實(shí)訓(xùn)指導(dǎo)滅菌

實(shí)訓(xùn)指導(dǎo)實(shí)訓(xùn)內(nèi)容高壓滅菌鍋的使用實(shí)訓(xùn)目的與要求目的：（1）了解高壓蒸汽滅菌的基本原理及應(yīng)用范圍（2）熟練掌握高壓蒸汽滅菌的操作方法及注意事項(xiàng)要求：（1）每人均會(huì)使用高壓滅菌鍋（2）完成實(shí)訓(xùn)報(bào)告一份實(shí)訓(xùn)原理高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加熱滅菌鍋內(nèi)，通過(guò)加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌器內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度，導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。實(shí)訓(xùn)過(guò)程一、實(shí)訓(xùn)材料與試劑LB培養(yǎng)基其他培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、移液管，高壓蒸汽滅菌鍋滅菌鍋的構(gòu)造操作步驟加水將內(nèi)層鍋取出，再向外層鍋內(nèi)緩慢加入適量的水使水。（未加水時(shí)滅菌鍋會(huì)報(bào)警，當(dāng)水加到適宜的水位后會(huì)停止報(bào)警）。裝鍋放回內(nèi)層鍋，并裝入待滅菌物品。加蓋將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對(duì)稱的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。（本次使用的高壓滅菌鍋，當(dāng)蓋上蓋子時(shí)會(huì)自動(dòng)鎖住，直至消毒結(jié)束后才可打開(kāi)，故在鎖蓋之前務(wù)必放入所有需要滅菌的物品）。加熱、排氣打開(kāi)放氣閥，同時(shí)接通電源，進(jìn)行加熱，待鍋內(nèi)水沸騰并有大量水蒸氣從排氣閥冒出時(shí)，維持3-5min以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。保溫保壓當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間。出鍋滅菌所需的時(shí)間到后，關(guān)閉電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表降至“0”時(shí)，溫度下降到70攝氏度時(shí)，打開(kāi)放氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)蓋子，取出滅菌物品。保養(yǎng)滅菌完畢取出物品后，將鍋內(nèi)余水倒出，以保持內(nèi)壁及內(nèi)膽干燥，蓋好鍋蓋。無(wú)菌檢查將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37℃溫箱培養(yǎng)24h，經(jīng)檢查若無(wú)雜菌生長(zhǎng)，即可待用。結(jié)果與分析（一）注意事項(xiàng)1．切勿忘記加水，同時(shí)加水量不可過(guò)少，以防滅菌鍋燒干而引起炸裂事故。2．壓力一定要降到“0”時(shí)，才能打開(kāi)排氣閥，開(kāi)蓋取物。否則就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染，甚至灼傷操作者。（二）思考題1．高壓蒸汽滅菌開(kāi)始之前，為什么要將鍋內(nèi)冷空氣排盡？滅菌完畢后，為什么要待壓力降低為“0”時(shí)才