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文檔簡介
化學發(fā)光試劑及其應用化學發(fā)光試劑及其應用化學發(fā)光試劑概述化學發(fā)光分析的基本原理化學發(fā)光試劑的主要類型化學發(fā)光試劑的應用化學發(fā)光試劑概述
發(fā)光被定義為處在激發(fā)態(tài)的分子或原子回到基態(tài)時所發(fā)射的光。按照獲得激發(fā)態(tài)能源的不同有各種類型的發(fā)光。在化學發(fā)光(chemluminescence,CL)中,由化學反應產生能的原子或分子由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時所產生的這一光輻射現(xiàn)象叫化學發(fā)光。根據(jù)化學發(fā)光的強度測定物質含量的分析方法叫化學發(fā)光分析。
1887年Redziszewski首次報道了絡吩堿(lophine,2,4,5-三苯基咪痤)在堿性條件下與氧氣反應發(fā)出黃金設色的光———人為的化學發(fā)光……
化學發(fā)光的特點
1。靈敏度高,如用熒光素酶和磷酸三腺苷(ATP)的發(fā)光反應,可測定2*10-17mol/L的ATP,即可檢測一個細胞中的ATP含量。2.分析方法簡單快捷,不需要復雜的儀器,不需要光源和色散裝置,業(yè)沒有光學分析方法中常見的散射光和雜散光等引起的背景值?;瘜W發(fā)光分析法的測量儀器比較簡單,主要包括樣品室、光檢測器、放大器和信號輸出裝置?;瘜W發(fā)光反應在樣品室中進行,反應發(fā)出的光直接照射在檢測器上,目前常用LUM-F流動注射化學發(fā)光儀器
1.化學發(fā)光的基本條件
一個化學反應要產生化學發(fā)光現(xiàn)象,必須滿足以下條件:第一是:該反應必須提供足夠的激發(fā)能(對于藍光發(fā)射需300kj.mol-1,紅光需150kj.mol-1),導致電子從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)。第二是:化學反應的能量至少能被一種物質所說接受并使之生成激發(fā)態(tài)。第三是:處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須具有一定的化學發(fā)光量子效率時期能釋放出光子,或能轉移它的能量給另一個分子使之處于激發(fā)態(tài)并使發(fā)出光子1.自身化學發(fā)光反應化學發(fā)光反應,按反應機理可分成自身化學發(fā)光,敏化化學發(fā)光,偶合反應化學發(fā)光,電致化學發(fā)光反……
是指被測物質為反應物直接參與化學反應,利用自身化學反應釋放的能量激發(fā)產物分子的光輻射??捎梅磻奖硎緸椋?/p>
A+B→C*+D,C*→C+hv
這類化學發(fā)光反應最多和最普遍,多數(shù)有機物分子在液相中的化學反應屬于這一類型2.敏化化學發(fā)光反應
是指某些化學反應中的由于激發(fā)態(tài)產物本身不發(fā)光或反光十分微弱,但通過加入某種能諒接受體(熒光劑)可導致發(fā)光。反應式為:
A+B→C*+D,F+C*→F*+C,F*→F+hvC為能量給于體,F(xiàn)為能量接受體。
如一氧化氮與臭氧的氣相化學發(fā)光反應有較高的化學發(fā)光效率,其反應機理為3.化學發(fā)光強度與反應物濃度的關系
化學發(fā)光反應所以能用于分析測定,是因為化學發(fā)光強度(ICL)與化學反應速度(dp/dt)相關聯(lián),而一切影響反應速度的因素有多可以作為建立測定方法的依據(jù)。
化學發(fā)光反應一般可表示為:
A+B→C*,C*→C+hv
該發(fā)光反應的化學發(fā)光強度取決于翻譯的速度dp/dt和反應的化學發(fā)光量子效率(ΦCL)
ICL(T)=ΦCLdp/d
式中ΦCL可表示為:ΦCL=Φr+Φf,其中Φr為生成激發(fā)態(tài)產物的量子效率,Φf為激發(fā)態(tài)產物分子的發(fā)光量子效率,對于一定的化學發(fā)光反應,為一定值;其反應速度可按質量作用定律表示出與反應體系中物質濃度的關系。因此,通過測定化學發(fā)光強度就可以測定反應體系種某種物質的濃度,原則上講,對任何發(fā)光反應,只要反應是一級或假一及反應,都可以通過上式進行化學發(fā)光定量分析。化學發(fā)光分析測定的物質對象可分為三類:第一類物質是化學發(fā)光反應中的的反應物
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