復(fù)方酮康唑凝膠劑的制備

復(fù)方酮康唑凝膠劑的制備

氨基乙醇主要用于皮膚淺表菌感染，如手癬、腳虱、體虱、股癬等。常用的藥物有乳膏劑和洗劑。但乳膏劑易造成涂布不均,污染衣物,洗劑存在易揮發(fā)、流散的缺點,因而臨床應(yīng)用受到一定的限制。而凝膠劑為透明的半固體,質(zhì)地均勻細(xì)膩,展開后容易涂布,涂布在皮膚上能形成透明的薄膜,附著性強(qiáng),釋藥快,滯留時間長,無氣悶、油膩感,易洗除,不污染衣物,對皮膚和黏膜無刺激性,適合皮膚局部外用。為此,本試驗研究制備了復(fù)方酮康唑凝膠劑。1藥品、化學(xué)品對照品Agilent-1100型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);TP-5型智能透皮擴(kuò)散儀(天津市鑫洲科技有限公司)。酮康唑?qū)φ掌?中國藥品生物制品檢定所,批號100294-199801);丙酸氯倍他索對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號100302-200001);酮康唑(南京第二制藥廠,批號981005);丙酸氯倍他索(上海華聯(lián)制藥有限公司,批號030909);硫酸新霉素(上海先鋒藥業(yè)有限公司,批號020822);甲醇為色譜純,其他試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1丙酮醇和丙酸氯仿的含量和外劑量法2.1.1方法的線性范圍色譜柱:HypersilODS2C18(200mm×4.6mm,5μm,大連依利特科學(xué)儀器有限公司);流動相:0.2%三乙胺(醋酸調(diào)至pH6.9)-甲醇(25∶75);流速:1.0mL·min-1;檢測波長:239nm;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:20μL。在此色譜條件下,酮康唑和丙酸氯倍他索的峰能完全分開,且樣品中其他成分對測定沒有干擾。酮康唑在10.08～201.16mg·L-1質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,線性回歸方程為:A=65.405C-131.06,r=0.9999;其日內(nèi)、日間RSD分別為0.61%和1.22%,平均回收率為99.59%,RSD為0.77%。丙酸氯倍他索在0.251～5.02mg·L-1質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,線性回歸方程為:A=7.8096C-0.8831,r=0.9998;其日內(nèi)、日間RSD分別為1.03%和1.81%,平均回收率為100.76%,RSD為1.18%。2.1.2樣品溶液的制備取復(fù)方酮康唑凝膠約1.0g,精密稱定,置100mL量瓶中,加入適量無水乙醇,超聲提取15min,加無水乙醇至刻度,搖勻。先用濾紙過濾后,再經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾,續(xù)濾液即為樣品溶液。精密吸取對照品溶液和樣品溶液各20μL進(jìn)樣,記錄峰面積,按外標(biāo)法以峰面積計算樣品中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量。2.1.3酮康唑凝膠接受液溫度的確定采用智能透皮擴(kuò)散儀作為釋藥裝置,玻璃紙作為凝膠劑體外藥物釋放度測定用半透膜,以10%丙二醇-生理鹽水作為接受液,進(jìn)行體外釋放度試驗。取0.10g復(fù)方酮康唑凝膠,精密稱定,均勻薄涂于玻璃紙上成一小圓(r=0.5cm),用502膠將玻璃紙固定于擴(kuò)散池上。在接受池中充滿接受液,將擴(kuò)散池和接受池固定在一起,趕盡二者之間的氣泡,使玻璃紙膜與接受液充分接觸。將溫度調(diào)到(32.0±1.0)℃,在800r·min-1條件下進(jìn)行磁力攪拌。分別于0.25,0.5,1.0,2.5,6.0h將接受液全部取出,并換以新的同溫接受液。采用HPLC法測定接受液中酮康唑和丙酸氯倍他索的含量,計算累積釋放率。2.2酮康唑凝膠劑的制備2.2.1復(fù)方酮康唑凝膠劑主要發(fā)生在方以制劑的外觀形態(tài)及黏度為考察指標(biāo),對凝膠基質(zhì)、增溶劑、pH調(diào)節(jié)劑、抗氧劑、潛溶劑和保濕劑進(jìn)行了選擇,從而確定了復(fù)方酮康唑凝膠劑的基本處方如下:1.0%酮康唑,0.025%丙酸氯倍他索,1.0%硫酸新霉素(500萬單位·kg-1),2.0%卡波姆-940,1.0%硫代硫酸鈉,羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD),甘油,聚乙二醇400(PEG-400),三乙醇胺。2.2.2酮康唑的包合取處方量卡波姆-940,加入適量純化水,充分?jǐn)嚢?溶脹過夜。按處方量精密稱取酮康唑、丙酸氯倍他索、新霉素。取適量水溶解硫酸新霉素。取HP-β-CD,于1.33倍的純化水中,加熱攪拌使其溶解。取酮康唑,加入適量無水乙醇,在攪拌下逐滴滴入1mol·L-1鹽酸至恰好完全溶解。在35℃、800r·min-1的條件下,將酮康唑鹽酸溶液逐滴滴加到HP-β-CD溶液中,滴加時間約為15min。往溶液中加入處方量硫代硫酸鈉,并緩慢地調(diào)pH至4.0以上。取處方量甘油和PEG-400混勻,將丙酸氯倍他索攪拌溶解于該混合溶劑中。待包合完全后,往包合液中加入丙酸氯倍他索溶液,攪勻。將該混合液和硫酸新霉素水溶液加入到卡波姆溶液中,充分?jǐn)嚢?用三乙醇胺調(diào)pH(5.5±1.0),加水至處方量。2.2.3影響酮康唑釋放度的三因素預(yù)實驗發(fā)現(xiàn),對藥物釋放影響最主要的因素是溶解度,為此,選擇3個對藥物溶解度影響較大的輔料(HP-β-CD、甘油、PEG-400),以酮康唑和丙酸氯倍他索6h的累計釋放率為指標(biāo),以L9(34)表進(jìn)行正交試驗,因素水平表見表1,試驗設(shè)計與結(jié)果見表2,表3。結(jié)果表明,HP-β-CD是影響酮康唑釋放度的最主要因素,其水平3最佳,其次是PEG-400,而甘油的影響最小(A>C>B),由KˉˉˉΚˉ的大小選取各因素的最佳組合為A3B2C2;對于丙酸氯倍他索,各因素的影響依次為A>B>C,由KˉˉˉΚˉ的大小選取各因素的最佳組合為A3B3C2。三因素中HP-β-CD對酮康唑和丙酸氯倍他索釋放度的影響因素均為最大;甘油和PEG-400的影響則相反,但二者的差別不大。因處方中酮康唑的含量明顯高于丙酸氯倍他索,故選擇酮康唑的最佳因素組合A3B2C2,即:20%HP-β-CD、10%甘油、5%PEG-400。通過以上實驗得到其優(yōu)化處方為:酮康唑10g,丙酸氯倍他索0.25g,硫酸新霉素10g(500萬單位),卡波姆20g,HP-β-CD200g,甘油100g,PEG-40050g,Na2S2O310g,1mol·L-1鹽酸2mL,無水乙醇20mL,三乙醇胺適量,加純化水至1000g,調(diào)pH至(5.5±1.0)。2.3測定復(fù)方酮康唑凝膠含量分別稱取3個不同批次的凝膠劑各5g,以4000r·min-1的速度離心15min,結(jié)果凝膠均一、透明、不分層。將復(fù)方酮康唑凝膠分別在60℃、4℃、-20℃、4500Lx光照以及高濕(RH75%,RH92.5%)條件下放置10d,分別在0,5,10d取樣,室溫放置2h后,測定酮康唑的含量。結(jié)果見表4。在高溫、低溫、高濕和強(qiáng)光照射的條件下,放置10d后,凝膠的外觀仍然透明、均勻,含量無明顯變化,表明本制劑具有較高的穩(wěn)定性。3ph值對樣品粒徑及濃度的影響由于水性凝膠基質(zhì)卡波姆-940無毒、無刺激性且與皮膚具有良好耦合性,故選用卡波姆-940作為凝膠基質(zhì)。實驗發(fā)現(xiàn),當(dāng)其質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%時,凝膠呈半流體狀,黏度較小,隨著其濃度的增加,凝膠黏度逐漸增加,當(dāng)其濃度為2.0%時,凝膠呈膠凍狀,黏度適宜。因此,確定2.0%的卡波姆-940為最佳用量?？ú烦Ｓ玫娜苊浄绞绞侵苯佑盟苊?。酮康唑為強(qiáng)脂溶性藥物,難溶于水,需增大其在水中的溶解度,才能在水凝膠中分散均勻。在包合過程中應(yīng)逐漸調(diào)pH至4.0以上。pH值對凝膠劑的黏度有較大影響,皮膚可耐受的pH為4～9,綜合考慮皮膚和凝膠黏度的因素,將pH選定為5.5±1.0。以氫氧化鈉和氨水為pH調(diào)節(jié)劑制備成的凝膠透明度較差,而以三乙醇胺為pH調(diào)節(jié)劑制備成的凝膠透明均勻。在調(diào)節(jié)pH值時,必須注意應(yīng)先將包合物溶液與凝膠基質(zhì)混合均勻后再調(diào)pH,若先調(diào)pH再混合,易出現(xiàn)白色渾濁,充分?jǐn)嚢枰嗖荒苁怪吻?。酮康唑具有酰胺基和醚?都是易氧化變色的基團(tuán),加溫及酸性條件均易使其氧化,所以需加入適量的抗氧劑。通過在60℃條件下進(jìn)行加速實驗考察了亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉在各自常用濃度下對酮康唑的抗氧化作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn),亞硫酸鈉和亞硫酸氫鈉的抗氧化效果均不理想,硫代硫酸鈉具有較好的抗氧化作用,而且高(0.1%)、中(0.3%)、低(0.5%)3個質(zhì)量分?jǐn)?shù)無差別。因此,我們選用低質(zhì)量分?jǐn)?shù)的硫代硫酸鈉作為抗氧劑。若將酮康唑包合溶液直接加入到卡波姆溶液中易出現(xiàn)白色渾濁,因此需要加入適量的潛溶劑或增溶劑,以使包合物在水性凝膠基質(zhì)中分散均勻。常