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課題1菊花組織培養(yǎng)第1頁右圖為植物體細胞雜交過程示意圖。據(jù)圖回答:
(1)步驟①是
,最慣用方法是
。
(2)步驟②普通慣用化學(xué)試劑是
,目標(biāo)是
。(3)在利用雜種細胞培育成為雜種植株過程中,利用技術(shù)伎倆是
,其中步驟④相當(dāng)于
,步驟⑤相當(dāng)于
。
(4)植物體細胞雜交目標(biāo)是取得新雜種植株。使
能夠在新植物體上有所表現(xiàn),其根本原因是
。去掉細胞壁,分離原生質(zhì)體酶解法聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合植物組織培養(yǎng)脫分化再分化遠緣雜交親本遺傳特征雜種植株取得雙親遺傳物質(zhì)第2頁
(5)若遠源雜交親本A和B都是二倍體,則雜種植株為
倍體。
(6)從理論上講,雜種植株育性
。若利用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實現(xiàn)?
。并說明現(xiàn)由
。
所以,這項研究對于培養(yǎng)作物新品種方面重大意義在于
。
(7)利用植物體細胞雜交方法培育作物新品種過程中,遺傳物質(zhì)傳遞是否遵照孟德爾遺傳規(guī)律?為何?
。
四可育不能因為不一樣種生物之間存在生殖隔離克服遠緣雜交不親和障礙,大大擴展了可用于雜交親本組合范圍不遵照。因為在生物進行有性生殖過程中,才遵照孟德爾遺傳規(guī)律,而植物體細胞雜交育種過程不屬于有性生殖第3頁學(xué)習(xí)目標(biāo)熟悉植物組織培養(yǎng)基本過程。了解細胞分化概念及脫分化,再分化。課題重點與難點課題重點:植物組織培養(yǎng)基本過程。課題難點:植物組織培養(yǎng)過程中使用無菌技術(shù)。細胞分化,脫分化,再分化。第4頁活動1:什么是細胞分化?細胞分化原因和結(jié)果?愈傷組織是怎樣形成?有什么特點?脫分化、再分化?組織培養(yǎng)過程?以及組織培養(yǎng)理論基礎(chǔ)?第5頁一、細胞分化與全能性細胞分化:個體發(fā)育中,細胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功效上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異過程。特定時空下基因選擇性表示。形成各種組織器官。結(jié)果:原因:定義:第6頁脫分化(去分化)再分化愈傷組織愈傷組織是經(jīng)過細胞分裂形成,其細胞排列疏松而無規(guī)則,高度液泡化呈無定形狀態(tài)薄壁細胞。第7頁2.植物組織培養(yǎng)理論基礎(chǔ):細胞全能性:含有某種生物全套遺傳信息任何一個活細胞,都含有發(fā)育成完整個體能力,即每個生物細胞都含有全能性。
細胞全能性表示條件:
離體
一定營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其它外界條件第8頁二、植物組織培養(yǎng)基本過程第9頁活動2:影響組織培養(yǎng)原因?菊花組織培養(yǎng)應(yīng)注意問題?第10頁三、影響植物組織培養(yǎng)原因:不一樣植物組織培養(yǎng)難度不一樣同一個植物不一樣組織培養(yǎng)難度不一樣大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素:生長素、細胞分裂素、赤霉素等1、外植體選取2、培養(yǎng)基配制(MS培養(yǎng)基)
第11頁3、不一樣植物激素濃度,使用次序和使用量使用次序試驗結(jié)果先生長素,后細胞分裂素有利于分裂但不分化先細胞分裂素,后生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提升生長素細胞分裂素比值結(jié)果比值高時促根分化,抑芽形成比值低時促芽分化,抑根形成比值適中促進愈傷組織生長第12頁4、消毒在培養(yǎng)整個過程中,都需要是一個無菌環(huán)境原因:5、pH、溫度、光照菊花:pH=5.8溫度控制在18—22℃每日光照12h第13頁活動3:用自己話把菊花組織培養(yǎng)操作流程給描述出來?(提醒:怎樣配制MS培養(yǎng)基?外植體消毒應(yīng)怎樣進行?接種、培養(yǎng)、移栽時應(yīng)注意什么問題?)第14頁制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培四、試驗操作移栽沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗最少三次之上第15頁試驗操作(一)制備MS固體培養(yǎng)基1、配置各種母液2、配置培養(yǎng)基①定容②調(diào)PH③培養(yǎng)基分裝3、滅菌分裝好培養(yǎng)基連同其它器械一起進行高壓蒸汽滅菌第16頁1、選材:菊花莖段,取生長旺盛嫩枝(二)外植體消毒2、消毒:流水沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗最少三次之上第17頁(三)接種用70%酒精噴霧使空氣消毒,酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射20分鐘1、接種室消毒2、無菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼燒滅菌,接種后馬上蓋好瓶蓋。3、材料切取和接種第18頁4、接種注意事項①每接種一塊外植體前,鑷子需放入體積分數(shù)為75%酒精溶液中消毒一次,然后在酒精燈火焰上燒一遍,冷卻后再接種②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻,放置外植體數(shù)量依據(jù)錐形瓶大小確定,普通胡蘿卜3-4塊,菊莖或葉6-8塊,也不要太少,以充分利用培養(yǎng)基中營養(yǎng)成份和光照條件③插入時應(yīng)注意方向,不要倒插。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分第19頁(四)培養(yǎng)無菌箱中培養(yǎng),定時消毒,保持適宜溫度,光照(五)移栽1、打開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移至消過毒蛭石或珍珠巖中幼苗長壯后,移栽到土壤中(六)栽培第20頁思考?在整個操作過程中,是怎樣來實現(xiàn)無菌環(huán)境?1、培養(yǎng)基滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體消毒(酒精、氯化汞)3、接種無菌操作(酒精、酒精燈——灼燒)4、無菌箱中培養(yǎng);5、移栽到消過毒環(huán)境中生存一段時間。第21頁總結(jié)植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素≈生長素愈傷組織芽根細胞分裂素>生長素細胞分
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