用于介入治療的泛影葡胺明膠微球的制備

用于介入治療的泛影葡胺明膠微球的制備

固體固體栓塞是最早用于血管內(nèi)栓塞的材料。它們主要是靠血流的沖擊作用將栓塞劑送入供血豐富的病變區(qū),將供血動脈分支堵塞。微球作為一種血管內(nèi)治療的固體栓塞劑廣泛地用于臨床,在毛細(xì)血管瘤、動靜脈畸形、動靜脈瘺等的治療,以及血供豐富腫瘤的術(shù)前栓塞中具有重要意義。目前臨床使用的固體栓塞劑主要有明膠顆粒、聚乙烯醇微球、凍干硬膜等。但是進口聚乙烯醇微球價格昂貴,而國內(nèi)尚無成熟的微球制品。臨床使用的多為臨時自制的明膠顆粒,由于粒徑不好控制,常因粒徑過小而導(dǎo)致頭皮壞死,或經(jīng)“危險吻合”誤入顱內(nèi)動脈造成神經(jīng)功能障礙;或因直徑過大,栓塞效果不理想。并且,在使用微球進行栓塞的過程中需與造影劑混用來示蹤,以判斷栓塞效果。本課題研究的目的在于研制一種含有較高濃度泛影葡胺的明膠微球,并通過變換實驗條件來控制微球直徑,以適應(yīng)不同目的的栓塞。1甲醛、戊二醛,司盤-80760g/L泛影葡胺(上海信誼制藥廠),藥用明膠(上海明膠廠),異丙醇,乙醚,無水乙醇,液體石蠟,甲醛,戊二醛,司盤-80(以上均為分析純)。DU-600紫外分光光度計(德國Beckman),3F/2F微導(dǎo)管(法國Mag),X線數(shù)字減影儀(法國Balt),JJ-1型精確攪拌器(深圳市沙頭角國華儀器廠),牙科X-線直視系統(tǒng)(美國Gendex),顯微攝影儀(日本Olympus),自制振動式固相分樣器。1.1動物顯微觀察制備明膠微球,測定直徑采用乳化聚合法,將藥用明膠溶于760g/L的泛影葡胺,置于溫?zé)崴≈?制成明膠-泛影葡胺溶液。緩慢滴入快速攪拌的液體石蠟中,迅速降溫至0℃。洗脫液體石蠟,提取明膠微球,加入甲醛使其交聯(lián)固化24h,脫水風(fēng)干。分樣器過篩。顯微鏡下觀察微球分散性。顯微攝影測定微球直徑分布。隨意取30個不同直徑的微球,分別測定直徑,浸于生理鹽水中4h后,再次測量直徑,推斷其膨脹系數(shù)。測定微球顯影性按《中國藥典》,泛影酸鈉在238nm處有最大吸收峰,通過測定明膠微球中泛影酸鈉的含量來推算微球中泛影葡胺的含量。取少量微球加入生理鹽水,于牙科X線直視系統(tǒng)下拍片。動物實驗解剖兔右側(cè)股動脈,插入套管針,經(jīng)套管鞘送入3F/2F微導(dǎo)管至頸外動脈,超選進入上頜動脈、下頜動脈及面動脈分叉處。側(cè)位血管造影后,將直徑為108～216μm的明膠微球加入生理鹽水,制成懸液,推入微導(dǎo)管。微球注射后,照X線平片,導(dǎo)管位于原位,再次造影。拔出微導(dǎo)管及套管針,動脈穿刺點壓迫止血。2鹽水微球中的斷裂強度測定通過乳化聚合法制備出的明膠微球,直徑分布在30～1000μm左右。過篩后,篩出直徑分別在30～108μm、108～216μm、216～300μm和300～600μm范圍內(nèi)的明膠微球。經(jīng)顯微攝影測定,過篩后微球直徑介于上下篩網(wǎng)孔徑之間。微球在生理鹽水中的膨脹系數(shù)約為1.338?sxˉ=0.0611.338?sxˉ=0.061,根據(jù)浸泡前直徑(D1)計算浸泡后直徑(D2)的擬和方程為:D2=D1×1.26+26μm(圖1)。鏡下見微球分散性良好,相互粘連現(xiàn)象罕見(圖2)。制得的明膠微球在固態(tài)下及加入生理鹽水后拍攝的X光片均顯示,微球的顯影性良好(圖3-1、3-2)。采用DU-600紫外分光光度計測定出多次制備的明膠微球中,泛影葡胺的含量分布為31%±3%。實驗用家兔經(jīng)股動脈插管至頸外動脈造影(圖4-1),推注明膠微球。X線平片見微球在上頜動脈、下頜動脈及面動脈及其分支塑形(圖4-2)。栓塞后再次行血管造影,見上頜動脈、下頜動脈及面動脈栓塞,造影劑向頸外動脈及其它分支返流(圖4-3)。3明膠微球栓塞泛影葡胺是一種離子型、水溶性的含碘造影劑,目前在臨床上廣泛用于心、腦血管及尿路造影。滲透壓為5.4MPa,LD50為12.7g/kg。在體內(nèi)降解后經(jīng)尿路排出。目前的介入栓塞治療中,微球注入目標(biāo)血管后,栓塞效果僅能憑借近心端的血管造影來觀察。而對于栓塞結(jié)果的具體參數(shù),如:被栓塞劑填塞血管段的長度,栓塞得是否致密,栓塞血管的走行以及是否誤栓等,則無法作出準(zhǔn)確判斷。本實驗制得的明膠微球,其泛影葡胺含量約為31%,符合X線下顯影的要求。目標(biāo)血管栓塞后,可通過X線透視直觀地看到栓塞血管段的長度、走行以及栓塞是否致密等,因此對栓塞效果的判斷更確切。明膠的理化性質(zhì)穩(wěn)定,毒性低,致血栓能力較強,可生理降解,取材方便,是目前臨床上用于介入栓塞的主要材料之一。其微粒栓塞劑在臨床應(yīng)用時,主要應(yīng)解決的技術(shù)問題是粒徑的控制。已有學(xué)者研制出包裹有化療藥物的明膠微球栓塞劑,可用于頜面部惡性腫瘤的化療栓塞。但國內(nèi)目前尚無成熟的可實時顯影的明膠微球制品,用于臨床介入治療時,主要靠經(jīng)驗來判斷治療效果,故并發(fā)癥多。本實驗制成直徑分布在30～1000μm左右的微球,使用分樣器過篩后,顯微鏡下觀察及顯微攝影均證實,微球大小分布均勻,分散性良好,因此可以避免過小顆粒造成的組織壞死,肺部微小栓塞及通過顱頸部“危險吻合”等并發(fā)癥,并可達到理想的栓塞效果,真正達到可控瘤體血管內(nèi)理想閉塞的目的。在實驗中通過調(diào)節(jié)溶液濃度、水浴溫度、攪拌速度以及固化時間等條件,對明膠微球的大小進行控制,分別制成直徑分布在30～1000μm左右的微球。經(jīng)反復(fù)實驗證實,其直徑的大小受許多實驗因素的影響:在一定范圍內(nèi),其直徑與溶液濃度成正比關(guān)系,與液體石蠟的攪拌速度及乳化劑滴加量成反比關(guān)系,均與文獻報道一致。該微球理化性質(zhì)穩(wěn)定,在生理鹽水、糖水、糖鹽水中均不溶解。但由于微球置于溶液后,其中的泛影葡胺會逐漸釋放,故其顯影性有一定的時間限制,此點仍須進一步研究改進。實驗中還發(fā)現(xiàn),單純用明膠溶液