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耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS)檢測1、 苯唑西林瓊脂篩選試驗培養(yǎng)基:MH瓊脂+4%NaCL和苯唑西林(6ug/ml)傾注成平板。方法:對瓊脂可進行“點”接種,或者用棉拭子蘸取相當(dāng)于0.5麥氏單位的菌懸液進行,劃線”接種。35笆孵育24小時,為最好地從凝固酶陰性葡萄球菌中檢測耐甲氧西林菌株,需要獎平板35°C孵育48小時。結(jié)果判斷:任何生長即為MRS質(zhì)控菌株:金黃色葡萄球菌ATCC29213——敏感株2、 紙片擴散法(K-B法)苯唑西林和頭孢西丁檢測mecA基因介導(dǎo)的葡萄球菌耐藥性解釋標準菌種頭孢西丁紙片法(mm) 苯唑西林紙片法(mm)SIRS I R金黃色葡萄球菌和路鄧葡萄球菌凝固酶陰性葡萄球菌N22 — W21N13 11-12W10N25 - W24注:1、用透射光觀察苯唑西林抑菌圈內(nèi)如有任何可見的生長,都表示苯唑西林耐藥,而頭抱西丁用反射光觀察抑菌圈內(nèi)如有任何可見的生長,都表示頭抱西丁耐藥。2、根據(jù)此解釋標準耐藥者既為耐甲氧西林的葡萄球菌藥敏實驗紙片擴散法的操作流程于純培養(yǎng)平板上挑取相同的菌落4-5個放入2ml無菌生理鹽水中稀釋呈0.5麥氏單位。用無菌棉簽蘸取菌液在試管壁上擠壓幾次,壓去多余的菌液,涂布整個MH平板表面,反復(fù)數(shù)次,每次旋轉(zhuǎn)平板60度,使整個平板涂布均勻。涂布后的平板于室溫中干燥3-5分鐘,用無菌鑷子取藥敏紙片貼于平板表面,并用鑷尖輕壓一下紙片,使其貼平。每張紙片的間距不小于24mm,紙片的中心距平板的邊緣不小于15mm,90mm的平板上宜貼6張藥敏紙片。將貼好紙片的平板置35o孵育18-24小時后取出判斷結(jié)果。判斷結(jié)果:根據(jù)(CLSI規(guī)則)抑菌環(huán)的大小,判斷為敏感(SX耐藥(R)、或中度敏感(I)。不應(yīng)報告為敏感抗生素和微生物組合依據(jù)CLSI規(guī)則第十八版信息下列抗生素/微生物組合在體外可表現(xiàn)活性,但在臨床上無效,不應(yīng)報告敏感微生物不應(yīng)報告為敏感的抗生素藥產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、奇異變形桿菌青霉素類,頭孢菌素類及氨曲南沙門菌屬,志賀菌屬i>n代頭孢菌素類和氨基糖甙類耐苯唑西林的葡萄球菌屬青霉素類,&-內(nèi)酰胺類鄧-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合物,頭孢菌素類,碳青霉烯類腸球菌屬氨基糖甙類(除高濃度外),頭
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