野生歐李實生類型和嫁接類型鈣素含量的研究

野生歐李實生類型和嫁接類型鈣素含量的研究

奧羅斯赫維尼是中國獨特的野生果樹資源。這種水果富含糖、蛋白質(zhì)和維生素c。同時，它還含有大量孩子需要的氨基酸，尤其是水果中的鈣和鐵含量高，深受消費者歡迎。因此,研究揭示野生歐李果實中鈣素營養(yǎng)及果實采后鈣素營養(yǎng)生理變化,對其開發(fā)利用具有重要意義。研究表明:果實缺鈣或鈣與其他元素之間失衡是果實生理病害發(fā)生的主要原因,而歐李果實生理病害少可能與果實鈣含量高有關(guān),因為果實組織中如果維持較高的鈣水平,可以保持果實硬度,降低呼吸速率,抑制乙烯的產(chǎn)生,延長果實儲藏壽命,提高果實的商品價值。筆者研究發(fā)現(xiàn):歐李果實鈣累積主要發(fā)生在幼果細(xì)胞分裂期和果實細(xì)胞膨大期2個階段,細(xì)胞分裂期以果膠鈣形態(tài)積累為主,而細(xì)胞膨大期以水溶性鈣形態(tài)積累為主,尤其是與樹體內(nèi)水溶性鈣和果膠鈣含量變化密切相關(guān)。龔云池等研究比較了鴨梨Pyrusbertschneideri和雪花梨Pyrusbretschneideri,陳麗漩等研究了荔枝Litchichinensis果實儲藏過程中的不同形態(tài)鈣含量變化規(guī)律,歐李成熟果實中不同形態(tài)鈣的含量組成及其采后鈣素生理變化規(guī)律尚未見報道。為此,以實生和嫁接類型歐李為試材,通過研究歐李采收期和儲藏期果實中不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)組成及變化,探明歐李果實鈣素形成及轉(zhuǎn)化規(guī)律,以期揭示歐李鈣素營養(yǎng)吸收特性,為開發(fā)利用野生歐李資源,提高人類鈣素營養(yǎng)及健康水平提供基礎(chǔ)理論資料。1材料和方法1.1實生材料及嫁接類型歐李實驗材料分為2種類型。一是實生類型:包括小葉小果型,葉片淡綠,果實質(zhì)量5g左右;大葉大果型,葉片濃綠,果實質(zhì)量10g左右,樹齡為10年生。實生材料均來源于燕山山脈野生歐李群體,并定植于河北科技師范學(xué)院園藝科技學(xué)院試驗站野生歐李資源圃內(nèi)。圃地土壤肥力中等,樹體自然生長,叢生,株高為70~80cm。二是嫁接類型:包括高位嫁接型(接口距地面80cm)和低位嫁接型(接口距地面30cm)。采用實生類型中的大葉大果型接穗嫁接在毛桃Prunuspersica砧木上,樹齡為8年生。2種類型歐李均在3月上旬芽體萌動,4月中旬開花,8月上中旬果實成熟。1.2樣品的提取與測定在果實生理成熟期,分別選取2種類型中包括小葉小果型、大葉大果型、高位嫁接型和低位嫁接型的植株各3株,作為各時期鈣組分提取的樣本株,單株3次重復(fù);在每株不同方位的結(jié)果基生枝中上部位采集不同類型成熟度一致,大小均勻,無機械損傷和無病蟲害的果實樣品各45個;果實采后放置在室溫(25±1)℃條件下自然儲藏,采后當(dāng)日(8月13日)從每株采集的果實樣品中隨機選取15個果實清洗干凈,勻漿處理后提取不同形態(tài)鈣組分,并于1周(8月21日)和2周(8月29日)后分別提取測定1次,共提取測定鈣3次。不同形態(tài)鈣的提取參照小西茂毅等的方法,并加以改進(jìn)。精確稱取經(jīng)組織搗碎機勻漿后的歐李果實樣品10.00g,分別采用無離子水、1mol·L-1氯化鈉、20g·kg-1乙酸、50g·kg-1鹽酸浸提劑逐級提取的方法,分別提取水溶性鈣(活性鈣)、氯化鈉溶性鈣(果膠鈣)、醋酸溶性鈣(磷酸鈣)和鹽酸溶性鈣(草酸鈣)。將浸提液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,25℃恒溫水浴提取1h,后用高速冷凍離心機離心10min;吸取上清液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,加入相應(yīng)提取液洗滌沉淀物,如此反復(fù)提取3~4次;之后用相應(yīng)的浸提液定容,同時加入釋放劑氯化鍶溶液(質(zhì)量濃度為1g·L-1)排除干擾影響;剩余殘渣中主要成分是硅酸鈣(簡稱為剩余鈣),采用HNO3-HClO4(5∶1)混合酸消化樣品待測。樣品中不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)采用3200型原子吸收分光光度計(上海分析儀器廠)測定,測定波長為422.7nm,鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg·kg-1)=待測液測得質(zhì)量濃度(mg·L-1)×定容體積(V)/樣品質(zhì)量(W)。數(shù)據(jù)處理采用SPSS統(tǒng)計分析軟件。2結(jié)果與分析2.1不同果型果實中的鈣的提取由表1可見:歐李實生類型果實中不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)因果型大小存在差異,小果型果實中水溶鈣、磷酸鈣和草酸鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)極顯著高于大果型果實中相應(yīng)的鈣形態(tài)組成(P<0.01),而大果型果實中的果膠鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)極顯著高于小果型果實中果膠鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(P<0.01);大小果型果實中的活性鈣組分(水溶鈣和果膠鈣)分別占大小果型鈣組分總量的69.11%和63.79%;大小果型果實中不同形態(tài)鈣提取率分別占總鈣量的98.43%和98.76%。研究表明:歐李小果型果實中鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于大果型果實中的鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)(P<0.05),大小果型不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)大小為水溶鈣>果膠鈣>磷酸鈣>草酸鈣>剩余鈣。2.2嫁接類型果實中各指標(biāo)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化由表1可見:歐李嫁接類型果實中不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)因接穗嫁接高低存在差異。低位嫁接類型果實中水溶鈣、磷酸鈣和草酸鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著或極顯著高于高位嫁接類型果實中相應(yīng)鈣形態(tài)組成(P<0.01或P<0.05)。高位和低位嫁接類型果實中的活性鈣組分(水溶鈣和果膠鈣)分別占相應(yīng)嫁接類型鈣組分總量的74.86%和64.99%;高位和低位嫁接類型果實中不同形態(tài)鈣提取率分別占總鈣量的98.24%和99.32%。研究表明:歐李低位嫁接類型果實中鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于高位嫁接類型果實中的鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)(P<0.05)。由表1還可以看出:與大果型果實比較,低位嫁接果實中水溶鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于實生類型(P<0.05),而高位嫁接基本與實生類型持平,水溶鈣可提取率增加;嫁接類型果實中果膠鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)極顯著低于實生類型中果膠鈣組分(P<0.01),果膠鈣可提取率下降;嫁接類型果實中不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)占果實總鈣量的比率其大小變化與實生類型一致。由此可見,歐李嫁接并未改變果實中不同形態(tài)鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)組成大小,但歐李嫁接和嫁接接口高低在一定程度上影響了果實中鈣及不同形態(tài)鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化。2.3形態(tài)組成百分率變化研究結(jié)果顯示(圖1和圖2):歐李實生類型果實中不同形態(tài)鈣隨果實儲藏期的延長其鈣組成百分率變化呈現(xiàn)一定的變化規(guī)律,2種果型果實中水溶鈣呈增加趨勢,果膠鈣呈下降趨勢,磷酸鈣和剩余鈣變化不明顯,草酸鈣在大果型果實中呈先增后降趨勢,在小果型果實中呈逐漸下降趨勢;但不同形態(tài)鈣組成百分率變化幅度因果型大小而存在差異,大果型和小果型果實儲藏后期(8月29日)較采收期(8月13日),水溶鈣形態(tài)分別增加了20.52%(P<0.01)和5.07%(P>0.05)。果膠鈣形態(tài)分別下降了13.18%(P<0.05)和0.72%(P>0.05),草酸鈣形態(tài)分別下降了7.37%(P>0.05)和5.53%(P>0.05)。由此可見:野生歐李果實采后儲藏存在鈣形態(tài)轉(zhuǎn)化,且其轉(zhuǎn)化程度與果型大小有關(guān)。2.4嫁接類型不同的率變化研究結(jié)果顯示(圖3和圖4):歐李嫁接類型果實中不同形態(tài)鈣隨果實儲藏期的延長其鈣組成百分率變化與實生類型變化規(guī)律基本一致,但不同形態(tài)鈣組成百分率變化幅度因嫁接類型不同而存在差異,高位嫁接和低位嫁接果實儲藏后期(8月29日)較采收期(8月13日),水溶鈣形態(tài)分別增加了16.36%(P<0.01)和10.55%(P<0.05),果膠鈣形態(tài)分別下降了10.65%(P<0.05)和1.52%(P>0.05),草酸鈣形態(tài)分別下降了6.31%(P>0.05)和7.40%(P>0.05)。由此可見:野生歐李嫁接類型果實采后儲藏同樣存在鈣形態(tài)轉(zhuǎn)化,且與實生類型轉(zhuǎn)化規(guī)律一致。3討論3.1小果型果實中各形態(tài)鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)鈣一般以水溶鈣、果膠鈣、磷酸鈣、草酸鈣及殘余的硅酸鈣(剩余鈣)等形態(tài)存在于樹體和果實中,其中果膠鈣是細(xì)胞壁的主要鈣形態(tài),草酸鈣和大部分磷酸鈣則沉淀在液泡內(nèi),果膠鈣和水溶鈣為活性鈣,尤其是水溶鈣有利于鈣離子的轉(zhuǎn)移和吸收利用。野生歐李與鴨梨、雪花梨以及荔枝果實中不同形態(tài)鈣的含量組成相比較,均以水溶鈣形態(tài)含量組成比例最高,并且小果型果實中總鈣和水溶鈣含量明顯高于大果型果實(P<0.05或P<0.01),故小果型歐李更適合人體補充鈣質(zhì)。同時結(jié)果顯示:果實中不同形態(tài)鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化與果實果型大小有關(guān),其中大果型果實中果膠鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于小果型果實中相應(yīng)鈣形態(tài)質(zhì)量分?jǐn)?shù)(P<0.01),表明大果型果實中在細(xì)胞壁中膠層結(jié)合了更多的鈣,這對增強細(xì)胞壁的剛性是有益的;而小果型果實中磷酸鈣和草酸鈣形態(tài)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于大果型果實中相應(yīng)鈣形態(tài)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(P<0.01),一方面可以推斷,小果型果實生長發(fā)育過程中代謝過程比較旺盛,與代謝過程中產(chǎn)生的有機酸如草酸結(jié)合形成草酸鈣結(jié)晶,避免因有機酸過量積累而產(chǎn)生毒害,而磷酸鈣的形成具有一種解毒作用;另一方面說明,小果型果實發(fā)育過程中旺盛的代謝活動,果實發(fā)育庫源需求更多鈣的供應(yīng),可能是導(dǎo)致小果型果實水溶鈣形態(tài)組分顯著高于大果型果實相應(yīng)鈣形態(tài)的主要原因。當(dāng)然,果實因果型大小不同造成其不同形態(tài)鈣組成差異的原因尚有待進(jìn)一步研究。嫁接歐李果實中不同形態(tài)鈣的含量組成比例無明顯改變,表明嫁接歐李果實中保持了鈣素營養(yǎng)的生理遺傳特性,但嫁接歐李類型因嫁接和嫁接接口的高低對果實中總鈣及不同形態(tài)鈣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)產(chǎn)生一定的影響,這可能與嫁接砧木根系分布及形態(tài)特征差異以及高位或低位嫁接影響鈣運輸距離等因素有關(guān),其機制有待進(jìn)一步研究。3.2不同采后儲藏期間鈣形態(tài)變化雪花梨果肉中水溶鈣形態(tài)組成百分率明顯下降,草酸鈣形態(tài)組成百分率明顯增加;鴨梨果肉中水溶鈣形態(tài)組成百分率增加,果膠鈣形態(tài)組成百分率下降;荔枝果實中水溶鈣形態(tài)組成百分率逐漸下降,果膠鈣形態(tài)和草酸鈣形態(tài)有所增加,表明不同品種果實儲藏期間鈣形態(tài)的轉(zhuǎn)化差異與果實采后成熟生理變化差異有關(guān)。歐李果實采后儲藏水溶鈣形態(tài)組成百分率明顯增加,表明歐李果實采后儲藏一段時期補鈣效果更好,更有利于人體對鈣質(zhì)的吸收和利用;果膠鈣形