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實(shí)驗(yàn)三獻(xiàn)血員部分篩檢試驗(yàn)
輸血是臨床最常見(jiàn)的治療手段之一。輸血傳播性疾病有:病毒性肝炎(HBV和HCV)獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)巨細(xì)胞病毒感染(CMV)梅毒感染輸血安全性是當(dāng)前輸血領(lǐng)域面臨的重大的挑戰(zhàn)要求
掌握血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測(cè)定的原理和臨床應(yīng)用;掌握兩對(duì)半測(cè)定的實(shí)驗(yàn)原理和操作方法一、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測(cè)定一、ALT測(cè)定原理ALT催化ɑ-酮戊二酸與丙氨酸之間的氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng):L-丙氨酸+ɑ-酮戊二酸L-谷氨酸+丙酮酸經(jīng)一定時(shí)間反應(yīng)后,加入2,4二硝基苯肼終止反應(yīng),并與溶液中的兩種ɑ-酮酸生成相應(yīng)的2,4二硝基苯腙,在堿性條件下呈棕紅色。但兩種苯腙的吸收光譜有差別,在500-520nm差異最大,以等摩爾濃度計(jì)算,丙酮酸苯腙的吸光度約為ɑ-酮戊二酸苯腙的3倍。據(jù)此特點(diǎn),可計(jì)算出丙酮酸的生成量,藉以推算出ALT活力。ALT二、操作方法
空白管測(cè)定管(ml)血清0.100.10谷丙基質(zhì)液0.50混勻,37℃水浴30分鐘2,4二硝基苯肼液0.500.50混勻,37℃水浴20分鐘谷丙基質(zhì)液0.500.4N氫氧化鈉溶液5.005.00混勻,37℃水浴10分鐘500nm,空白管調(diào)0,由測(cè)定管吸光度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線查ALT活力單位注:共四份標(biāo)本,每大組(4人)各做一個(gè)標(biāo)本,整個(gè)實(shí)驗(yàn)室只作一份對(duì)照二、參考值A(chǔ)LT≤40U酶的活力受溫度和孵浴時(shí)
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