感冒清熱顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

感冒清熱顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

感冒清熱諺語于2000年公布。包含芥末、薄荷、防風(fēng)、柴胡、紫薇、葛根、桔梗、苦杏仁、白芷、苦地丁和蘆葦草的材料。功能為疏風(fēng)散寒，解表清熱。用于風(fēng)寒感冒、頭痛發(fā)熱、惡寒身痛、鼻流清涕、咳嗽咽干等。原標(biāo)準(zhǔn)僅有葛根素、苦地丁的薄層鑒別。為了能更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證臨床療效，我們對(duì)本制劑中的其它藥材進(jìn)行了薄層鑒別研究，實(shí)驗(yàn)方法如下。1材料和機(jī)器1.1spu-自動(dòng)噴霧顯色器層析缸PBQ-Ⅰ型薄層自動(dòng)鋪板器（重慶南岸新力實(shí)驗(yàn)電器廠）；SPU-Ⅰ自動(dòng)噴霧顯色器（日本）；定量毛細(xì)管（美國Drummond公司），（100cm×200cm）（上海信誼），硅膠G、H、GF254（薄層層析用，青島海洋化工有限公司）。1.2對(duì)照藥材，感冒熱?？嘈尤受諏?duì)照品（含量測(cè)定用，批號(hào)：820-9401，中國藥品生物制品檢定所）；防風(fēng)對(duì)照藥材（批號(hào)：947-9201，中國藥品生物制品檢定所）；荊芥對(duì)照藥材（批號(hào)：911-9104、0911-200107，中國藥品生物制品檢定所）；柴胡對(duì)照藥材（批號(hào)：0992-200102，中國藥品生物制品檢定所）。感冒清熱顆粒：市售。其它試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1辣根的tcl識(shí)別2.1.1供試品溶液的制備取本品1袋，研細(xì)，置具塞錐形瓶中，加甲醇50mL，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水飽和的正丁醇提取3次，每次40mL。合并正丁醇液，用氨試液40mL洗滌，棄去氨液，正丁醇蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另取荊芥對(duì)照藥材0.8g，加水微沸30min，濾過，濾液濃縮至約30mL，用水飽和的正丁醇提取3次，同法制成對(duì)照藥材溶液。2.1.2準(zhǔn)分離主溶液的制備按處方比例稱取除荊芥的其它藥材，按本品制備工藝及供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。2.1.3色譜鑒別測(cè)定吸取上述兩種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以庚烷-醋酸乙酯-甲醇（8:2:0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見圖1。2.2防風(fēng)tlc識(shí)別2.2.1供試品溶液的制備取本品1袋，研細(xì)，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇50mL，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另取防風(fēng)對(duì)照藥材0.5g，加水微沸30min，濾過，濾液濃縮至約30mL，用氯仿振搖提取2次，每次20mL，棄去氯仿液，余液在水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。2.2.2準(zhǔn)分離主溶液的制備按處方比例稱取除防風(fēng)的其它藥材，按本品制備工藝及供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。2.2.3酶活劑測(cè)試吸取上述2種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇（10:3:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，結(jié)果見圖2。2.3柴胡tlc識(shí)別2.3.1正丁醇提取方法取柴胡對(duì)照藥材1g，加水微沸30min，濾過，濾液濃縮至約30mL，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇提取3次，每次30mL。合并正丁醇液，用氨試液40mL洗滌，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。2.3.2準(zhǔn)分離主溶液的制備按處方比例稱取除柴胡的其它藥材，按本品制備工藝及供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。2.3.3抗菌、標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定吸取荊芥鑒別項(xiàng)下供試品溶液及上述對(duì)照藥材溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-水（8:2:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以4%對(duì)二甲氨基苯甲醛硫酸乙醇溶液（1→10），在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，放置10min檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。結(jié)果見圖3。2.4苦杏仁tlc的識(shí)別2.4.1供試品溶液的制備取本品內(nèi)容物20g，研細(xì)，加甲醇50mL，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干。殘?jiān)铀?0mL微熱使溶解，放冷，全部通過已處理好的D101大孔吸附樹脂柱（內(nèi)徑15mm，高10cm，加水30mL預(yù)洗1次）上，棄去水液，用氨溶液（4→100)30mL洗脫，棄去氨液，再用水30mL洗脫，棄去水液，繼用20%乙醇80mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另取苦杏仁甙對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液。2.4.2準(zhǔn)分離主溶液的制備按處方比例稱取除苦杏仁的其它藥材，按本品制備工藝及供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。2.4.3硫酸乙醇溶液的制備吸取上述兩種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水（15:40:22:10)10℃以下放置12h的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，結(jié)果見圖4。3薄層鑒別鑒別3.1采用上述方法對(duì)感冒清熱顆粒在不同溫度、濕度條件下考察，均能檢出與對(duì)照品或?qū)φ账幉南嗤陌唿c(diǎn)，薄層色譜鑒