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平胃散加減方中黃芩、連翹、陳皮的薄層色譜鑒別研究
0平胃散的臨床應(yīng)用《平胃散》收錄在《醫(yī)學(xué)方劑集》第十卷中,這是一個簡單的食譜。它由白術(shù)、厚樸、陳皮和甘草組成。功能是干燥。主治濕困脾胃,脘腹脹滿,不思飲食,口淡無味,嘔吐惡心,噯氣吞酸,常多泄瀉,肢體沉重、怠惰嗜臥,舌苔白膩而厚,脈緩。由于其療效顯著,平胃散有諸多加減方應(yīng)用于臨床,并且經(jīng)現(xiàn)代研究證明,平胃散還具有改善免疫,調(diào)控腸黏膜機(jī)械屏障,修復(fù)腸黏膜離子泵等作用。本文中平胃散加減方,由蒼術(shù)、厚樸、陳皮、白術(shù)、砂仁、黃芩、連翹、甘草組成。本文著重探討采用薄層色譜法對方中黃芩、連翹、陳皮進(jìn)行定性鑒別。1合成關(guān)注酯、苯、甲醛、三氯甲烷、甲醇酯等為分析純的高效液相水解液的質(zhì)量評定黃芩、連翹、陳皮藥材由康美藥業(yè)股份有限公司提供,經(jīng)廣東省藥學(xué)院中藥教研室鑒定為藥典正品。甲苯、醋酸乙酯、甲醇、甲酸、三氯甲烷、乙醇等均為分析純。硅膠G薄層板(GF254硅膠,200~300目,青島海洋化工廠)、聚酰胺柱(聚酰胺,Pharmacia公司)等為自制。2方法和結(jié)果2.1黃鼠的識別2.1.1供試品上樣液的制備稱取平胃散加減方粉末約1.0g,置回流提取容器中,加乙酸乙酯-甲醇混合溶液30ml(體積比3∶1),加熱至微沸,提取40分鐘,待冷卻后濾過,濾液置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中,揮干溶劑后得殘渣,加入甲醇5ml使溶解,取上清液,微孔濾膜過濾后作為供試品上樣液。2.1.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的上游樣品2.1.3從陰性樣品中采集液體稱取平胃散加減方陰性樣品粉末(平胃散加減方去除黃芩)約1.0g,按上述方法,制成陰性樣品上樣液。2.1.4氯化鐵顯色劑的合成分別吸取供試品溶液8μl,對照藥材溶液6μl,陰性樣品溶液6μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶3∶1∶2)為展開劑,預(yù)飽和30分鐘,展開,取出,晾干,噴以三氯化鐵顯色劑,在110℃下加熱至斑點(diǎn)顯色清晰,見圖1。2.2連翹的鑒定2.2.1供試品溶液的制備取平胃散加減方粉末1g,加三氯甲烷30ml,加熱回流1小時,濾過,棄去濾液,藥渣揮干,加甲醇40ml,加熱回流1小時,濾過,濾液蒸干,加水溶解,加于聚酰胺柱(14~30目,3g,內(nèi)徑1~1.2cm,用水50m預(yù)洗)上,用水50ml洗脫,棄去水液,再用乙醇100ml洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備2.2.3陰性樣品溶液的制備2.2.4硅膠g薄層板的制備吸取供試品溶液4μl,對照藥材溶液4μl,陰性樣品溶液4μl,分別點(diǎn)于同一以含5%磷酸二氫鈉的羥甲基纖維素鈉溶液制備的硅膠G薄層板上,以苯作展開劑,薄層板置展開缸中預(yù)飽和30分鐘,展開,取出,晾干,噴以香草醛硫酸試液,加熱至斑點(diǎn)顯色清晰;見圖2。2.3陳皮的鑒定2.3.1供試品液的制備取平胃散加減方粉末10g,加甲醇25ml,超聲處理15分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣用水20m溶解,離心,上清液上聚酰胺柱,分別用水40ml,30%乙醇40ml洗脫,30%的洗脫液蒸干,殘渣加1ml甲醇溶解,作為供試品液。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備2.3.3陰性樣品溶液的制備2.3.4聚酰胺薄膜的檢測吸取上述供試品及陰性供試品8μl,對照藥材溶液2μl,點(diǎn)于同一塊聚酰胺薄膜上。以丙酮-水(1∶1)為展開劑,噴1%AlCl3乙醇溶液,晾干,在365nm處檢視。供試品色譜中,在與對照藥材相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。見圖3。3薄層色譜測定成分類似成分的藥材目前對中藥材的鑒定,還是一個難點(diǎn)。對于中藥材飲片,可以憑借經(jīng)驗進(jìn)行性狀鑒別,再輔以其它含量測定手段來斷定質(zhì)量;而對于一些粉末、丸劑及其半成品,則很難通過性狀進(jìn)行鑒別,同時,即使采用藥典中含量測定法,也只能說明某種特定成分的含量,而不能確定后是否有其它含類似成分的藥材摻入。這種情況下,薄層色譜就顯示出它的優(yōu)越性,它可以比較準(zhǔn)確地對某種藥材進(jìn)行鑒定,成本低廉,甚至可以進(jìn)行簡單的定量。在上述3種方法的薄層色譜中,作為定性鑒別的方法,簡單、快捷、準(zhǔn)確,同時陰性樣品溶液無干擾,斑點(diǎn)清晰可見,提示我們可以采用薄層掃描進(jìn)行定量測定。在后續(xù)工作中我們會重點(diǎn)研究使用薄層色譜法同時進(jìn)行定性鑒別和含量測定。稱取黃芩藥材粉末約1.0g,按供試品上樣液制備方法,制成對照品上樣液。取連翹藥材粉末1g,按供試品溶液的制備方法,制成對照藥材溶液。取平胃散加減方陰性樣品粉末1
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