生物化學(xué)教學(xué)課件：實(shí)驗(yàn)四 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）測定_第1頁
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文檔簡介

【目的要求】1、掌握丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定的基本原理。2、學(xué)習(xí)酶活性的測定方法。3、了解丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶在臨床診斷中的意義。實(shí)驗(yàn)四血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）測定【實(shí)驗(yàn)原理】

1、取四支試管，標(biāo)號(hào)，按下表操作（單位：mL)

標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)準(zhǔn)空白管測定管測定空白管丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)液0.1———新鮮血清--0.10.1底物液0.50.50.5-

0.1mol/L磷酸緩沖液，pH=7.4—0.1——

混勻后，前三管37℃水浴準(zhǔn)確保溫30min

—2,4-二硝基苯肼0.50.50.50.5底物液———0.5

混勻后，37℃水浴準(zhǔn)確保溫20min0.4mol/LNaOH5.05.05.05.0

2.靜置10min，在520nm下比色，以蒸餾水校正零點(diǎn)，讀取各管管的吸光度值（A）?！居?jì)算】ＶVmax[S]

Km+[S]

＝──0.1mL血清所產(chǎn)生的丙酮酸數(shù)（μg）=A測定-A測定空白A標(biāo)準(zhǔn)-A標(biāo)準(zhǔn)空白×10本法ALT活性單位定義是：每mL血清在pH=7.4，37℃條件下與底物作用30min，每生成2.5μg丙酮酸為1單位(U)。ALT活力單位（u)=0.1mL血清所產(chǎn)生的丙酮酸數(shù)（μg）2.5×10

正常人各組織GOT及GPT活性(單位/克濕組織)血清轉(zhuǎn)氨酶活性，臨床上可作為疾病診斷和預(yù)后的指標(biāo)之一。【臨床意義】【思考題】1.血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定有何臨床意義？

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