第九組免疫研討

第九組免疫研討第1頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第2頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第3頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第4頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第5頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第6頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第7頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第8頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月免疫研討

制作人：田栩屹?gòu)埢竷S下一步的研究方向TCR與記憶T細(xì)胞第9頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月在記憶T細(xì)胞發(fā)育的研究中，關(guān)于T細(xì)胞前體和記憶T細(xì)胞亞群的分化關(guān)系至今仍然不太清楚，而且形成和維持記憶狀態(tài)的分子信號(hào)機(jī)制也有待研究。記憶T細(xì)胞第10頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月記憶T細(xì)胞《科學(xué)》（Science）雜志兩篇最新文章表明，記憶T細(xì)胞的發(fā)育可能更接近線性分化模型（lineardifferentiationmodel），而T細(xì)胞受體（Tcellreceptor,TCR）在其中可能具有重要作用。第11頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T細(xì)胞受體Teixeiro等人研究了記憶T細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中T細(xì)胞受體（T-cellreceptor,TCR）的作用。他們構(gòu)建了一種OT-ITCR轉(zhuǎn)基因小鼠，其卵蛋白素（ovalbumin,OVA）特異性TCR在β鏈跨膜區(qū)域有一處點(diǎn)突變。表達(dá)突變性TCR的T細(xì)胞保留了識(shí)別OVA肽段并產(chǎn)生應(yīng)答的能力，因此表達(dá)突變型和野生型TCR的CD8+T細(xì)胞的早期應(yīng)答是相似的。第12頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T細(xì)胞受體然而，當(dāng)研究人員檢測(cè)擴(kuò)增、減少及記憶階段的CD8+T細(xì)胞應(yīng)答時(shí)，表達(dá)突變型TCR的T細(xì)胞分化成為記憶T細(xì)胞的能力遭到破壞，也就是記憶T細(xì)胞的數(shù)量和產(chǎn)生二次應(yīng)答的能力受到抑制。表達(dá)突變型TCR的T細(xì)胞可以識(shí)別抗原并在接受TCR刺激后產(chǎn)生某些早期應(yīng)答信號(hào)，比如鈣代謝作用。然而，突變型TCR不能夠形成免疫突觸（immunologicalsynapse）第13頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T細(xì)胞受體以上結(jié)果提示效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的分化所需的信號(hào)是相互獨(dú)立的而且一定程度上由TCR信號(hào)決定。第14頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T細(xì)胞受體北大免疫系葛青全國(guó)臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議記憶T細(xì)胞主要由初始T細(xì)胞接受外來(lái)抗原活化而來(lái)，但研究表明淋巴細(xì)胞減少所導(dǎo)致的T細(xì)胞增值也可以誘導(dǎo)記憶T細(xì)胞的形成。動(dòng)物在新生期或接受放化療后，外周淋巴細(xì)胞數(shù)量少，初始T細(xì)胞表面TCR與自身表位肽-MHC的相互作用介導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生穩(wěn)態(tài)擴(kuò)增，繼而分化并獲得記憶T細(xì)胞的表型和功能。第15頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月TCR基因轉(zhuǎn)染抗腫瘤TCR基因轉(zhuǎn)染能夠有效促進(jìn)T細(xì)胞識(shí)別腫瘤抗原后活化。經(jīng)腫瘤抗原預(yù)先刺激的TCR基因轉(zhuǎn)染T細(xì)胞將啟動(dòng)記憶性T細(xì)胞分化，在再次遭遇表達(dá)相同抗原的腫瘤細(xì)胞時(shí)發(fā)揮更為強(qiáng)烈的免疫效應(yīng)。第16頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月方法密度梯度離心法分離PBMC，重組TCR腺病毒感染T細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外源TCR表達(dá)效率。AFP表位肽刺激T細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)TCR基因轉(zhuǎn)染T細(xì)胞經(jīng)抗原刺激后，記憶性T細(xì)胞標(biāo)志分子表達(dá)。MTT法檢測(cè)T細(xì)胞對(duì)不同腫瘤細(xì)胞株的殺傷活性。Annexin

V-PI雙染法檢測(cè)靶細(xì)胞凋亡比例。ELISA法檢測(cè)T細(xì)胞作用于靶細(xì)胞后IFN-γ與IL-2分泌水平。第17頁(yè)，課件共20頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)論重組腺病毒載體感染3

d后，外源TCR表達(dá)比例接近30%。特異性TCR基因轉(zhuǎn)染可有效促進(jìn)T細(xì)胞識(shí)別腫瘤抗原后活化，能夠促進(jìn)T細(xì)胞殺傷AFP+靶細(xì)胞，誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡，并促進(jìn)IFN-γ分泌?？乖A(yù)先刺激能夠進(jìn)一步增強(qiáng)TCR基因轉(zhuǎn)染T細(xì)胞抗腫瘤免疫效應(yīng)。另外，文獻(xiàn)中模型為淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒（LCMV）感染的小鼠，還可以以其他模型進(jìn)行驗(yàn)證。第18頁(yè)，