第三節(jié)第一節(jié) 外植體的脫分化

第三節(jié)第一節(jié)外植體的脫分化第1頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月脫分化指已分化的外植體細(xì)胞（組織、器官），在切割損傷和培養(yǎng)物內(nèi)外因素作用下，逐漸喪失其原有的分化的結(jié)構(gòu)和功能，合成代謝變得旺盛、細(xì)胞壁由厚變薄，其內(nèi)部結(jié)構(gòu)也發(fā)生變化，細(xì)胞高度液泡化，形成無組織的細(xì)胞團(tuán)或愈傷組織第2頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月再分化指離體培養(yǎng)物由脫分化狀態(tài)再度分化的過程第3頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月在植物組織培養(yǎng)中，主要目標(biāo)是誘導(dǎo)愈傷組織的形成和形態(tài)的發(fā)生第4頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月外植體的細(xì)胞應(yīng)激于損傷和離體培養(yǎng)而出現(xiàn)的脫分化，是培養(yǎng)物細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上可見的第一個(gè)變化脫分化的細(xì)胞在一定的條件下可進(jìn)行不斷的分裂和生長(zhǎng)也可不經(jīng)分裂而直接再分化為其他類型的細(xì)胞或胚狀體第5頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月一、誘導(dǎo)期間的細(xì)胞脫分化過程變化的總體特征：細(xì)胞質(zhì)顯著變濃，大液泡消失，核體積增加并逐漸移位至細(xì)胞中央，細(xì)胞器增加液泡蛋白質(zhì)的出現(xiàn)和質(zhì)體轉(zhuǎn)變?yōu)樵|(zhì)體被認(rèn)為是細(xì)胞脫分化的重要特征第6頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月脫分化的三個(gè)階段1、啟動(dòng)階段表現(xiàn)：細(xì)胞質(zhì)增生，并開始向細(xì)胞中央伸出細(xì)胞質(zhì)絲，液泡蛋白出現(xiàn)第7頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月2、演變階段細(xì)胞核開始向中央移動(dòng)，質(zhì)體演變成原質(zhì)體第8頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月3、脫分化終結(jié)階段細(xì)胞回復(fù)到分生細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞分裂即將開始第9頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月二、與脫分化有關(guān)的因子及其作用1、損傷刺激————————引起脫分化的首個(gè)因子導(dǎo)致外植體產(chǎn)生生化反應(yīng)：氣體交換率變化，實(shí)際上，也導(dǎo)致呼吸活性的變化將馬鈴薯塊莖組織做成薄片（1~2mm）,隨著切斷后的時(shí)間的推移，呼吸速度增加。馬鈴薯、胡蘿卜和菊苣等貯藏組織在20~24h似乎達(dá)到最大的呼吸速度，故稱之為“損傷呼吸”損傷呼吸的形成與誘發(fā)前的是相異的第10頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月導(dǎo)致很多其他酶活性的增加如菊苣中的抗壞血酸氧化酶、磷酸酶、ATP酶，轉(zhuǎn)化酶、馬鈴薯中的6-磷酸葡萄糖（酸）脫氫酶和異構(gòu)酶、丙酮酸激酶等活性均增加第11頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月2、培養(yǎng)細(xì)胞的異質(zhì)性用莖、胚軸等典型的各種已分化的細(xì)胞類型的復(fù)合物作外植體，細(xì)胞之間存在很大的異質(zhì)性，異質(zhì)性細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)條件刺激有不同的敏感性。因此只有某種類型或某一部分的細(xì)胞能夠脫分化以至分裂，其他的細(xì)胞則不能。特別值得注意的是異質(zhì)性的兩個(gè)方面是不同的倍數(shù)體和不同的生理狀態(tài)第12頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月3、生長(zhǎng)物質(zhì)的影響切面很容易形成多酚物質(zhì)沉積的保護(hù)層，從而又可使表層細(xì)胞停止分裂但如加入2,4-D等生長(zhǎng)物質(zhì)，則可導(dǎo)致外植體在細(xì)胞生物學(xué)上與細(xì)胞分裂有關(guān)的一些強(qiáng)烈變化，可使進(jìn)入第一次分裂的細(xì)胞百分率更高加入生長(zhǎng)素的同時(shí)如第13頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月3、生長(zhǎng)物質(zhì)的影響切面很容易形成多酚物質(zhì)沉積的保護(hù)層，從而又可使表層細(xì)胞停止分裂但如加入2,4-D等生長(zhǎng)物質(zhì)，則可導(dǎo)致外植體在細(xì)胞生物學(xué)上與細(xì)胞分裂有關(guān)的一些強(qiáng)烈變化，可使進(jìn)入第一次分裂的細(xì)胞百分率更高加入生長(zhǎng)素的同時(shí)如配合激動(dòng)素效果更好第14頁，課件共15頁，創(chuàng)作于2023年2月4、光線的影響光線對(duì)外植體的最初的細(xì)胞分