醫(yī)院制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明模版

#根據(jù)三批樣品pH值測定的結(jié)果，暫定樣品的pH值為3.62相對密度照《中華人民共和國典典》2010年版二部附錄叫A相對密度測定法，三批樣品測定結(jié)果見表露衣2和洌密度測定結(jié)果批號111212111214111215相對密度1.051.05LQ5根駟-：批樣品相對密度測定的結(jié)果，W定樣品的相對空度為不低于1.亮＜■353裝量差異照《中華人民共利國的典》2010年版—部附錄XF［最低裝量檢查法】檢查,紹果見表表1裝量差異檢杳鼬果批號隨機(jī)抽取3瓶(ml)平均裝量(ml)裝量限度《加)111212154 152 153153]112H153 153 154153符令1H2I5153 152 [52152技法量150rM現(xiàn)定.三批樣品檢直結(jié)果均符合規(guī)定口3.6.4微生物限度方法驗(yàn)證材料與依據(jù)1供試品：參榆灌腸液規(guī)格：XXX生產(chǎn)企業(yè)：江蘇省XXX醫(yī)院批號:111212111214111215培養(yǎng)基：.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 批號：110512廠家：XXX

2．玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基2．玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基3．營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基4．膽鹽乳糖培養(yǎng)基5.MUG培養(yǎng)基批號：1105172廠家：XXX批號：110126廠家：XXX批號：110408廠家：XXX批號：110203廠家：XXX稀釋劑:pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液500ml/瓶,批號：2011032801（如緩沖液為市場購買，需寫明生產(chǎn)企業(yè)）菌種：菌種名稱編號來源傳代次數(shù)大腸埃希菌(Escherichiacoli)CMCC(B)44102南京市藥檢所第3代金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)CMCC(B)26003南京市藥檢所第3代銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)CMCC(B)10104南京市藥檢所第3代枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)CMCC(B)63501南京市藥檢所第3代白色念珠菌(Candidaalbicans)CMCC(F)98001南京市藥檢所第3代黑曲霉(Aspergillusniger)CMCC(F)98003南京市藥檢所第3代驗(yàn)證依據(jù)：《中國藥典》2010年版二部附錄XIJ微生物限度檢查法方法驗(yàn)證。3.6.4.2驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)操作根據(jù)《中國藥典》2010年版二部附錄微生物限度檢查法方法，采用常規(guī)法（如常規(guī)法回收率未達(dá)70%，需采用培養(yǎng)基稀釋法重新進(jìn)行驗(yàn)證；如培養(yǎng)基稀釋法回收率仍未達(dá)70%，可采用薄膜過濾法再次進(jìn)行驗(yàn)證）對細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證?？刂凭鷻z查方法采用常規(guī)法（若陽性未生長采用培養(yǎng)基稀釋法或薄膜過濾法），從而建立該樣品的微生物限度檢查方法。菌液制備方法：.接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，置350C培養(yǎng)24小時(shí)，分別取上述培養(yǎng)物1ml加9ml0.9%的無菌氯化鈉溶液，10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數(shù)為50?100cfu的菌懸液。.接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，置250C培養(yǎng)48小時(shí)，取上述培養(yǎng)物1ml加9ml0.9%的無菌氯化鈉溶液，10倍遞增稀釋制成每1ml含菌數(shù)為50?100cfu的菌懸液。.接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，置250C培養(yǎng)7天，加入5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%的無菌氯化鈉溶液,將孢子洗脫，并吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%的無菌氯化鈉制成每1ml含孢子數(shù)為50?100cfu的孢子懸液。3.6.4.2.2供試液制備：取供試品10ml,力口pH7.0無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液至100ml，混均，作為1：10供試液。菌落計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證平皿法：(常規(guī)法)①試驗(yàn)組：取1：10供試液1ml,分別加入10個(gè)平皿中，再依次加入大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉5種菌的菌懸液1ml(含50?100cfu),每株菌平行制備2個(gè)平皿，立刻傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，分別置350C培養(yǎng)48小時(shí)和250C培養(yǎng)72小時(shí)。②菌液組：分別取上述稀釋的菌液1ml注入平皿內(nèi)，每個(gè)菌平行制備2個(gè)平皿,測定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。③供試品對照組：取1：10供試液1ml分別注入4個(gè)平皿中，立刻注入營養(yǎng)瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每種培養(yǎng)基制備2個(gè)平皿，分別置350C培養(yǎng)48小時(shí)和250C培養(yǎng)72小時(shí)。以測定供試品的本底菌數(shù)。上述方法平行實(shí)驗(yàn)3次④結(jié)果見表1表1.參榆灌腸液細(xì)菌.霉菌和酵母菌回收率的測定(平皿法)菌種類型試驗(yàn)試驗(yàn)組菌液組供試品回收率(％)次數(shù)對照組試驗(yàn)組

大腸埃希菌14749095.9265620100361560100金黃色葡萄球菌13633010024445097.8345410100枯草芽孢桿菌13842090.524750094.036267092.5白色念珠菌14548083.323539089.735055090.9黑曲霉13438089.522731087.132829096.6試驗(yàn)組菌回收率(%);試驗(yàn)組平均菌落數(shù)一供試品對照組的平均菌落數(shù)100y菌液組的平均菌落數(shù) *°由表1可見參榆灌腸液用平皿菌落計(jì)數(shù)法，三次平行試驗(yàn)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都達(dá)到了70%，說明常規(guī)平皿法用于參榆灌腸液計(jì)數(shù)結(jié)果是準(zhǔn)確的。備注：如采用常規(guī)平皿法菌落回收率都達(dá)到70%，則細(xì)菌、霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證即可完成但，如常規(guī)法一種或幾種菌回收率三次均低于70%，需采用培養(yǎng)基稀釋法重新進(jìn)行試驗(yàn)，具體操作如下：若細(xì)菌回收率低于70%則細(xì)菌數(shù)計(jì)數(shù)采用培養(yǎng)基稀釋法，霉菌回收率低于70%則霉菌酵母菌計(jì)數(shù)采用培養(yǎng)基稀釋法，二者均低于70%則同時(shí)采用培養(yǎng)基稀釋法驗(yàn)。證資料中需體現(xiàn)常規(guī)法及培養(yǎng)基稀釋法兩種驗(yàn)證方法及結(jié)果。平皿法：（培養(yǎng)基稀釋法）①試驗(yàn)組：取1：10供試液0.2ml及各試驗(yàn)用菌液1ml分別注入平皿中，每種試驗(yàn)菌平行制備10個(gè)平皿，立刻傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，細(xì)菌350C培養(yǎng)48小時(shí)，霉菌及酵母菌250C培養(yǎng)72小時(shí)。②菌液組：分別取上述稀釋的菌液1ml注入平皿內(nèi)，每個(gè)菌平行制備2個(gè)平皿，測定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。③供試品對照組：取1：10供試液0.2ml分別注入20個(gè)平皿中，立刻傾注營養(yǎng)瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每種培養(yǎng)基制備10個(gè)平皿，分別置350C培養(yǎng)48小時(shí)和250C培養(yǎng)72小時(shí)。以測定供試品的本底菌數(shù)。上述方法平行實(shí)驗(yàn)3次④結(jié)果見表2表2.參榆灌腸液細(xì)菌.霉菌和酵母菌回收率的測定（培養(yǎng)基稀釋法）菌種類型試驗(yàn)次數(shù)試驗(yàn)組菌液組供試品對照組回收率（%）試驗(yàn)組大腸埃希菌14749095.9265620100361560100金黃色葡萄球菌13633010024445097.8345410100枯草芽孢桿菌13842090.524750094.036267092.5白色念珠菌14548083.323539089.735055090.9黑曲霉13438089.522731087.13 28 29 0 96.6試驗(yàn)組菌回收率（%）;試驗(yàn)組平均菌落數(shù)一供試品對照組的平均菌落數(shù)100%菌液組的平均菌落數(shù) * 0由表2可見參榆灌腸液用培養(yǎng)基稀釋法，三次平行試驗(yàn)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都達(dá)到了70%，說明培養(yǎng)基稀釋法用于參榆灌腸液計(jì)數(shù)結(jié)果是準(zhǔn)確的。備注：如培養(yǎng)基稀釋法回收率仍低于70%，采用薄膜過濾法再次進(jìn)行試驗(yàn)。驗(yàn)證資料中需體現(xiàn)常規(guī)法、培養(yǎng)基稀釋法及薄膜過濾法三種驗(yàn)證方法及結(jié)果。具體操作如下：薄膜過濾法：供試液制備：取1：10供試液10ml放入離心管中，將離心管放入離心機(jī)，500轉(zhuǎn)/min離心3分鐘，取上清液。（注：僅細(xì)菌計(jì)數(shù)可用低速離心，霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)不可采用。）①試驗(yàn)組：取1：10上述供試液1ml加pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液100ml稀釋過濾，用400ml（備注：具體用量依樣品抑菌作用強(qiáng)弱而定，在試驗(yàn)中需設(shè)計(jì)不同的沖洗量進(jìn)行沖洗根，據(jù)回收率的情況選擇不同的沖洗量）pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液沖洗濾膜，每次100ml，在最后一次沖洗液中分別加入試驗(yàn)用菌液1ml，過濾后無菌方法取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂或玫瑰紅鈉瓊脂平板上，細(xì)菌350C培養(yǎng)48小時(shí)，霉菌及酵母菌250C培養(yǎng)72小時(shí)。②菌液組：分別取上述稀釋的菌液1ml注入平皿內(nèi)，每個(gè)菌平行制備2個(gè)平皿，測定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。③供試品對照組：取1：10供試液1ml采用上述薄膜過濾法沖洗過濾，分別置350C培養(yǎng)48小時(shí)和250C培養(yǎng)72小時(shí)。以測定供試品的本底菌數(shù)。上述方法平行實(shí)驗(yàn)3次④結(jié)果見表3表3.參榆灌腸液細(xì)菌.霉菌和酵母菌回收率的測定（薄膜過濾法）菌種類型試驗(yàn)試驗(yàn)組菌液組供試品回收率

次數(shù)對照組試驗(yàn)組大腸埃希國14749095.9265620100361560100金黃色葡萄球菌13633010024445097.8345410100枯草芽孢桿菌13842090.524750094.036267092.5白色念珠菌14548083.323539089.735055090.9黑曲霉13438089.522731087.132829096.6試驗(yàn)組菌回收率(%);試驗(yàn)組平均菌落數(shù)一供試品對照組的平均菌落數(shù)1%菌液組的平均菌落數(shù) * 0由表3可見參榆灌腸液用薄膜過濾法，三次平行試驗(yàn)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和黑曲霉的菌落回收都達(dá)到了70%，說明薄膜過濾法用于參榆灌腸液計(jì)數(shù)結(jié)果是準(zhǔn)確的。控制菌(大腸埃希菌)檢查方法的驗(yàn)證直接接種法(1)試驗(yàn)組：取1：10的供試液10ml,接種至100ml的膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基內(nèi)，加入49cfu大腸埃希菌,350C培養(yǎng)24小時(shí)，可見培養(yǎng)基混濁，有氣體產(chǎn)生。取上述培養(yǎng)物0.2ml接種至5mlMUG培養(yǎng)基的試管內(nèi)，培養(yǎng)5小時(shí)、24小時(shí)，在366nm紫外線下觀察，可見熒光反應(yīng)，滴加靛基質(zhì)試液，液面呈玫瑰紅色(2)陰性菌對照組：取1：10的供試液10ml,接種至100ml的膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基內(nèi)，加入33cfu金黃色葡萄球菌,350C培養(yǎng)24小時(shí)，培養(yǎng)基無混濁與氣體產(chǎn)生。取上述培養(yǎng)液0.2ml接種至5mlMUG培養(yǎng)基的試管內(nèi)，培養(yǎng)5小時(shí)、24小時(shí)，在366nm紫外線下觀察，無熒光反應(yīng)，滴加靛基質(zhì)試液，液面均呈試劑本色。上述方法試驗(yàn)組檢出了大腸埃希菌，陰性菌對照組未檢出金黃色葡萄球菌。說明用100ml膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基可以進(jìn)行參榆灌腸液大腸埃希菌檢查。備注：試驗(yàn)中若100ml陽性對照未生長，則加大膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基用量，分別作200ml、300ml，方法同以上方法。薄膜過濾法若直接接種法加大培養(yǎng)基用量陽性對照仍無法檢出，則采用薄膜過濾法：（1）試驗(yàn)組：取1：10的供試液10ml，用離心機(jī)低速離心500r/min離心3分鐘，取上清液定容至10ml，加入pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液稀釋至100ml薄膜過濾，用400ml（備注：具體用量依樣品抑菌作用強(qiáng)弱而定，在試驗(yàn)中需設(shè)計(jì)不同的沖洗量進(jìn)行沖洗根，據(jù)回收率的情況選擇不同的沖洗量）pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液沖洗濾膜，每次100ml，過濾后無菌方法取出濾膜，接種至100ml的膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基內(nèi)，加入49cfu大腸埃希菌,350C培養(yǎng)24小時(shí),可見培養(yǎng)基混濁,有氣體產(chǎn)生。取上述培養(yǎng)物0.2ml接種至5mlMUG培養(yǎng)基的試管內(nèi)，培養(yǎng)5小時(shí)、24小時(shí)，在366nm紫外線下觀察，可見熒光反應(yīng)，滴加靛基質(zhì)試液，液面呈玫瑰紅色.（2）陰性菌對照組：取1：10的供試液10ml，用離心機(jī)低速離心500r/min離心3分鐘，取上清液定容至10ml,加入pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液稀釋至100ml薄膜過濾，用400ml（注：具體用量依樣品抑菌作用強(qiáng)弱而定）pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨緩沖液沖洗濾膜，每次100ml，過濾后無菌方法取出濾膜，接種至100ml的膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基內(nèi)，加入33cfu金黃色葡萄球菌,350C培養(yǎng)24小時(shí)，培養(yǎng)基無混濁與氣體產(chǎn)生。取上述培養(yǎng)液0.2ml接種至5mlMUG培養(yǎng)基的試管內(nèi)，培養(yǎng)5小時(shí)、24小時(shí)，在366nm紫外線下觀察，無熒光反應(yīng)，滴加靛基質(zhì)試液，液面均呈試劑本色。上述方法試驗(yàn)組檢出了大腸埃希菌，陰性菌對照組未檢出金黃色葡萄球菌，說明用100ml膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基可以進(jìn)行參榆灌腸液大腸埃希菌檢查。備注：如制劑中含生藥，需增加大腸菌群檢查驗(yàn)證試驗(yàn);如制劑中含動(dòng)物藥，需增加沙門菌檢查驗(yàn)證方法如制劑為外用藥，需增加金黃色葡萄球菌、銅綠桿菌檢查驗(yàn)證方法,每個(gè)品種具體要求見《中國藥典》2010年版附錄。其他控制菌檢查常規(guī)法、培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法方法同上述大腸埃希菌檢查方候使用相應(yīng)增菌及分離培養(yǎng)基。如金黃色葡萄球菌使用營養(yǎng)肉湯增郵露醇氯化鈉瓊脂分離等。結(jié)論：參榆灌腸液按《中國藥典》2010年版二部附錄微生物限度檢查法方法驗(yàn)證試驗(yàn):取供試品10g,加pH7.0無菌氯化鈉蛋白凍緩沖液至100ml,混勻，作為1：10供試液。細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定：可用常規(guī)平皿法（或培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法）；大腸埃希菌檢查可用100ml膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基進(jìn)行增菌培養(yǎng)（或其他量的培養(yǎng)基、薄膜過濾法），依法檢查。金黃色葡萄球菌采用。。。。。。。。依法檢查，銅綠假單胞菌采用。。。。。。。。。依法檢查。（備注：上文中黑體斜體部分文字僅為驗(yàn)證過程中指導(dǎo)之用）工6.4.5參榆震腸海的微生物限度檢查方法供試液的制備；吸取供試品lOmh加pH無菌氯化鈾-蛋白陳緩沖液至100mL振相均勻，作為1:10供試液：取上述供試液1ml加入pH7內(nèi)無菌氯化鈉■蛋R膿線沖液9ml,制得1：加供試液，備用「工645」細(xì)菌、震菌及酷母菌骨數(shù)（I）細(xì)菌數(shù)法數(shù)①樣品細(xì)菌數(shù)測定：分別吸取樣品1：10的供試液1mL分別10個(gè)無菌平01中.跳每個(gè)平MO.lmh平行試臉一份.立即傾注［溫度不超過45c自養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)猾，混勻.凝固一列卜35七倒置培養(yǎng)4&小時(shí).比數(shù).1。個(gè)平皿中的細(xì)菌數(shù)之和即為每時(shí)供試液中細(xì)菌數(shù)口②陰性對照！取pH7。無菌就化鈉?張口陳線沖淞1mL置無痢平鵬中，邛打制備2個(gè)平板,立即傾注15?20ml溫度不超過45c營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固,3O-3TC倒置培養(yǎng)48小時(shí),不得有菌生長.⑵毒南及醉母菌計(jì)數(shù)：①樣品霉菌及醇母菌-計(jì)數(shù)測定：分別吸取樣品I：io的供試淞IH，分別⑷個(gè)無菌rm中，每個(gè)平JBL0」ml,平行試舊:價(jià)，立即慚注I舁20而溫度不超過45D玫瑰紅納琮脂培養(yǎng)生，混勻，凝固，25-28C倒置培養(yǎng)48小時(shí).計(jì)數(shù)，！0個(gè)平皿中的鯽菌數(shù)之和即為將ml供試液中霉菌數(shù).②陰性對照：取pH7.0無南氮化鈉?蛋白I陳緩沖液1ml+置無菌平皿中,平行制備2個(gè)平板，①即穎注】5心0巾1溫度不超過45C玫瑰紅便瓊喈培養(yǎng)基,混句.凝固.2421C倒置培養(yǎng)72小時(shí)，不得有菌生氏。3.6,4.52控制菌檢查（I）樣品大腸埃希施檢作取1：10供試液10mL加入100ml膽林乳城培養(yǎng)城中，經(jīng)35r37t培養(yǎng)M小時(shí)后，若有菌生長,再進(jìn)行MUG和靛基質(zhì)試驗(yàn)，以確定是否染菌.陰性對照：取pH7.Q無菌氧化鈉-蛋白陳生沖液10mL加入100nli膽鹽乳糖培養(yǎng)基中,經(jīng)35-37C培養(yǎng)24小時(shí)*不得有菌生長。（2）樣品金黃色匍陶建的投企設(shè)1:10供試液10mL加入】00向營養(yǎng)肉斷培養(yǎng)基中，經(jīng)35一第二培養(yǎng)加小時(shí)后，若有菌生長,再進(jìn)行分離培養(yǎng)和甘露解高鹽試驗(yàn),以確定是否染菌。陰性對隔取閉7.0無菌索化鈉■強(qiáng)白膿緩沖液10ml,加入100m1營養(yǎng)肉血培養(yǎng)基中,經(jīng)3637七培養(yǎng)24小時(shí)。不得有菌生長.0）樣品銅綠桎單胞菌檢查取1:10供試液10而，加入代山川膽酸乳削培養(yǎng)基中，經(jīng)3577七培養(yǎng)加小時(shí)后，若有前生長,再進(jìn)行分離培養(yǎng)和42C生長忒膠，以確定是否染菌.陰性對照：取pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胺援沖液10ml,加入100ml膽鹽乳糖培養(yǎng)基中，經(jīng)年77七培養(yǎng)24小時(shí).不得有菌生長.按照中國典典20J0年版一部附錄X1IJC微生物限度檢查法拴查，錘ml為物中細(xì)的數(shù)應(yīng)芻00個(gè)替霉菌,酵母菌數(shù)應(yīng)WOO/g,不得檢出大隔埃君菌、金黃色制菊球的?銅綠假單胞菌.3.6.5三批中試產(chǎn)品微生物限度檢餐結(jié)果按《中華人民共和國藥典》2oio年版一部附錄xinc微生物限度檢查法要求，結(jié)合驗(yàn)證試胎.結(jié)論，依法對參榆濯腸液進(jìn)行微生物眼度檢向，結(jié)果見表15。友15參榆港腸泄微生物限度檢在結(jié)果表檢查菌批號1112121H214111215細(xì)菌總數(shù)<10<10<10酵母氟<10<]0<10霉菌總數(shù)金如色匍窗球健農(nóng)檢出未檢出未檢出大腸埃希前未檢出未檢出未檢出銅綠假單胞菌未檢出未檢出未檢出活端未檢出未檢出未檢出檢查結(jié)果表明，一批樣品微生物蟲度均符合規(guī)定.3.7含量測定工工1冽定對象及成分的選擇參檢濯腸液由黃柏、石菖薄、苦蓼、地榆等七味中藥組成，具有祛濕瀉火、止血生肌、斂瘡救瘍之功效.用r久痢，腹痛，眼瀉，枯液膿血使，里急后垂。方中黃柏是君劍.黃柏中的生物堿類成分具有廣泛的藥理作用，包括抗菌、抗真菌、鎮(zhèn)咳、降用、抗滴蟲、抗肝炎、增強(qiáng)免疫功能、抗?jié)冏饔玫?，面就酸小第堿又是其主要二成分。因此，本試驗(yàn)選擇靛酸小聚堿作為指標(biāo)性成分，用高效液相色譜法測定其含域,原控制制劑盤量.保證臨床療效.試驗(yàn)結(jié)果表明，HPLC靈敏度高，重注性好，測定結(jié)果準(zhǔn)確,可用于參輸灌腸液中林酸小桀戚的含汝測定，3.7.2含葩測定儀器與試藥AgilentUM高效高相色相儀,四元蕤⑹乳】4—溫箱（G13I6A）,VWD撿剌器CGISMAJj匚作站（Chtmststicn）□鹽酸小麋堿對照品（批號i107i3-20020S,含吊測定用.斶自中國前品生物制品檢定所另1門0萬塔子分子天平（B冉21ID型,德國Sarto「皿”ASB22（M）型超聲波清洗器（犬津奧杼賽恩斯儀器公司上參榆讖胸糠【批號1112】露1】口U-t5k水為超純水，乙精、中醉為色幫姓.其余化學(xué)試劑為分析純.37,2,2方法與結(jié)果照《中華人民共和國藥典》的10年版二部高效液相測定法〔附錄VD）測定。對照品溶液的制備取鹽酸小聚頻對照品適時(shí)?精密稱定，加甲醉溶解制成彘所|含2石」的溶液.供試品溶液的制備精密吸取本品2m上置5。川量瓶中，加流動(dòng)和超聲處理（功率250W.頻率白網(wǎng)也）20分鐘，放冷，用流動(dòng)相稀釋年刻度，搖郁然過，取續(xù)濾液作為供試品溶液,同法制備陰性供試品溶液。3,7.2.23色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜柱;HederaOPS2C|SU（250^.6mtn，5^?）；以乙驪-0.1%礴酸溶液￡50:5。）【班10（hnl加十二烷基堿酸鈉0.1g）為流動(dòng)相：拉好波長為265nmi柱溫：30C；流速：LOmhnin%分別精密吸取微酸小維堿對照品溶液，供成品溶液及陽性供試品溶液各10川，注入哥效液相色譜儀中r測定，供試拙與對照品在相同的位理有較大吸收.陰性對照無干擾。色譜柱的理論板數(shù)按鹽酸小麋堿桂計(jì)算不低于4000,分離度大于L5。3.7.21.4線性關(guān)系考察取上述對照相溶液，用甲醉分別稀林至1229、51.仇30.5、15,25、7.625、3舟］251gm產(chǎn),分別精密吸取各不同濃度的對照品溶液】%1,注入高效液相色譜儀中測定。經(jīng)線■性問得插酸小栗堿回歸方程產(chǎn)45一6以+4.424%尸0.駟99.秋酸小堞堿在工8125—122.如g-mW范圍內(nèi)，與峰而枳的積分值早.良好的線性關(guān)系.結(jié)果如圖7.圖7鹽酸小聚軾標(biāo)準(zhǔn)曲線3.7.225精密度試驗(yàn)粕密吸取同一對照品溶液1。H，注入高效液相色譜儀，雙復(fù)進(jìn)樣6次.測定,以蜂面積枳分值計(jì)算，RS口為0.15%,松果見表】6?衣16精密度試驗(yàn)結(jié)果表No.12 3456ARSD(%)I110J1106.7 1110.70J51103.2110631107.43.7,226重夔性試驗(yàn)精密吸取同一批號(111214)的本品2mL共6份，按為722爐項(xiàng)下處理方法制品供試品溶液。分別粘密吸取供試品溶液1m也注入高效液相色譜儀中,測定.以觸底小槃破含最計(jì)兌,Rg口為L61%,給果見表表17重免性試驗(yàn)結(jié)果表Nu, 12 3 4 5 6含量(mg/ml)1.004 L026 1054 1.008 1.017L0I7RSD(%) 1.613.7,2.27穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一供試品溶液，按上述色譜條件，于0.2、4.6.8,12h分別進(jìn)樣，測定色譜峰面積，RED為809%,說明本拈在門甘內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果她表1口表18穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果走時(shí)間Ch)0246812AIS11.61807.618H.81812,71810.418098RSD(%)0.093722g加樣回收率試驗(yàn)精密吸取已知合量的參榆濯粉液樣品(11】214>1ml,共6份，分別加入鹽酸小聚堿對照品，按，區(qū)7.222"項(xiàng)卜一方法制備供試品溶液，進(jìn)樣，測定,計(jì)算，^果見表】表19鹽酸小桀堿加樣回收試驗(yàn)結(jié)果表取樣量(ml)樣品中含陸鹽酸小壁賺