定量分析維生素e對6pd缺陷新生兒光療時氧自由基的影響

定量分析維生素e對6pd缺陷新生兒光療時氧自由基的影響

光療法是6gpd缺失的高間接膽紅素血癥（高膽）的常用治療方法，但溶血副作用顯著。臨床工作中我們常遇到G6PD缺陷致高膽光療時退黃時間長、反跳和進行性貧血現(xiàn)象。為此,我們對光療患兒進行氧自由基變化專題研究,維生素E干預和動態(tài)測定紅細胞超氧化物歧化酶(R-SOD)、血漿總超氧化物歧化酶(T-SOD)、銅鋅超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、總膽紅素(TB)、血紅蛋白(HB)及光療指數(shù),現(xiàn)將結(jié)果報告如下。1新生兒光療方法入選標準:新住院,未治療,足月,日齡<7d;血膽紅素≥光療標準,G6PD/6PGD<0.97(定量法測定紅細胞G6PD/6PGD比值),診斷G-6-PD缺陷高膽;ABO、Rh血型,抗A、抗B抗體,抗人球蛋白試驗等排除新生兒溶血病。2001-06～2003-12本院住院新生兒符合入選標準者共60例,男57例,女3例,日齡(3.51±2.18)d,按預設隨機表隨機分干預組和對照組。各組日齡、性別構(gòu)成、胎齡、體重、母乳喂養(yǎng)等均無顯著性差異。干預組:30例,男29例、女1例,光療開始0、24、48h,參照新生兒維生素E缺乏治療方案肌肉注射維生素E50mg(上海制藥九廠,批號:01050105);對照組:30例,男28例、女2例,不用維生素E,光療同干預組;正常組:30例,男28例、女2例,日齡<7d,本院出生正常新生兒,用于建立本文正常值。采用戴維醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的XHZ新生兒黃疸治療箱,雙面藍光照射,藍光譜線:425～475nm,輻照功率:上箱體≥850μm/cm2,下箱體≥700μm/cm2,每支光管連續(xù)800h更換?；純郝泱w于箱內(nèi),黑布罩蓋雙眼,小尿布保護會陰。持續(xù)光療24h,繼每隔12h再光療12h,累積光療48h。常規(guī)補充液體、監(jiān)測和觀察光療反應。光療0、24、48、72h,專人采集股靜脈血2.5ml,分肝素抗凝管1.5ml、血常規(guī)抗凝管1.0ml。專人測定R-SOD、T-SOD、CuZn-SOD、MDA、ROS,采用南京建成生物工程研究所的SOD、MDA和活性氧測定試劑盒,按說明書操作。TB用HITACHI7170、HB用SF3000分析義測定。光療指數(shù)=接受光療的小時數(shù)÷光療期間TB值下降數(shù),為患兒血膽紅素每下降17.1μmol/L所需光療小時數(shù),光療指數(shù)越大,說明光療時體內(nèi)產(chǎn)生的膽紅素越多,溶血越重。統(tǒng)計資料用xˉ±sxˉ±s表示,采用t檢驗。2結(jié)果21.光療前干預組、對照組和正常組的指標比較2兩組持續(xù)光療前后的脂質(zhì)過氧化損傷檢測持續(xù)光療24h時,R-SOD、HB降低(t=2.153、2.232,P<0.05),MDA增高(t=4.165,P<0.01);光療累積36h,R-SOD、T-SOD升高(t=2.331、4.508,P<0.05和0.01),ROS、HB降低(t=3.974、2.063,P<0.01和0.05);累積48h,HB降低(t=4.127,P<0.01),T-SOD、CuZn-SOD升高(t=5.023、2.600,P<0.01和0.05),MDA、ROS維持光療前的高水平(P>0.05)。表明對照組持續(xù)光療24h時R-SOD進一步降低、MDA增高,脂質(zhì)過氧化損傷進一步加重。隨著光療時間增加,R-SOD、T-SOD、CuZn-SOD升高,但脂質(zhì)過氧化損傷和溶血仍存在,貧血加重見表1,2。3光療前后氧自由基檢測紅細胞含抗氧化系統(tǒng),保護其免受氧化劑的損害,但G6PD缺陷者還原型輔酶Ⅱ(NADPH)生成障礙,還原型谷胱甘肽(GSH)和過氧化氫酶(Cat)不足,因此HB和細胞膜易于發(fā)生氧化性損傷。短時間光療可使正常紅細胞抗氧化能力下降,溶血加劇。鐘柏茂和周宇芳等認為:G6PD缺陷高膽新生兒對光療致溶血效應比G6PD正常高膽新生兒更敏感。維生素E具有抗氧化自由基保護細胞作用,SariKciogluSB等將Ginkgobilobaextract(EGb761)和維生素E作為降低G6PD缺陷紅細胞溶血敏感性的抗氧化劑進行了研究。故本文按照預設隨機表隨機分組,動態(tài)測定反映氧自由基、脂質(zhì)過氧化與溶血的指標,了解患兒光療時氧自由基變化規(guī)律,對完善光療理論和防治G6PD缺陷高膽光療致溶血有積極意義。本文表明:⑴G6PD缺陷高膽新生兒光療前已存在抗氧化能力下降、氧自由基增高及脂質(zhì)過氧化損害;⑵對照組持續(xù)光療24h抗氧化能力進一步降低,脂質(zhì)過氧化損傷進一步加重。光療時干預組比對照組SOD活性增高、MDA、ROS水平降低及光療指數(shù)縮小幅度大,溶血副效應減輕,進一步證明光療時溶血與氧自由基密切相關;⑶對照組累積光療時間增加,R-SOD、T-SOD、CuZn-SOD升高,但脂質(zhì)過氧化損傷和溶血仍繼續(xù)存在,貧血進行性加重,提示光療還可能導致SOD以外的抗氧化系統(tǒng)損傷,符合G6PD缺陷者兩個主要抗氧化損傷物質(zhì)—GSH和Cat不足的原理和光療可致谷胱甘肽還原酶活性降低致溶血的機制。11一般數(shù)據(jù)12組和治療13光療方案14檢測方法1干預前后抗氧化能力的變化總之,G-6-PD缺陷高膽患兒存在脂質(zhì)過氧化損害,光療時體內(nèi)氧自由基代謝失衡加劇,脂質(zhì)過氧化損傷致紅細胞破壞加重,對光療致溶血效應更敏感。維生素E干預后SOD活性增加,MDA和ROS降至光療前水平以下,光療指數(shù)縮小,光療時過氧化損害和溶血減輕。G6PD缺陷高膽與G6PD正常高膽光療時氧自由基變化是否有差異待進一步探討。G6PD缺陷高膽光療前已存在溶血