細(xì)菌病實(shí)驗(yàn)室診斷-細(xì)菌的人工培養(yǎng)（動物微生物與免疫課件）

動物微生物與免疫

細(xì)菌的人工培養(yǎng)認(rèn)知培養(yǎng)基及其類型制備培養(yǎng)基的基本要求和程序細(xì)菌的人工培養(yǎng)方法細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況認(rèn)知培養(yǎng)基及其類型01制備培養(yǎng)基的基本要求和程序02細(xì)菌的人工培養(yǎng)方法03細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況04培養(yǎng)基的定義培養(yǎng)基的分類制備培養(yǎng)基的基本要求制備培養(yǎng)基的程序分離培養(yǎng)純培養(yǎng)菌落、菌苔的定義

知識目標(biāo)掌握培養(yǎng)基、菌落的概念了解培養(yǎng)基制備的基本要求及程序理解培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用理解細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長情況在細(xì)菌鑒定中的意義能力目標(biāo)具備進(jìn)行培養(yǎng)基的制備、細(xì)菌培養(yǎng)特性鑒定的理論基礎(chǔ)重點(diǎn)培養(yǎng)基、菌落的概念培養(yǎng)基制備的基本要求及程序培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用難點(diǎn)細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長情況在細(xì)菌鑒定中的意義動物微生物與免疫

認(rèn)知培養(yǎng)基及其類型

培養(yǎng)基的定義由人工配制，將細(xì)菌生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)合理地配合在一起，供細(xì)菌生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長所需要六大營養(yǎng)要素。任何培養(yǎng)基一旦配成，必須立即進(jìn)行滅菌處理。常規(guī)選擇高壓蒸汽滅菌：103.4kPa（1.05kg/cm2）,121.3℃，15-30分鐘。根據(jù)物理狀態(tài)分類根據(jù)用途分類基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基制備方式根據(jù)細(xì)菌營養(yǎng)需要配制成液體，不添加任何凝固劑。主要用途大量繁殖細(xì)菌，大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)及在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物的基礎(chǔ)理論和應(yīng)用方面的研究。生長現(xiàn)象混濁沉淀菌膜菌環(huán)液體培養(yǎng)基制備方式在液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑，使其成為半固體狀態(tài)。一般可添加瓊脂，含量為0.3%-0.5%。主要用途觀察微生物的運(yùn)動特征、分類鑒定及噬菌體效價測定（動力檢測，菌種短期保存）接種方式穿刺接種半固體培養(yǎng)基制備方式在液體培養(yǎng)基中加入一定量凝固劑，使其成為固體狀態(tài)。一般可添加瓊脂，含量為1.5%-2.0%。主要用途細(xì)菌分離、純化、鑒定、藥敏試驗(yàn)等。生長現(xiàn)象菌落、菌苔固體培養(yǎng)基制備方式含多數(shù)細(xì)菌生長繁殖所需的基本營養(yǎng)成分，也是配制特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。常用類型肉湯蛋白胨培養(yǎng)基蛋白胨水培養(yǎng)基普通營養(yǎng)培養(yǎng)基

基礎(chǔ)培養(yǎng)基制備方式有些細(xì)菌對營養(yǎng)物質(zhì)要求比較高，通常在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入生長因子。常用類型鮮血瓊脂培養(yǎng)基血清瓊脂培養(yǎng)基巧克力培養(yǎng)基

營養(yǎng)培養(yǎng)基制備方式培養(yǎng)基中加有能與某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的其它菌落相區(qū)別的培養(yǎng)基。常用類型伊紅美蘭培養(yǎng)基三糖鐵培養(yǎng)基

淀粉培養(yǎng)基糖發(fā)酵培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基制備方式在培養(yǎng)基中加入對非目的的微生物有抑制作用，而對目的菌無影響的物質(zhì)，以有利于目的菌的檢出。其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選效率。常用類型SS瓊脂培養(yǎng)基：加入了膽鹽等抑制劑，對沙門氏等腸道菌無抑制作用，但可抑制腸道非治病菌生長，稱強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基制備方式培養(yǎng)基加還原劑（如巰基乙酸鈉），或用石蠟或凡士林封住培養(yǎng)基表面，以隔絕空氣。主要用于厭氧菌的培養(yǎng)。常用類型皰肉培養(yǎng)基肝片肉湯培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基動物微生物與免疫

細(xì)菌的人工培養(yǎng)方法發(fā)酵培養(yǎng)在適宜的條件下，發(fā)酵罐中大量培養(yǎng)微生物（細(xì)菌、真菌等）細(xì)胞和生產(chǎn)代謝產(chǎn)物的工藝過程。純培養(yǎng)劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散作用，使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開。

分離培養(yǎng)挑取一個菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，可生長出來的大量的純種細(xì)菌。

菌落純培養(yǎng)液體培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基純培養(yǎng)液體培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基菌種篩選搖瓶試驗(yàn)發(fā)酵罐中試驗(yàn)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵培養(yǎng)——由實(shí)驗(yàn)室研究到產(chǎn)業(yè)化的過程動物微生物與免疫細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象菌膜生長

沉淀生長

混濁生長

有鞭毛細(xì)菌擴(kuò)散生長，周圍渾濁。無鞭毛細(xì)菌沿穿刺線生長，周圍透明。無鞭毛細(xì)菌有鞭毛細(xì)菌菌落菌落菌苔菌落菌落：細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過一定時間培養(yǎng)后，由單個菌細(xì)胞固定一點(diǎn)大量繁殖，形成肉眼可見的堆集物。菌苔：許多菌落融合成片。光滑型菌落(S型菌落）

新分離的細(xì)菌大多呈光滑型菌落，表面光滑、濕潤、邊緣整齊。光滑型菌落粗糙型菌落黏液型菌落粗糙型菌落(R型菌落）

菌落表面粗糙、干燥、呈皺紋或顆粒狀，邊緣大多不整齊。黏液型菌落（M型菌落）

菌落黏稠、有光澤，似水珠樣。細(xì)菌多有厚莢膜或豐富粘液層。動物微生物與免疫

制備培養(yǎng)基的基本要求和程序培養(yǎng)基應(yīng)含有細(xì)菌生長繁殖所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基的pH應(yīng)在細(xì)菌生長繁殖所需的范圍內(nèi)。培養(yǎng)基應(yīng)均質(zhì)透明，便于觀察其生長性狀及生命活動所產(chǎn)生