白扁豆生產(chǎn)中總磷脂含量的測定

白扁豆生產(chǎn)中總磷脂含量的測定

白豆來自豆科植物。為藥食兼優(yōu)的食物,以種子、種皮(扁豆衣)、花(扁豆花)供藥用或食用。該藥臨床多經(jīng)炒制后應(yīng)用,具健脾化濕,和中消暑的功效,用于脾胃虛弱,食欲不振,大便溏瀉,白帶過多,暑濕吐瀉,胸悶腹脹等。有關(guān)白扁豆的有效成分,據(jù)報(bào)道含有磷脂類成分。本實(shí)驗(yàn)著重以湖南省平江縣白扁豆GAP基地不同試驗(yàn)小區(qū)為研究對象,同時對照云南、貴州、江西等地產(chǎn)的白扁豆,對其總磷脂及其組分的含量進(jìn)行了比較分析,為白扁豆的質(zhì)量研究提供了科學(xué)的依據(jù)?，F(xiàn)將其總磷脂的含量分析報(bào)道如下,其他方面的研究我們將陸續(xù)予以報(bào)道。1設(shè)備和材料1.1儀器UV-1600紫外可見分光光度計(jì)(北京)。1.2l-1硫酸磷標(biāo)準(zhǔn)液:為磷酸二氫鉀配成0.01mg·ml-1溶液。磷顯色液:為3mol·L-1硫酸：水：2.5%鉬酸銨：10%抗壞血酸(1：5：1：1)配制而成的溶液,配制時按上述順序加入,且當(dāng)天使用。消化液:為70%高氯酸(GR)。Folch試劑為氯仿：甲醇(2：1)配制而成的溶液。1.3白灰豆白對于白對于白對于明金的產(chǎn)白扁豆采自湖南省平江縣GAP種植基地16個試驗(yàn)小區(qū)產(chǎn),市售白扁豆分別產(chǎn)于云南、江西、貴州、桂東等省,均經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥植資源教研室周日寶教授確認(rèn)為正品。2方法和結(jié)果2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制將分析純磷酸二氫鈉預(yù)先置105℃烘箱烘至恒重,然后放在干燥器中使溫度降至室溫,精密稱取磷酸二氫鉀0.0220g,用水溶解置50ml容量瓶中定容,配成0.01mg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)液作為貯備液置冰箱備用。2.2改良folch試劑精密稱取干燥至恒重的白扁豆粉末(40目)1.005g,置具塞三角錐形瓶中,精密量取改良Folch試劑100ml,稱定重量后,置超聲波儀中提取40min,稱量補(bǔ)足減少的溶劑,過濾,待用。2.3方法研究2.3.1內(nèi)容物的預(yù)處理精密吸取0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml貯備液于硬質(zhì)試管中,加入0.25ml消化液,進(jìn)行消化,冷卻后小心將內(nèi)容物以顯色劑沖洗轉(zhuǎn)至50ml容量瓶中,以顯色劑定容;60～70℃水浴恒溫10min,取出,冷卻至室溫,以空白管對照,于700nm處測定吸光度為0.000,0.1299,0.2747,0.4081,0.4974,0.6323。以進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo),吸光度A為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得標(biāo)準(zhǔn)方程為:Y=0.02023X+0.061375,r=0.9973。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液及空白管對白砂糖吸收劑用量的影響精密吸取0.2ml貯備液,加入0.25ml消化液進(jìn)行消化,冷卻后小心將內(nèi)容物以顯色劑沖洗轉(zhuǎn)至5ml容量瓶中,以顯色劑定容;60～70℃水浴恒溫10min,取出,冷卻至室溫,以空白管對照,于700nm處每隔2h測定1次,其吸光度分別為:0.9591,0.9574,0.9585,0.9598,0.9601。其RSD%=0.113%,可見供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。2.3.3吸光度測定精密吸取0.2ml貯備液,按上法連續(xù)測定5次,其吸光度分別為:0.9677,0.9682,0.9683,0.9684,0.9687。其RSD%=0.038%,表明本法所用儀器精密度較高。2.3.4吸光度的測定精密吸取0.2ml貯備液5份,按上法測定,其吸光度分別為:0.9490,0.9477,0.9603,0.9472,0.9475。其RSD%=0.59%,表明本法重復(fù)性較好。2.3.5貯備液消化劑的制備精密吸取1號樣0.5ml,5份,分別加入貯備液0.1、0.15、0.2、0.25、0.3ml,按前法進(jìn)行消化后,定容至50ml,然后測定其吸光度。(見表1)2.4磷顯色劑對標(biāo)準(zhǔn)管冷卻按文獻(xiàn)采用總磷脂鉬藍(lán)比色法進(jìn)行測定。精密吸取0.5ml上述提取液,于硬質(zhì)玻璃試管中,水浴上揮干溶劑,加消化液0.2ml,另取2只試管作為標(biāo)準(zhǔn)管及空白管,各加消化液0.2ml,于標(biāo)準(zhǔn)管中加入磷標(biāo)準(zhǔn)液。將上述試管放在試管架上,置電爐上消化,試管內(nèi)容物由棕黑色變?yōu)闊o色透明時使冷卻,于各管中精密加入磷顯色劑5ml,放入60～70℃水浴中恒溫10min,取出冷卻至室溫。以空白管調(diào)零,于700nm波長比色測定樣品磷脂,將所得結(jié)果乘以磷脂轉(zhuǎn)換系數(shù)25即得磷脂含量。2.5結(jié)果中藥材白扁豆磷脂含量測定的結(jié)果。(見表2)3微域生態(tài)環(huán)境從表2可知,湖南省平江縣基地產(chǎn)的白扁豆中總磷脂的含量與云南、貴州、江西等地產(chǎn)的白扁豆中總磷脂的含量相當(dāng),且含量比較穩(wěn)定。而白扁豆在生長發(fā)育過程中喜溫暖氣候、濕潤環(huán)境,怕寒霜。以微酸性至微堿性的粘壤土、壤土或砂質(zhì)壤土最好,礫土及鹽堿土則不宜栽種。而平江縣位于湖南省東北部,自然條件具有地質(zhì)構(gòu)造復(fù)雜,四面環(huán)山,群峰密布,溪谷縱橫,地勢比較大,氣候垂直變化突出,土壤垂直分布明顯,植被垂直差異性強(qiáng)等特點(diǎn)。且具有深山谷地多,山坡日照時間短,直射光少等特點(diǎn),形成了很多適合白扁豆生長的微域生態(tài)環(huán)境。另外,平江縣民間有著悠