十一電導(dǎo)法測定難溶電解質(zhì)的溶解度

#實驗二十四血清或尿液中無機磷的測定【目的要求】掌握血清和尿液中無機磷含量測定原理及操作方法。【基本原理】人體內(nèi)的無機鹽以鈣和磷含量最多。而血清或尿液中無機磷含量的高低與某些疾病有著密切關(guān)系。因此在臨床上常用測定血清或尿液中無機磷含量，作為診斷某些疾病的重要指標。血清和尿液中無機磷的主要存在形式是H2PO；和HPOj-。測定時，以三氯醋酸沉淀蛋白，在濾液中加鉬酸試劑與磷結(jié)合成磷鉬酸，再用氯化亞錫使其還原為藍色化合物。12H2MoO4+H3PO4—H3[P（Mo3O10）4]磷鉬雜多酸（黃色）[P（Mo3010T3-+11H+SnCl2.（MoO2'4MoO3）2'HPO+2MoO.+4HO2 32 3 4 2 2磷鉬藍（藍色）利用溶液的藍色進行比色測定，根據(jù)標準溶液的濃度c和吸光度A，用直接比較法，即用Ac—測二-測Ac標標求出血清或尿液中無機磷的濃度。人體血磷的正常值：成人10?15mmol?L-1,兒童15?20mmol?L-1?！緝x器和藥品】離心機，吸量管，分光光度計，001mg?m1-1磷標準液，鉬酸試劑，06mol?L-1三氯醋酸（TCA）,SnC12貯存液，SnC12應(yīng)用液（溶液配制見附錄）。【實驗步驟】1．血樣處理將血樣離心沉降。取血清05ml置離心管中，加06mol?L-1[CC13COOH]（TCA）20m1,立即振蕩均勻，離心沉淀蛋白，取上清液備用。2．尿液處理吸取24h混合尿液100m1,加蒸餾水900ml混勻，過濾，濾液備用。3．血清、尿液中無機磷測定按表3-24-1準確量取上述各溶液分別置于試管中，混勻，放置1min。用lcm比色皿，在波長520nm處進行比色，以空白管校正吸光度到零點，讀取各管吸光度填入表中。表3-24-1

c血磷(mmol?c血磷(mmol?L-1)=Ac待測而X 標準磷（mg/ml）X1000X血清稀釋倍數(shù)A標準磷c尿磷(mmol?L-1)=A待測尿A標準磷標準磷（mg/ml）X1000X尿液稀釋倍數(shù)M磷【注意事項】1．血清不能溶血，采血后應(yīng)盡快將血清分離出，以免血細胞內(nèi)磷脂水解而使無機磷增加。2.SnC12有強腐蝕性，切莫接觸皮膚。加入SnC12溶液時應(yīng)隨加隨搖，馬上混勻，否則變混。SnC12溶液很不穩(wěn)定，如果生成的鉬藍為綠色，即不能再用。且標準管與待測管加SnC12溶液的相隔時間不應(yīng)過長。【附注】.鉬酸試劑的配制鉬酸不穩(wěn)定，常用其鈉鹽與硫酸反應(yīng)。將75%鉬酸鈉與5mol?L-1H2s04等體積混合即可。.磷標準溶液0.01mg?ml-1的配制將KH2PO4（分析純）置110c烘烤2h,放于干燥器內(nèi)冷卻。準確稱取004390g，溶解，加氯仿2ml防腐，加水稀釋至1000m1。貯于冰箱中。.SnCl2試劑的配制SnCl2貯存液（SnCl2溶液極不穩(wěn)定，故需配成貯存液）：稱取SnCl210g，加25ml濃鹽酸置棕色瓶中，溶解后再加數(shù)片錫箔，密閉，在4℃冰箱中保存。8周內(nèi)有效。SnCl2應(yīng)用液：取SnCl2貯存液05m1,加蒸餾水稀釋至100m1,混勻。室溫20℃以上可供當(dāng)日使用，30℃以上時，僅供半天使用。若應(yīng)用液于磷試劑生成的磷鉬藍顏色呈藍綠色或綠色時，則不能再使用。此