6種植物誘導(dǎo)抗病劑組合對煙草花葉病的防控效果

6種植物誘導(dǎo)抗病劑組合對煙草花葉病的防控效果

浮育苗技術(shù)在煙草生產(chǎn)中的成功應(yīng)用，不僅提高了煙草植物的科技含量，而且為一體化和產(chǎn)業(yè)化育苗奠定了堅實的基礎(chǔ)。該項新技術(shù)自1999年被引進中國以來便在煙葉生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用,目前已占據(jù)了煙草育苗技術(shù)的主導(dǎo)地位。剪葉是煙草漂浮育苗的核心技術(shù),也是煙草花葉病毒病(簡稱TMV)傳播的主要途徑。目前煙草花葉病毒病已上升為威脅中國煙葉生產(chǎn)的一個主要病害。當(dāng)前,煙葉生產(chǎn)上防控?zé)煵莼ㄈ~病最有效的方法是選擇種植NC102、NC297、云煙201、云煙202和云煙203等抗病品種。然而,這些抗病品種僅適宜在小范圍內(nèi)種植,K326、紅花大金元、云煙87等適應(yīng)性廣的煙草品種均不抗煙草花葉病,因此,尋求有效的防控方法已成為當(dāng)務(wù)之急。目前,煙葉生產(chǎn)上防控?zé)煵莼ㄈ~病最常用的方法是培育無毒壯苗、施用毒消、病毒必克、菌克毒克(寧南霉素)等抗病毒制劑和采用農(nóng)業(yè)保健栽培措施,但以上措施的綜合應(yīng)用不僅未解決TMV對煙葉生產(chǎn)造成的嚴(yán)重威脅,而且給煙農(nóng)帶來了沉重的經(jīng)濟負擔(dān)。自20世紀(jì)初以來,人們發(fā)現(xiàn)不僅通過接種病原菌能誘導(dǎo)植物獲得抗性(SystemicCcquiredResistance,SAR),而且通過菌根生物、植物提取物等其他生物和非生物(人工合成化學(xué)試劑)手段也能誘導(dǎo)植物獲得抗性,從此誘導(dǎo)抗性便成為植物保護的一種新途徑而備受人們關(guān)注。20世紀(jì)70年代以來,細胞工程、基因工程、酶工程和發(fā)酵工程等現(xiàn)代生物技術(shù)的興起為開發(fā)生物農(nóng)藥創(chuàng)造了有利條件,青霉菌滅活菌絲體[17,18,19,20,21,22]和吲哚酮便是近年來研究人員發(fā)現(xiàn)的2種能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性的新型生物制劑,且在煙草上對誘導(dǎo)煙株產(chǎn)生抗病能力也得到了證實。目前,不同誘導(dǎo)抗病劑的組合應(yīng)用對植物誘導(dǎo)抗病的效果研究尚未見報道。為此,筆者研究了6種不同植物誘導(dǎo)抗病劑的組合對煙草花葉病的防控效果,以期為煙草花葉病的有效防治提供理論依據(jù)。1材料和方法1.1材料表面1.1.1測試香煙烤煙栽培品種紅花大金元,種子通過蒸餾水振蕩浸泡3h,晾干待用。1.1.2主要試劑和病毒抑制劑共6種:多肽保(有機誘導(dǎo)劑,主要成分為青霉菌滅活菌絲體),為云南昆明保騰生化技術(shù)有限公司產(chǎn)品;0.5%幾丁聚糖水劑[化學(xué)誘導(dǎo)劑,主要成分為(1,4)-2-氨基-2-脫氧-β-D-葡聚糖,分子量500～1500],為四川成都特普科技發(fā)展有限公司產(chǎn)品;1%吲哚酮水劑(化學(xué)誘導(dǎo)劑,主要成分為3-羥基-3丙酮基-羥吲哚酮,簡稱AHO),由中國科學(xué)院昆明植物研究所郝小江研究員提供;1.5%植病靈乳劑(病毒抑制劑),為山東泰星化學(xué)廠產(chǎn)品;黃腐酸(主要成分氮、磷、鉀總量≥40%,其中鉀≥20%,腐植酸、黃腐酸≥8%,微量元素6種≥1.5%),為云南容大生物化工有限公司產(chǎn)品;氨基酸(含作物生長所必需的多種氨基酸、鈣、鎂、硫、鉬、硼、鋅等微量營養(yǎng)元素,屬于無污染、無毒害、無殘留、不含激素的有機肥),為四川都江堰大發(fā)實業(yè)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。1.2方法1.2.1聚糖的表面活性劑試驗共設(shè)12個處理:WF1(多肽保+0.5%幾丁聚糖水劑)、WF2(多肽保+1%AHO)、WF3(0.5%幾丁聚糖+黃腐酸)、WF4(0.5%幾丁聚糖+氨基酸)、WF5(1%AHO+黃腐酸)、WF6(1%AHO水劑+氨基酸)、WF7(1.5%植病靈+氨基酸)、WF8(1%AHO)、WF9(0.5%幾丁聚糖水劑)、WF10(多肽保,噴施清水)、WF11(東旺毒消,對照1)、WF12(噴施等量清水,對照2)。苗期每個處理6盤,完全隨機排列,為避免處理間相互交叉感染,處理間嚴(yán)格進行隔離,剪葉等農(nóng)事操作也完全獨立。大田期每個處理設(shè)3次重復(fù),隨機區(qū)組設(shè)計,每小區(qū)40株。1.2.2繁殖在帶毒環(huán)境下自然發(fā)病。育苗環(huán)境和種植土壤帶毒,常年TMV發(fā)病株率90%以上。1.2.3噴藥與藥劑多肽保:苗期用量為滿足1hm2大田移栽面積的基質(zhì)中一次性加入3.75kg,拌勻;大田期用量為1hm2大田面積9.0kg,于栽前一次性塘施,均勻分配給每株煙株。噴霧類藥劑(含清水):0.5%幾丁聚糖水劑、氨基酸兌水均為300倍,1.5%植病靈兌水均為800倍,1%AHO兌水1000倍,黃腐酸兌水500倍,東旺毒消兌水600倍。均采用苗期每次剪葉前噴施1次,最后一次剪葉后約7d噴施1次,至移栽26d后停止噴藥,共計噴施7次。均為噴霧的組合類藥劑按組合順序分開噴施,間隔時間為2h。均勻噴灑整株葉片,噴施量應(yīng)以葉面不滴藥液為宜。1.2.4采集苗期和mtv疾病征象在移栽當(dāng)天每個處理抽取22～24個樣,共抽取330個樣,全部采用植物病毒TAS-ELISA檢測試劑盒進行檢測。1.2.5調(diào)查時間及方法苗期從第2次剪葉開始調(diào)查病情,共調(diào)查3次。大田期于10月6日(第2次施藥當(dāng)天)開始調(diào)查病情,以后每隔7d調(diào)查1次,連續(xù)調(diào)查5次,最后又于12月3日調(diào)查了1次病情和農(nóng)藝性狀。煙草花葉病按照《煙草病蟲害分級及調(diào)查方法GB23222-2008》進行病情分級、計算發(fā)病率和病情指數(shù);煙株農(nóng)藝性狀按照《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查方法YC/T142.1998》進行調(diào)查。1.2.6剪葉的移栽除草7月23日播種,8月19日間苗定苗,8月27日剪葉第1次,9月6日剪葉第2次,9月13日剪葉第3次。9月24日當(dāng)天移栽完畢(苗齡62d,移栽時剔除有TMV典型癥狀的顯癥煙苗),栽后25、33和40d各進行1次中耕除草。大田移栽規(guī)格為行株距1.2m×0.5m,純氮用量為45kg/hm2,氮、磷、鉀比例為1∶1∶3。1.2.7處理投訴方差分析采用DPS軟件中的Duncan’新復(fù)極差測驗。防控效果計算公式:防效(%)=(對照病指-處理病指)/對照病指×1002結(jié)果與分析2.1苗苗期毒率檢測由表1可知,播種后49d內(nèi)僅WF3處理煙苗發(fā)生TMV,WF4、WF6、WF7和WF8處理在移栽時才表現(xiàn)癥狀,其他7個處理未表現(xiàn)癥狀。苗期帶毒率檢測結(jié)果表明,所有處理均帶毒,且?guī)Ф韭矢哌_83.3%以上,其中WF2和WF10處理煙苗帶毒率相對較低。由此可見,在該育苗環(huán)境條件下,各處理的煙苗絕大多數(shù)已隱性帶毒,只是部分煙苗無癥狀表現(xiàn)而已。2.2tmv的防效由表2、3可知,各處理對大田期煙株TMV的防控效果均以WF2處理最好,移栽后70d對以清水和東旺毒消為對照的煙株TMV的平均防效分別達到69.64%和43.25%;其次是WF1和WF10,均較東旺毒消的防控效果有一定優(yōu)勢。2.3tmv的處理由圖1可知,所有處理均表現(xiàn)為移栽后19d以前TMV病株率呈迅速增加趨勢,該期間TMV在植株間的傳播速度最快;WF2煙株TMV病株率傳播速度最慢,其次是WF1、WF10和WF11,這可能與苗期多數(shù)煙苗屬于帶毒隱癥有關(guān),同時也說明這幾個處理的藥劑對TMV具有較好的控制效果。苗期WF2煙株的陽性率在83.3%以上(表1),但到栽后70d病株率才達到55.3%,說明煙苗從帶毒到表現(xiàn)癥狀需要一段時間,同時也說明在有效藥劑的作用下,發(fā)病時間可得到最大限度的推遲。2.4織物和株高、腰葉寬對和株高的影響由表4可知,WF2單株葉數(shù)顯著多于東旺毒消對照,未發(fā)病葉數(shù)和株高顯著大于清水對照,而最大腰葉長、最大腰葉寬均與2個對照間差異不顯著。由此可見,WF2不但對控制TMV有明顯效果,且在株高、葉數(shù)方面表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢,葉片生長發(fā)育狀況良好。3結(jié)論和討論3.1煙株tmv的平均防效單獨使用多肽?；駻HO對TMV均有一定的控制效果,且2種藥劑組合應(yīng)用還具有較好的正向疊加效應(yīng),能明顯推遲煙株TMV的發(fā)病時間,移栽后70d對以清水和東旺毒消為對照的大田期煙株TMV的平均防效分別達到69.64%和43.25%,且在株高、葉數(shù)方面表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢,葉片生長發(fā)育狀況良好。多肽保與幾丁聚糖搭配對控制TMV僅有一定的正向疊加效果,而與黃腐酸或氨基酸的搭配卻降低了防效,具體原因尚待進一步研究。3.2煙苗攜帶tmv病毒對癥狀的影響在該試驗條件下,成苗期所有處理的煙苗均檢測出TM