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1.關(guān)于酶的練習(xí)題例:鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變。檢測(cè)這種堿基序列的改變必須使用的酶是()A.解旋酶B.DNA連接酶C.限制性內(nèi)切酶D.RNA聚合酶答案:C解析:一個(gè)DNA分子中有多個(gè)基因,而控制合成鐮刀型細(xì)胞貧血癥血紅蛋白的基因只是DNA分子中的一個(gè)基因,假設(shè)要檢測(cè)其堿基序列,必須將其從DNA分子中切下來,而這個(gè)過程那么需要限制酶。答案A:解旋酶用于DNA分子復(fù)制B:DNA連接酶用于目的基因和運(yùn)載體的結(jié)合D:RNA聚合酶用于RNA的復(fù)制2.(2021)某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn),如圖中箭頭所指,如果該線性DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,那么會(huì)產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長(zhǎng)度的DNA片段?,F(xiàn)有多個(gè)上述線性DNA分子,假設(shè)在每個(gè)DNA分子上至少有一個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷,那么理論上講,經(jīng)該酶酶切后,這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的DNA片段種類數(shù)是A.3B.4C.9D.12C3.限制性內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA序列并進(jìn)行剪切,不同的限制性內(nèi)切酶可以對(duì)不同的核苷酸序列進(jìn)行剪切。現(xiàn)以三種不同的限制性內(nèi)切酶對(duì)長(zhǎng)度為8kb大小的DNA進(jìn)行剪切后,用凝膠電脈別離各核酸片斷,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。請(qǐng)問:三種不同的限制性內(nèi)切酶在此DNA片斷上相應(yīng)切點(diǎn)的位置是〔〕C4、(高考試題:2007廣東生物)7.現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(by〕的DNA分子,用限制性核酸內(nèi)切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000by,用Kpn1單獨(dú)酶切得到400by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子,用EcoRI,Kpnl同時(shí)酶切后得到200by和600by兩種長(zhǎng)度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的選項(xiàng)是【答案】D2.獲取目的的基因技術(shù)例:如果所需要的目的基因的序列完全不知,或只知道目的基因的一段,或想從一種生物體內(nèi)獲得很多基因,選用以下方法可以獲得目的基因的是()A.直接從含有目的基因的生物體內(nèi)獲取B.構(gòu)建基因文庫(kù)C.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增D.通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成答案:B解析:假設(shè)目的基因序列完全不知,或只知道基因序列的一段,就無法利用A、C、D三項(xiàng)所述方法獲得,而只能采用構(gòu)建基因文庫(kù)的方法獲取目的基因。3.關(guān)于運(yùn)載體例:在目的基因操作中,運(yùn)載體的本質(zhì)是雙鏈DNA分子,根據(jù)基因進(jìn)行定位,以下功能不需要運(yùn)載體就能完成的是()A.目的基因的轉(zhuǎn)運(yùn)B.目的基因的擴(kuò)增C.目的基因的表達(dá)D.目的基因的定位答案:D解析:目的基因的定位是在含有目的基因的生物體中,根據(jù)基因進(jìn)行定位,這時(shí)候還沒有引入運(yùn)載體。7.關(guān)于DNA重組技術(shù)根本工具的說法正確的選項(xiàng)是()A.DNA連接酶只能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端B.細(xì)菌細(xì)胞中含有的限制酶不能對(duì)自身DNA進(jìn)行剪切C.限制酶切割DNA后一定能產(chǎn)生黏性末端D.天然的質(zhì)粒就可以用來作為載體B8、蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因?qū)朊藁ㄖ仓旰笫欠褚驯磉_(dá),從生物個(gè)體水平進(jìn)行檢測(cè)的方法()A.是否有抗藥性 B.是否有相應(yīng)的抗蟲性狀C.是否能檢測(cè)至標(biāo)記基因D.是否能別離到目的基因B9、如果科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因工程,成功地把一名女性血友病患者的造血細(xì)胞進(jìn)行改造,使其凝血功能恢復(fù)正常。那么,她后來所生的兒子中:〔〕A.全部正常
B.一半正常
C.全部有病
D.不能確定C
10、我國(guó)科學(xué)工作者經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金芽孢桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死,而此毒蛋白對(duì)人畜無害。通過科技攻關(guān),我國(guó)科工作者已成功地將該毒蛋白基因?qū)嗣藁ㄖ仓牦w內(nèi)并實(shí)現(xiàn)了表達(dá)。由于棉鈴蟲吃了新品種“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉〞植株后就會(huì)死亡,所以該棉花新品種在近年推廣后,已收到了很好的經(jīng)濟(jì)效益,請(qǐng)據(jù)以上所給材料答復(fù)以下問題:(1)害蟲抗藥性的增強(qiáng)是的結(jié)果(2〕“轉(zhuǎn)基因〞抗蟲棉新品種的培育應(yīng)用了新技術(shù)(3)在培育新基因抗蟲棉新品種過程中,所用的基因的“剪刀〞是,基因的“針線〞是,基因的“運(yùn)載工具〞是(5)“轉(zhuǎn)基因抗蟲棉〞抗害蟲的遺傳信息傳遞過程可以表示為(6)該科技成果在環(huán)保上的重要作用是
自然選擇基因工程(或DNA重組技術(shù))限制酶DNA連接酶;運(yùn)載體抗蟲基因mRNA毒蛋白減少農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染,保護(hù)了生態(tài)環(huán)境11、番茄在運(yùn)輸和貯藏過程中,由于過早成熟而易腐爛,應(yīng)用基因工程技術(shù),通過抑制某種促進(jìn)果實(shí)成熟激素的合成能力,可使番茄貯藏時(shí)間延長(zhǎng),培育成耐貯藏的番茄新品種,這種轉(zhuǎn)基因番茄已于1953年在美國(guó)上市,請(qǐng)答復(fù):(1)在培育轉(zhuǎn)基因番茄的基因操作中,所用的基因的“剪刀〞是,基因的“針線〞是,基因的“運(yùn)輸工具〞是(2)與雜交育種、誘變育種相比,通過基因工程來培育新品種的主要優(yōu)點(diǎn)是限制酶DNA連接酶運(yùn)載體目的性強(qiáng),育種周期短;克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙12、〔2005·江蘇生物·38〕(9分)在植物基因工程中,用土壤農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒作為運(yùn)載體.把目的基因重組人Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段中,再將重組的T-DNA插入植物細(xì)胞的染色體DNA中。
(1)科學(xué)家在進(jìn)行上述基因操作時(shí),要用同一種
分別切割質(zhì)粒和目的基因,質(zhì)粒的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過
而黏合。
(2)將攜帶抗除草劑基因的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入二倍體油菜細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)、篩選獲得一株有抗除草劑特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析,該植株含有一個(gè)攜帶目的基因的T-DNA片段,因此可以把它看作是雜合子。理論上,在該轉(zhuǎn)基因植株自交F1代中,仍具有抗除草劑特性的植株占總數(shù)的
,原因是
(3)種植上述轉(zhuǎn)基因油菜,它所攜帶的目的基因可以通過花粉傳遞給近緣物種,造成“基因污染〞。如果把目的基因?qū)巳~綠體DNA中,就可以防止“基因污染〞,原因是
限制酶3/4
雌雄配子各有1/2含抗除草劑基因;受精時(shí),雌雄配于隨機(jī)結(jié)合
。
葉綠體遺傳表現(xiàn)為母系遺傳,目的基因不會(huì)通過花粉傳遞并在下一代中顯現(xiàn)出來
。
堿基互補(bǔ)配對(duì)
13.〔12分〕某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHI三種限制酶切割位點(diǎn),同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如下圖,請(qǐng)答復(fù)以下問題。⑴將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用SalI酶切,酶切產(chǎn)物用___________催化連接后,兩個(gè)DNA片段的連接結(jié)果有
種。DNA連接酶3⑵在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用__________
兩種酶對(duì)
進(jìn)行切割,以保證重組DNA序列的唯一性。SalⅠ、HindⅢ質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHI三種限制酶切割位點(diǎn)⑶為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中參加,理由是。氨芐青霉素重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞⑷將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用
技術(shù),愈傷組織經(jīng)
進(jìn)而形成完整植株,此過程除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加
。植物組織培養(yǎng)植物激素細(xì)胞增殖和分化〔生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑或生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素〕14、應(yīng)用生物工程技術(shù)獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)據(jù)圖答復(fù)以下問題:
〔1〕在培育轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛過程中,①過程需要的工具酶是,②過程常用的方法是。目的基因人的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛無限增殖調(diào)控基因(prG)導(dǎo)入篩選體外培養(yǎng)單克隆抗體棉花受體細(xì)胞抗蟲棉抗蟲基因重組Ti質(zhì)粒①②③④⑤ⅡⅢ受精卵檢測(cè)拓展練習(xí)限制酶、DNA連接酶顯微注射法〔2〕轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛可通過分泌的乳汁來生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素,在基因表達(dá)載體中,人生長(zhǎng)激素基因的首端必須含有。③過程培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段,可以采用技術(shù),培育出多頭相同的轉(zhuǎn)基因犢牛。啟動(dòng)子目的基因人的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛無限增殖調(diào)控基因(prG)導(dǎo)入篩選體外培養(yǎng)單克隆抗體棉花受體細(xì)胞抗蟲棉抗蟲基因重組Ti質(zhì)粒①②③④⑤ⅡⅢ受精卵檢測(cè)胚胎分割和胚胎移植〔3〕prG能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂,通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體,Ⅱ最可能是細(xì)胞,Ⅲ代表的細(xì)胞具有的特點(diǎn)。目的基因人的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛無限增殖調(diào)控基因(prG)導(dǎo)入篩選體外培養(yǎng)單克隆抗體棉花受體細(xì)胞抗蟲棉抗蟲基因重組Ti質(zhì)粒①②③④⑤ⅡⅢ受精卵檢測(cè)效應(yīng)B既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體〔4〕在抗蟲棉培育過程中,④過程中的受體細(xì)胞如果采用愈傷組織細(xì)胞,與采用葉肉細(xì)胞相比較,其優(yōu)點(diǎn)是,⑤過程采用的技術(shù)是。目的基因人的生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)人生長(zhǎng)激素基因牛無限增殖調(diào)控基因(prG)導(dǎo)入篩選體外培養(yǎng)單克隆抗體棉花受體細(xì)胞抗蟲棉抗蟲基因重組Ti質(zhì)粒①②③④⑤ⅡⅢ受精卵檢測(cè)全能性高植物組織培養(yǎng)4.蛋白質(zhì)工程例:蛋白質(zhì)工程中,需要直接操作的對(duì)象是()A.氨基酸結(jié)構(gòu)
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