沖法血細(xì)胞計數(shù)原理血細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體，如果構(gòu)成電路的41變阻法計數(shù)在大多數(shù)細(xì)胞計數(shù)器中是利用小孔管換能器裝置實現(xiàn)的。

紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板直徑不同，產(chǎn)生的脈沖幅度也不同，以白細(xì)胞最大，紅細(xì)胞次之，血小板最小。先利用脈沖幅度甄別器將幅度較小的血小板脈沖去掉，保留紅細(xì)胞和白細(xì)胞脈沖。因為白細(xì)胞數(shù)量小于紅細(xì)胞數(shù)量的1／5，故其總數(shù)即可代表紅細(xì)胞數(shù)量。在計數(shù)白細(xì)胞時，先利用溶血劑將紅細(xì)胞破碎，然后再對剩下的白細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。在計數(shù)血小板時，將脈沖幅度甄別器的域值調(diào)低，計出紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的總數(shù)，再減去先前測出的紅細(xì)胞數(shù)，便得出血小板數(shù)。變阻法計數(shù)在大多數(shù)細(xì)胞計數(shù)器中是利用小孔管換能器裝置實現(xiàn)的。42重合損失補(bǔ)償因為紅、白細(xì)胞的直徑一般是7－10μm，大者也只有20μm左右，而寶石微孔的孔徑卻為100μm，會存在兩個、三個甚至更多細(xì)胞，一同或前后尾隨進(jìn)入小孔“敏感區(qū)”的可能性。雖然這種情況產(chǎn)生的脈沖幅度比單個細(xì)胞要高，但它只能產(chǎn)生一個信號脈沖，使計數(shù)有所丟失。這種現(xiàn)象稱為重合損失。為了彌補(bǔ)這種損失，通常設(shè)有重合校正電路或用軟件校正。重合損失是按泊桑(Poisson)分布規(guī)律加以校正的：計數(shù)值在8000以下時不校正。計數(shù)值在8000－38000時，每計數(shù)1000個含補(bǔ)充的100個數(shù)。即每計900個便向千位進(jìn)1。在38000以上時，每計數(shù)1000含補(bǔ)充的200個。即每計數(shù)800個向千位進(jìn)l。重合損失補(bǔ)償因為紅、白細(xì)胞的直徑一般是7－10μm，大者也只43血紅蛋白測量

血紅蛋白的單位是g／100m1(新制是g／L)。采用相對比色法進(jìn)行間接測量：用溶血劑將經(jīng)過稀釋的血液中的紅細(xì)胞破壞，血紅蛋白便溶解出來，再加入氰化鉀試劑進(jìn)而轉(zhuǎn)化為顏色穩(wěn)定的氰化血紅蛋白。血紅蛋白含量越高，它的顏色就越深，透光性就越差(或吸光性越強(qiáng))。用光電器件檢測透射光強(qiáng)度，并與已定標(biāo)的血紅蛋白值相比較，即可得出血紅蛋白含量。常用的光路系統(tǒng)為了防止光散射和外來光干擾，均采用雙波長法測量。血紅蛋白測量血紅蛋白的單位是g／100m1(新制是g／L)44雙波長測量法氰化血紅蛋白的光密度曲線在540nm處有一個吸收峰。光源燈發(fā)出的光，經(jīng)過透鏡和狹縫，再透過流動比色皿到達(dá)一個半透半反鏡上分成兩束光，一束透射光和一束反射光。透射光經(jīng)過690nm濾光片到達(dá)一光電池，被光電池轉(zhuǎn)換為參考信號B；另一束反射光經(jīng)過540nm的濾光片，到達(dá)另一光電池，被光電池轉(zhuǎn)換為樣品信號A。雙波長測量法氰化血紅蛋白的光密度曲線在540nm處有一個吸收45雙波長測量吸光度計算設(shè)在540nm處為λ1，690nm處為λ2， 在λ1時的吸光度為 Aλ1＝Kλ1CL+AS1；

同樣，對于λ2也有 Aλ2＝Kλ2CL+AS2； 式中，AS1和AS2分別為在波長λ1和λ2時的光散射和背景吸光度，因540nm和690nm相差不太遠(yuǎn)，可以把AS1和AS2視為相等。因此，透過比色皿的參考信號和樣品信號的吸光度之差ΔA為

ΔA＝(Kλ2一Kλ1)CL根據(jù)以上原理，只要在電路中求出參考和樣品兩信號之差，便可以求得相應(yīng)的血紅蛋白濃度，并有效地抑制和減少了光散射、背景吸收以及混濁樣品的影響，