中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路

第二章第二節(jié)中醫(yī)實驗研究的思路

第二章第二節(jié)1中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路2中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路3中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路4中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路5中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路63．小鼠四診檢測指標及方法標準采集：（1）體重（2）腋溫（℃）（3）爪和尾顯微數碼拍照（計算機圖像處理，提取反映紅色程度的r值）（4）晚間35s曠場自主活動計數（跨格數的水平移動、前肢離地數的垂直移動）（5）瘤體積（cm，計算公式：abb/2，a代表腫瘤的長徑，b代表腫瘤的短徑）（6）估算瘤重（g，瘤重=瘤體積）（7）生存時間3．小鼠四診檢測指標及方法7結果1．不同組別荷瘤小鼠生存情況圖2所有荷瘤小鼠生存情況結果圖2所有荷瘤小鼠生存情況8

2．荷瘤小鼠不同階段四診的演變（1）總體上，荷瘤小鼠腫瘤體積呈持續(xù)增長；去瘤體重呈拋物線狀，中晚期增長平緩）。

圖3所有荷瘤小鼠估算瘤重（g）增長情況圖4所有荷瘤小鼠體重（g）增長情況以上分別反映什么證候？2．荷瘤小鼠不同階段四診的演變圖3所有荷瘤小鼠估算9（2）荷瘤小鼠好奇和自主活動持續(xù)下降。曠場檢測小鼠水平和垂直運動減少。（3）荷瘤小鼠腋溫持續(xù)下降，下降幅度大，嚴重時降幅達9%！

圖5所有荷瘤小鼠曠場活動情況圖6所有荷瘤小鼠腋溫（℃）改變情況以上分別反映什么證候？（2）荷瘤小鼠好奇和自主活動持續(xù)下降。曠場檢測小鼠水平和垂直10（4）荷瘤小鼠爪、尾顏色變淡，反映紅色程度的r值下降。其中，爪r的變化顯著，嚴重時降幅達9.2%！

圖7所有荷瘤小鼠爪、尾r值演變情況以上反映什么證候？（4）荷瘤小鼠爪、尾顏色變淡，反映紅色程度的r值下降。其中，11

3．荷瘤小鼠不同階段證候的演變

方法——各證型權重、辨證閾值及稱謂

痰瘀邪盛=各小鼠瘤重/所有小鼠瘤重均數。大于1.5為邪毒甚，大于2為邪毒壅盛；小于0.75為邪較弱；0.5為邪弱。

陰虛程度=各小鼠正?；蛉チ鲶w重/正常組體重均值。小于0.9為陰偏虛，小于0.8為陰虛。

3．荷瘤小鼠不同階段證候的演變12氣虛程度=各小鼠水平移動數/正常均數×0.6+各小鼠垂直移動數/正常均數×0.4。大于1.5為氣盛，小于0.5為氣虛。

陽熱程度=各小鼠校正腋溫/正常均數×0.3+各小鼠爪校正r/正常爪r均數×0.5+各小鼠尾校正r/正常尾r均數×0.2。大于1.02為陽偏盛，小于0.98陽偏虛，小于0.95陽虛。

陽氣程度=氣虛程度×0.2+陽虛程度×0.8。大于1.1為陽氣盛，小于0.85為陽氣虛。氣虛程度=各小鼠水平移動數/正常均數×0.6+各小鼠垂直13結果如下：（1）邪毒證候盛衰的演變腫瘤增長的快慢標志著邪毒的盛衰。荷瘤小鼠腫瘤增長迅速者早期偏多，以后逐漸減少；腫瘤增長緩慢者所占比例逐漸增加，可能與存活時間較長的小鼠腫瘤細胞增生不活躍和體質較好有關。圖8所有荷瘤小鼠腫瘤大小分布與演變結果如下：圖8所有荷瘤小鼠腫瘤大小分布與演變14（2）不同虛證的發(fā)生及演變與人類類似，隨著病情的發(fā)展，荷瘤小鼠虛證出現(xiàn)的頻率增加（為簡捷明了，合并陰虛含陰偏虛、陽虛含陽偏虛、陽氣虛含陽氣偏虛）：從不同虛證的程度看，氣虛的程度最嚴重，其次是陽氣虛。陽熱下降恒定，但幅度小，陰虛則不一致，推測與實驗后期所存活動物體質相對較好有關：

圖9所有荷瘤小鼠合并虛證的分布與演變圖10所有荷瘤小鼠陰、陽、氣虛演變情況（2）不同虛證的發(fā)生及演變圖9所有荷瘤小鼠合并虛證15研究發(fā)現(xiàn)：1）接種后的第7天，證候以邪毒為主，虛證無證可辨接近半數，虛證以單證居多。2）接種后的第14天?？傮w進入中期，邪毒已不是重點，腫瘤體積居中的增加，并保持下去。陰虛和偏陰虛占16％，明顯增加；氣虛比例也顯著上升；陽偏虛、陽虛的比例大幅上升，并均保持下去。對于陽虛如此高發(fā)，以往未見報道，可能是小鼠的特點。該階段死亡以陽氣虛為主要原因，因此，扶持陽氣十分必要。此時陰虛多為氣陰兩虛、陰陽兩虛，僅1例為單純陰虛。3）第18天，邪毒大多不甚；陽虛比例下降，可能與剩余動物體質較好有關；該階段，單純陰虛出現(xiàn)3例，有所增加。研究發(fā)現(xiàn)：164）第21天，該階段小鼠出現(xiàn)大量死亡，集中在陽氣虛、陰陽兩虛。由于陽虛普遍發(fā)生，已無單純的陰虛。5）第25天，已進入晚期，該階段小鼠出現(xiàn)大量死亡，集中在陽氣虛、陰陽兩虛。6）第28天，該階段小鼠出現(xiàn)大量死亡，集中在陽氣虛。提示，晚期保護陽氣的重要性。7）第32天，陽虛減少，而陽氣虛增加，提示氣虛程度的嚴重。4）第21天，該階段小鼠出現(xiàn)大量死亡，集中在陽氣虛、陰陽17

（3）兼證及其演變與人類類似，隨著病情的發(fā)展，荷瘤小鼠虛證兼證的比例增加。趨勢是無證可辨的數量和比例下降，單證的數量和比例下降；兩證組合變化不大；而三個兼證組合者顯著增加，四診組合從無到有，有增加趨勢：圖11不同時期荷瘤小鼠證候比例的演變（3）兼證及其演變圖11不同時期荷瘤小鼠證候18

4．荷瘤小鼠的預后是否能在荷瘤小鼠出瘤的早期，依據其證候或體質，判斷其預后？方法：求出同一日死亡小鼠不同證候的權重平均值，與生存天數比較。采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行相關分析。結果：（1）痰瘀邪盛程度與預后的相關系數為-0.539，P=0.01，具有統(tǒng)計意義，提示荷瘤小鼠早期腫瘤增長迅速者，預后差。圖12痰瘀邪盛證候程度與預后的關系4．荷瘤小鼠的預后圖12痰瘀邪盛證候程度與預后19

（2）陰虛程度與預后的相關系數為-0.316，P=0.15，提示早期陰盛（體重較重者）預后不佳。（3）氣虛程度與預后的相關系數為0.275，P=0.21，提示早期氣虛程度嚴重者，預后較差。

圖13陰虛證候程度與預后的關系圖14氣虛證候程度與預后的關系（2）陰虛程度與預后的相關系數為-0.316，P20

（4）陽熱程度與預后的相關系數為0.236，P=0.29，提示早期陽熱虛程度嚴重者，預后較差。（5）陽氣虛程度與預后的相關系數為0.287，P=0.19，提示早期陽氣虛程度嚴重者，預后較差。

圖15陽熱證候程度與預后的關系圖16陽氣虛證候程度與預后的關系（4）陽熱程度與預后的相關系數為0.236，P=21從以上結果可見：1）早期腫瘤增長迅速，體積大，邪毒壅盛者，預后不良。這是決定預后的主要原因。2）早期氣盛略優(yōu)于氣虛，陽氣盛略優(yōu)于陽氣虛。此外，我們還觀察到：3）實驗中，腋溫下降、體重持平和下降是預后差的重要標志。一旦腋溫或體重下降，多瀕臨死亡。與陽氣衰竭、陰虛液脫類似?？傊?，痰瘀邪盛證候與預后的關系最為密切，痰瘀邪盛證候越重，其生存期越短。其次與預后有關的證候依照密切程度為陽氣虛、氣虛、陽熱。從以上結果可見：22

5．不同處方療效的比較依據荷瘤小鼠虛證復雜和嚴重程度，以及生存天數，總體上癸、己、庚、辛等4張?zhí)幏蒋熜л^好，而丙、丁、戊、壬4張?zhí)幏蒋熜л^差。那么以上療效的取得，單純取決于處方，還是由于分組偏倚，尤其是那些早期邪毒壅盛證候的小鼠分配到那些療效不好的組別中所造成的？我們把療效較差的丙、丁、戊、壬4張?zhí)幏浇M別合并，把療效較好的癸、己、庚、辛等4張?zhí)幏浇M別合并，與模型和正常對照。結果如下：

5．不同處方療效的比較23（1）邪毒壅盛程度療效較差的4個組別，早期腫瘤邪毒壅盛，因而其療效差異的主要原因可能是分組偏倚所造成的。鑒于第一次檢查是在用藥后第2天，所以其差異可能還與不同處方療效有一定的聯(lián)系。圖17療效優(yōu)劣組別腫瘤邪毒盛衰的演變（1）邪毒壅盛程度圖17療效優(yōu)劣組別腫瘤邪毒盛衰的演變24

（2）陰虛、氣虛、陽熱、陽氣程度早期不同組別的陰虛、氣虛、陽熱、陽氣程度類似，以后逐漸有了差別。這種差別可能是腫瘤自然發(fā)生的，也可能受到了藥物影響。

圖18療效優(yōu)劣組別陰虛程度的演變圖19療效優(yōu)劣組別氣虛程度的演變（2）陰虛、氣虛、陽熱、陽氣程度圖18療效25

圖20療效優(yōu)劣組別陽熱程度的演變圖21療效優(yōu)劣組別陽氣盛衰程度的演變圖20療效優(yōu)劣組別陽熱程度的演變26中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路27中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路28中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路29中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路30中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路31中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路32中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路33中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路34中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路35中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路36中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路37中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路38中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路39中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路40中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路41中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路42中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路43中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路44中醫(yī)醫(yī)學實驗中醫(yī)學課件-中醫(yī)實驗研究的思路45