實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌的染色和細(xì)菌細(xì)胞構(gòu)造的觀察

實(shí)驗(yàn)二細(xì)菌的染色和細(xì)菌細(xì)胞構(gòu)造的觀察

細(xì)菌的染色和細(xì)菌細(xì)胞構(gòu)造的觀察目的要求染色劑和染色的原理實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)程序思考題目的要求學(xué)習(xí)微生物涂片掌握細(xì)菌的一般染色發(fā)和革蘭氏染色進(jìn)一步熟練掌握顯微鏡油鏡的使用技術(shù)觀察和識(shí)別細(xì)菌細(xì)胞的特殊構(gòu)造染色劑和染色原理Ⅰ微生物染色的基本原理，是借助物理和化學(xué)因素的作用而進(jìn)行的。物理因素如：細(xì)胞及細(xì)胞物質(zhì)對(duì)染料的毛細(xì)現(xiàn)象、滲透、吸附作用等。化學(xué)因素如：正負(fù)離子之間的相互吸引等染色劑染料按其電離后所帶電荷的性質(zhì)可分為以下類型：1.酸性染料：如酸性復(fù)紅、剛果紅、伊紅、藻紅、苯胺黑等。2.堿性染料：一般有堿性復(fù)紅、中性紅、孔雀綠、番紅、結(jié)晶紫、美蘭、甲基紫等，細(xì)菌易被堿性染料染色。3.中性（復(fù)合）染料：如伊紅、美蘭等，Wright染料和Gimsa染料等（常用于細(xì)胞核染色）。4.單純?nèi)旧哼@類染料的化學(xué)親和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶劑中，如蘇丹類（Sudanb)的染料。染色劑和染色原理Ⅱ微生物染色常用染料如下表：實(shí)驗(yàn)材料涂片染色用的細(xì)菌培養(yǎng)物１.大腸桿菌（Escherichiacoli)24h的斜面培養(yǎng)物。２.枯草桿菌（Bacillussubtilis)12—16h的斜面培養(yǎng)物。載玻片、接種環(huán)、鑷子、酒精燈、各種染色液、火柴、無菌牙簽、玻璃鉛筆、蒸餾水。顯微鏡、鏡頭油、擦鏡紙、吸水紙、二甲苯等。示范片１.蘇云金芽孢桿菌（Bacillusthuringiensis）的芽孢；２.膠質(zhì)芽孢桿菌（Bacillusmucillaginosus）的莢膜；３.枯草芽孢桿菌的鞭毛。實(shí)驗(yàn)程序Ⅰ

（細(xì)菌染色的方法和步驟）細(xì)菌染色的方法:

１.單染色法：用一種染色液染菌體后，就可以觀察微生物的大小、形狀、和細(xì)胞排列狀況，但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。２.復(fù)染色法：用兩種或兩種以上染色液進(jìn)行染色，有協(xié)助鑒別微生物的作用，故也稱鑒別染色法。常用的有：革蘭氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法、細(xì)胞染色法等。染色技術(shù)的一般過程

涂片干燥固定染色媒染脫色復(fù)染水洗干燥鏡檢實(shí)驗(yàn)程序Ⅱ

（簡單染色的方法和步驟）簡單染色法（一般染色法）１.菌種：牙垢細(xì)菌２.涂片３.干燥：自然氣干或酒精燈高處微微加熱。４固定５.染色：在整個(gè)涂面上滴加齊氏石炭酸復(fù)紅，染色１分鐘。