草魚的蛋白質(zhì)含量和飼料利用效果研究

草魚的蛋白質(zhì)含量和飼料利用效果研究

魚粉、豆類、菜渣、棉渣和花生渣是與水產(chǎn)動物配合的主要蛋白質(zhì)飼料。它們的劑量和比例決定了配合飼料的蛋白質(zhì)質(zhì)量。由于飼料原料價格的波動較大,以及受水產(chǎn)品市場價格對配合飼料價格的影響,在配合飼料中豆粕、菜粕、棉粕和花生粕的用量在逐步增大,如菜粕、棉粕的用量有時高達(dá)60%～70%。但是,這些原料比例增大后對養(yǎng)殖魚體的生理機(jī)能是否會產(chǎn)生不利的影響、影響會有多大、使用的最高限量是多少等問題目前還沒有系統(tǒng)的研究。草魚是我國主要的淡水養(yǎng)殖魚類,占淡水養(yǎng)殖水產(chǎn)品總量的比例多年維持在21%～24%,是單個種類產(chǎn)量最高的養(yǎng)殖魚類。本試驗以草魚為試驗對象,在相同蛋白質(zhì)水平下研究魚粉、豆粕、菜粕、棉粕和花生粕對生長和生理機(jī)能的影響,以便為水產(chǎn)動物營養(yǎng)研究和水產(chǎn)配合飼料的生產(chǎn)提供參考。1試驗材料和方法1.1分組及分組方法為池塘培育當(dāng)年草魚種,初始平均體重(10.80±1.44)g。魚種購回后常規(guī)消毒,在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中馴化適應(yīng)2周,采用隨機(jī)分組方法進(jìn)行分組。設(shè)魚粉組、豆粕組、菜粕組、棉粕組和花生粕組共5個試驗組,每個試驗組設(shè)3個平行小組,共15個試驗小組。每組放養(yǎng)草魚種15尾,共放草魚225尾。1.2營養(yǎng)成分測定選用魚粉、豆粕、菜粕、棉粕和花生粕5種常用的蛋白質(zhì)飼料原料,按照配合飼料粗蛋白質(zhì)30%進(jìn)行等蛋白質(zhì)含量配方設(shè)計,試驗飼料配方及配合飼料實際測定營養(yǎng)成分含量見表1。各組飼料蛋白質(zhì)、粗脂肪含量無顯著性差異,在魚粉組的鈣含量達(dá)到3.55%、總磷含量達(dá)到2.12%,顯著高于其它組。試驗飼料用小型顆粒機(jī)加工成直徑1.5mm的硬顆粒飼料,加工方式為不加水或蒸汽直接擠壓成型。在加工時,棉粕飼料和花生粕飼料容易堵塞模具、加工效率很低、溫度較高(100℃以上),有一定的焦味,可能影響到草魚的攝食和飼料利用效果。1.3開發(fā)“四水”模式,2個階段投資,4次幼蝦并飼養(yǎng)養(yǎng)殖試驗在室內(nèi)循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行,單缸養(yǎng)殖容積0.4m3,由16個養(yǎng)殖單體組成的一個養(yǎng)殖循環(huán)系統(tǒng),以自來水為水源,養(yǎng)殖水體經(jīng)過沉淀、過濾除去殘余飼料和糞便回流到蓄水池,經(jīng)過增氧后由水泵抽回到各養(yǎng)殖缸內(nèi),每天補(bǔ)充總水量5%～10%的自來水。草魚養(yǎng)殖試驗從8月初開始,到10月底結(jié)束,正式試驗分2個階段飼養(yǎng),第一階段為8月27日～9月17日共21d,第二階段為9月19日～10月29日共43d,全程共64d。試驗期間水溫22～26℃,溶解氧保持在6.0mg/l以上,pH值6.5～7.5。投飼率保持在2%～3%,每天投喂3次。根據(jù)水溫變化和生長情況,10～15d調(diào)整1次投飼量。1.4測量指標(biāo)和分析方法1.4.1養(yǎng)殖飼料系數(shù)生長速度以特定生長率表示,飼料利用效率以飼料系數(shù)表示,按養(yǎng)殖階段進(jìn)行統(tǒng)計和分析。停食24h后對魚體進(jìn)行帶水稱重,每個養(yǎng)殖缸的試驗魚進(jìn)行總體稱重,以用于生長速度和飼料系數(shù)計算。1.4.2含量測定指標(biāo)的測定試驗結(jié)束時對試驗魚進(jìn)行解剖和測量。為了反映試驗魚的基本形體和主要功能器官組織的重量變化,參照葉元土方法,本試驗主要測定和計算指標(biāo)包括:(1)單位體長的重量,為“體重(g)/體長(cm)”的比值;(2)內(nèi)臟和肝胰臟指數(shù)、腸指數(shù),分別為“內(nèi)臟重量(g)×100/體重(g)”,“肝胰臟重量(g)×100/體重(g)”,“腸道重量(g)×100/體重(g)”;(3)免疫和造血器官指數(shù),即“脾臟重量(g)×100/體重(g)”,“腎臟重量(g)×100/體重(g)”。上述指標(biāo)測定每個試驗小組(缸)解剖6尾試驗魚,以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示每個試驗組測定結(jié)果?！皟?nèi)臟重量”未包括腎臟、心臟重量,腸道重量為擠出腸道內(nèi)容物后的腸道重量。1.4.3樣品的制備和測定全魚為試驗魚解剖擠出腸道內(nèi)容物、剪碎后的樣品,每個試驗小組分別取3尾試驗魚進(jìn)行測定;肌肉和肝胰臟為1.4.2解剖、稱重、剪碎后樣品,每3尾魚合并為一個樣品進(jìn)行測定。水分測定采用105℃烘干恒重方法;粗蛋白質(zhì)測定采用凱氏定氮方法;肌肉(包括飼料樣品)、全魚粗脂肪測定采用索氏抽提方法,肝胰臟由于樣品量少,其粗脂肪測定采用“氯仿-甲醇”方法。1.4.4血樣的檢測方法本試驗測定了血清溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)活力以反映試驗魚非特異免疫力,測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活力以反映肝胰臟功能,測定全血血紅蛋白含量以反映試驗魚造血機(jī)能的變化。溶菌酶活力(LSZ)測定以冷凍干燥的溶壁微球菌測定方法;超氧化物歧化酶(SOD)活力測定采用聯(lián)苯三酚自氧化方法;谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活力測定采用King氏法測定;全血血紅蛋白含量的測定用試劑盒測定。以試驗小組為單元采集3～6尾試驗魚的血液樣品。采用活體尾靜(動)脈采血方法進(jìn)行血樣采集。全血血紅蛋白測定直接使用新鮮全血,其它指標(biāo)測定為血液自然凝固后取上層血清進(jìn)行測定。所有血液指標(biāo)測定均為新鮮樣品及時測定。由于單尾試驗魚采集的血樣量有限,本試驗除血紅蛋白為單尾試驗魚測定指標(biāo)(取測定結(jié)果的平均值)外,其余指標(biāo)均為3～6尾試驗魚血樣混合后測定的結(jié)果。每個測定指標(biāo)作3個平行測定取平均值,3個試驗小組的結(jié)果取平均值為所在試驗組的最后結(jié)果。1.4.5數(shù)據(jù)處理方法本試驗結(jié)果使用excel進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。2試驗結(jié)果2.1個階段及飼料系數(shù)分階段統(tǒng)計試驗魚的生長速度和飼料系數(shù)結(jié)果見表2。在2個階段均以魚粉組草魚生長速度最大,其次為豆粕組、菜粕組、花生粕組和棉粕組。如果以魚粉組生長速度為100%,其它各試驗組草魚的生長速度分別與魚粉組的比較結(jié)果為,在第一階段豆粕組為72%、菜粕組為57%、花生粕組為46%、棉粕組為26%;在第二階段豆粕組為82%、菜粕組為49%、花生組為46%、棉粕組為42%。魚粉和豆粕對草魚顯示出良好的生長效果。對于飼料系數(shù),在2個階段的結(jié)果相似,以魚粉組飼料系數(shù)最低,豆粕組次之,以棉粕組的飼料系數(shù)最高,明顯高于其它各試驗組。如果以魚粉組飼料系數(shù)為100%,其它各試驗組草魚的飼料系數(shù)分別與魚粉組的比較結(jié)果為,在第一階段豆粕組為145%、菜粕組為183%、花生組為251%、棉粕組為496%,在第二階段豆粕組為117%、菜粕組為199%、花生組為238%、棉粕組為255%。魚粉和豆粕對草魚顯示出明顯的生長效果和飼料利用率,依次為菜粕組、花生粕組和棉粕組。2.2各組金槍魚腸道重量和肝胰腺指數(shù)的比較測定得到草魚形體和主要內(nèi)臟器官的重量指數(shù)結(jié)果見表3。就單位體長的重量來看,以魚粉組草魚單位體長重量最大,其次為豆粕組、菜籽組、花生粕組,最低的為棉粕組。就內(nèi)臟重量指數(shù)看,以菜粕組最大,其次為魚粉組,豆粕組和棉粕組相對較低。這些結(jié)果表明魚粉組、豆粕組草魚的重量主要還是魚體酮體(可食部分)占的比例較大,而菜粕組、棉粕組和花生粕組草魚的內(nèi)臟重量較大。腸道是消化、吸收的重要器官,也是重要的免疫防御器官。魚粉組草魚的腸道重量占體重的比例是最小的,其次是花生粕組。棉粕組草魚腸道重量比例最大,其次為豆粕組和菜粕組。腸道重量大小差異既可能是腸道長度變化也可能是腸壁厚度變化的結(jié)果。肝胰臟是關(guān)鍵性的代謝器官,肝胰臟指數(shù)除了魚粉組最大外,其余各組大小差異不大。脾臟和腎臟是重要的免疫和造血器官。脾臟指數(shù)也是以魚粉組最大,其余各組差異不大。而腎臟指數(shù)則以菜粕組和棉粕組較大,而魚粉組最小,花生粕組次之。2.3白質(zhì)和儲糧各組草魚全魚、肌肉和肝胰臟的水分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪的結(jié)果見表4。全魚和肌肉的水分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪在各組之間的結(jié)果沒有顯著性的差異(P>0.05)。肝胰臟水分在各組間沒有顯著性的差異(P>0.05),但是,豆粕組、菜粕組、棉粕組肝胰臟粗蛋白質(zhì)含量顯著高于魚粉組、花生粕組(P<0.05),豆粕組肝胰臟粗脂肪含量顯著高于菜粕組、棉粕組、花生粕組。2.4不同處理的魚粉組和棉粕組各指標(biāo)地物酶活力比較各組草魚血液部分功能指標(biāo)結(jié)果見表5。豆粕組草魚血清的GPT和GOT顯著高于其它各組(P<0.05),而菜粕組草魚血清的GPT和GOT活力均是最低的。棉粕組和花生粕組的結(jié)果與魚粉組的結(jié)果沒有顯著性的差異(P>0.05)。棉粕組和魚粉組草魚具有較高的SOD酶活力,而菜粕組草魚的SOD酶活力最低,其余各組無顯著性的差異(P>0.05)。溶菌酶活力以豆粕組最高,魚粉組酶活力最低,其余各組差異不顯著(P>0.05)。血紅蛋白含量以魚粉組最高,其余各組差異不顯著(P>0.05),魚粉組草魚血紅蛋白含量顯著高于其它組的結(jié)果(P<0.05)。3飼料原料對金槍魚生理機(jī)能的影響在本試驗中,魚粉的用量為35%、豆粕為57%、菜粕68%、棉粕為60%、花生粕為52%,在配合飼料的粗蛋白質(zhì)水平達(dá)到29.26%～31.63%的情況下,魚粉和豆粕表現(xiàn)出了很好的生長效果和飼料利用率,菜粕和花生粕也表現(xiàn)出一定的生長效果(約為魚粉組的50%),棉粕的生長效果和飼料利用率是最差的。文華等全部使用魚粉、豆粕、菜粕、棉粕等養(yǎng)殖草魚,結(jié)果是棉粕顯示出很好的生長效果,葉元土等測定了草魚對27種常用飼料原料的氨基酸消化率,結(jié)果顯示出菜粕、棉粕、花生粕等沒有顯著性的差異。使用蛋白質(zhì)原料對試驗魚的養(yǎng)殖結(jié)果是蛋白質(zhì)原料營養(yǎng)價值的綜合性體現(xiàn),但是,由于棉粕和花生粕在顆粒飼料制粒溫度較高,會在一定程度上影響配合飼料對養(yǎng)殖草魚的養(yǎng)殖效果,對其營養(yǎng)價值也會有一定的影響。因此,從生長效果和飼料利用率方面看,草魚配合飼料優(yōu)選的蛋白質(zhì)原料應(yīng)該是魚粉、豆粕,其次是菜粕和花生粕、棉粕,如果考慮到飼料原料的價格,菜粕、棉粕的價格一般為魚粉價格的25%～35%(生長速度為魚粉組的50%左右)、為豆粕價格的50%～60%左右,花生粕與菜粕、棉粕的養(yǎng)殖效果無顯著性差異,單原料價格一般高于菜粕、棉粕價格的20%～30%。因此,在原料價格高和配合飼料價格低的情況下菜粕、棉粕也是可選擇的蛋白質(zhì)原料。就試驗草魚的形體指標(biāo)和內(nèi)臟指數(shù)、以及魚體主要營養(yǎng)成分含量看,魚粉組、豆粕組和菜粕組草魚單位體長重量較大,魚體肥一些,而棉粕組和花生粕組草魚相對瘦一點。如何評價養(yǎng)殖魚體的各項生理機(jī)能還是一個有待研究的課題,本文選擇了血清轉(zhuǎn)氨酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶和全血血紅蛋白含量幾個指標(biāo),希望能夠在一定程度上反映試驗草魚的肝功能、免疫與防御能力和魚體的造血功能,以便探討試驗的飼料原料對草魚生理機(jī)能的影響。轉(zhuǎn)氨酶是體內(nèi)催化轉(zhuǎn)氨基作用的酶,廣泛存在于機(jī)體組織。正常新陳代謝過程中,血清內(nèi)維持一定水平的轉(zhuǎn)氨酶活性。當(dāng)肝、心、腎等組織發(fā)生病變時,由于組織細(xì)胞腫脹、壞死會導(dǎo)致大量的轉(zhuǎn)氨酶釋放至血流中,從而引起血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性顯著升高,血清轉(zhuǎn)氨酶活力越高表明肝胰臟受損傷越嚴(yán)重。本試驗檢測了豆粕組草魚血清GPT和GOT活力顯著高于其它組,表明在飼料中豆粕含量達(dá)到57%時會對草魚的肝胰臟產(chǎn)生較大的不利影響,但對免疫和防御能力、造血功能不產(chǎn)生明顯的不利影響。如果以魚粉組草魚的GPT和GOT活力為參照,菜粕組(在配合飼料中用量達(dá)到68%)、棉粕組(在配合飼料中用量達(dá)到60%)和花生粕組(在配合飼料中用量達(dá)到52%)草魚與魚粉組(在配合飼料中用量達(dá)到35%)沒有顯著性的差異,草魚的肝胰臟功能沒有受到明顯的不利影響,表明在本試驗用量范圍內(nèi)對草魚是安全的。溶菌酶是破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的酶,其活力大小可以在一定程度上反映出魚體抵抗細(xì)菌侵襲的能力。超氧化物歧化酶(SOD)是機(jī)體超氧化自由基的清除劑,廣泛分布于細(xì)胞內(nèi)和各種體液間,能阻止并消除自由基的連鎖反應(yīng),以保護(hù)機(jī)體免受損害,SOD酶活力的增加有助于提高魚體的自我保護(hù)能力。本試驗中,5個試驗組草魚血清的LSZ和SOD酶活力沒有顯著性差異,同時,脾臟、腎臟指數(shù)在5個試驗組草魚之間也