免疫學檢查在傳染病中的應用課件

臨床免疫學檢驗免疫學檢驗的常用技術(shù)臨床免疫學檢驗1免疫學檢驗的常用技術(shù)免疫比濁技術(shù)生物素與鏈酶親和素的應用技術(shù)免疫電泳技術(shù)抗體提取純化技術(shù)放射免疫分析技術(shù)免疫熒光測定技術(shù)化學發(fā)光免疫分析技術(shù)免疫印跡技術(shù)流式細胞術(shù)免疫學檢驗的常用技術(shù)2金標記酶免分析技術(shù)金標記免疫分析技術(shù)也稱免疫膠體金技術(shù),利用硝酸纖維素(NC)膜等為固相載體,使金標記的抗原或抗體與特異配體的反應在膜上進行,建立了快速的金標記免疫滲濾技術(shù)和金標記免疫層析技術(shù),并在傳染病、心血管病、濕病、自身免疫病的免疫學檢測中廣泛應用金標記酶免分析技術(shù)3金標記酶免分析技術(shù)原理:將濾金酸(HAuC4)用還原法制成定直徑的金溶膠顆粒(膠體金),標記金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)或抗體,用于免疫印跡、免疫滲濾、免疫層析試驗。金標記免疫層析是利用NC膜條狀纖維的毛細管作用,是樣品在泳動中與金標記物及包被在NC膜上的抗原或抗體結(jié)合,出現(xiàn)呈色的性信金標記酶免分析技術(shù)4酶免疫技術(shù)酶和酶作用的底物:1.辣根過氧化物酶(HRP),常用底物為鄰苯二胺(OPD),四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和ABIS2堿性磷酸酶(AP),多采用對硝基苯磷酸指為底物。3其他的酶:有葡萄糖氧化酶、β-一半乳糖昔酶和脲酶等。酶免疫技術(shù)5酶聯(lián)免疫吸附試驗六原理:酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)是免疫酶技術(shù)中固相酶免疫測定的一種技術(shù)?；驹硎菍⒋郎y抗原或抗體先固定于固相載體表面,再用酶標記的抗原或抗體與已被固定的相應抗體或抗原發(fā)生特異性反應,加入酶底物及色原后呈色,呈色程度用吸光度(A)值表示,所測A值與傳測機體或抗原的水平呈相關(guān)關(guān)系酶聯(lián)免疫吸附試驗6酶聯(lián)免疫吸附試墜1.接法:用于檢測樣本中特異性抗體將已知特異性抗原包被于聚苯乙烯板微孔成固相抗原;洗棄未結(jié)合的抗原;加待檢樣本若其中含有特異性抗體則與固相抗原結(jié)合形成抗原-抗體復合物;洗棄未反應的部分,加標記抗抗體(一般為標記抗人IgG或葡萄球A蛋白),使在固相載體上形成抗原-待檢抗徠標記抗體復合物;洗棄未反應的部分,加酶底物及色原呈色,在一定波長下測吸光度A值判定待測抗體的有無和水平酶聯(lián)免疫吸附試墜7酶聯(lián)免疫吸附試驗2.爭法:用于檢測待檢樣本中未知抗原或抗體測定抗原(抗體)時用已知抗體(抗原)包被固相載體,然后同步加入含有待測抗原(抗體)的樣本和酶標記抗原(抗體),使待測抗原(抗體與酶標記抗原(抗體)競爭結(jié)合在固相載體上的體(抗原);洗板;加酶底物及色原呈色測溶液抗原(抗體)量越多,則被結(jié)合的酶標抗原飛抗體)量越少,呈色越淺星色深淺與測抗原抗體)的量成反比酶聯(lián)免疫吸附試驗8酶聯(lián)免疫吸附試驗或雙抗原夾心法雙抗體夾心法:用于檢測相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)抗原先將已知特異性抗體包被于固相載體上,加待測樣本,若其中有相應的抗原則與固相抗體特異性結(jié)合;洗板后加入酶標記特異性抗體,使在固相載體上形成包被抗體-待測抗原標記抗體復合物;洗板;加酶底物及色原呈色?？乖蚩贵w平與所測吸光度(A)值呈正相關(guān)。雙抗原夾心法:用包被抗原和酶標記抗原檢測樣本中的酶聯(lián)免疫吸附試驗9酶聯(lián)免疫吸附試驗4.捕獲法5.生物素與親和素ELISA(ABC-ELSA酶聯(lián)免疫吸附試驗10免疫學檢查在傳染病中的應用課件11免疫學檢查在傳染病中的應用課件12免疫學檢查在傳染病中的應用課件13免疫學檢查在傳染病中的應用課件14免疫學檢查在傳染病中的應用課件15免疫學檢查在傳染病中的應用課件16免疫學檢查在傳染病中的應用課件17免疫學檢查在傳染病中的應用課件18免疫學檢查在傳染病中的應用課件19免疫學檢查在傳染病中的應用課件20免疫學檢查在傳染病中的應用課件21免疫學檢查在傳染病中的應用課件22免疫學檢查在傳染病中的應用課件23免疫學檢查在傳染病中的應用課件24免疫學檢查在傳染病中的應用課件25免疫學檢查在傳染病中的應用課件26免疫學檢查在傳染病中的應用課件27免疫學檢查在傳染病中的應用課件28免疫學檢查在傳染病中的應用課件29免疫學檢查在傳染病中的應用課件30免疫學檢查在傳染病中的應用課件31免疫學檢查在傳染病中的應用課件32免疫學檢查在傳染病中的應用課件33免疫學檢查在傳染病中的應用課件34免疫學檢查在傳染病中的應用課件35免疫學檢查在傳染病中的應用課件36免疫學檢查在傳染病中的應用課件37免疫學檢查在傳染病中的應用