一種利用乳酸菌堿性磷酸酯酶降解草甘膦農(nóng)藥的方法與流程

一種利用菌堿磷酸酯酶草甘農(nóng)藥方法與流程本發(fā)明涉及農(nóng)藥解技術(shù)領(lǐng)域，提了一種利用乳酸堿性磷酸酯酶降解甘膦農(nóng)藥的方法。背技：農(nóng)藥作為防治農(nóng)物病蟲(chóng)害的重要段在世界范圍內(nèi)農(nóng)業(yè)發(fā)展中扮演重的角色，近年來(lái)農(nóng)的需求量也在不增加，根據(jù)中國(guó)藥工業(yè)協(xié)會(huì)統(tǒng)計(jì)表，2010年至2014間我國(guó)僅種植業(yè)農(nóng)使用量高達(dá)平均年32萬(wàn)噸作用，有機(jī)磷農(nóng)藥因品類繁、用途廣泛、藥團(tuán)強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)在全界范圍內(nèi)被廣泛使。草甘膦農(nóng)藥因可植物快速吸收及低成分等優(yōu)勢(shì)，成為近三十年施用最多的一種農(nóng)藥，廣泛應(yīng)用于雜草制等多個(gè)領(lǐng)域，其是轉(zhuǎn)基因作物中大量使用。近年來(lái)甘膦農(nóng)藥殘留所成的污染已經(jīng)受人們的密切關(guān)注，有多篇報(bào)道證實(shí)草膦農(nóng)藥對(duì)土壤、質(zhì)等生態(tài)環(huán)境及品造成嚴(yán)重污染，通過(guò)富集作用危害類健康，草甘膦對(duì)人多個(gè)系統(tǒng)造不同程度的損害，至可增加患癌癥、血管病和不孕不的風(fēng)險(xiǎn)。微生物酶法降解具有成本低、無(wú)次污染、處理效好且能大面積推廣用等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)認(rèn)為是降解包括甘膦在內(nèi)的有機(jī)農(nóng)藥的有效方法和點(diǎn)研究方向。已有究證明堿性磷酸酶(alp)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥具有降解用，明確堿性磷酸酯酶對(duì)甘膦農(nóng)藥的降解力以及二者相互用機(jī)理同時(shí)實(shí)現(xiàn)堿磷酸酯酶在體外消中繼續(xù)發(fā)揮降解用的可能性。為保障生態(tài)安全農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量及人安全健康，需要用高效的草甘膦去技術(shù)來(lái)解決此生產(chǎn)污染。人們通常用從微生物降解礎(chǔ)上發(fā)展的微生物復(fù)技術(shù)對(duì)農(nóng)田、土以及水體的污染行修復(fù)。該技術(shù)為常見(jiàn)且安全有效選擇既具有降解草膦農(nóng)藥能力又來(lái)于食品級(jí)菌體的效降解酶尤為可取并在分子水平上探生物降解的去除制。本術(shù)采用從食品級(jí)菌乳酸菌中提取堿磷酸酯酶(alp)，將其應(yīng)用到對(duì)藥草甘膦的降解中，利用算機(jī)輔助分子模技術(shù)探究堿性磷酯酶促進(jìn)草甘膦農(nóng)降解的機(jī)理和二者互作用模式，開(kāi)一種利用乳酸菌性磷酸酯酶降解草膦農(nóng)藥的方法。技實(shí)要素：本發(fā)明的目的是食品級(jí)菌株乳酸中提取堿性磷酸酶(alp)，將其應(yīng)用到對(duì)農(nóng)藥草甘膦的降中，利用計(jì)算機(jī)助分子模擬技術(shù)究堿性磷酸酯酶促草甘膦農(nóng)藥降解的理和二者相互作模式，開(kāi)發(fā)一種用乳酸菌堿性磷酸酶降解草甘膦農(nóng)藥方法。本發(fā)明的方法如：一種利用乳酸菌性磷酸酯酶降解甘膦農(nóng)藥的方法其特征在于，該方包括以下步驟：(1)養(yǎng)乳酸菌，采用聲粉碎方法得到堿磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相色譜檢草甘膦農(nóng)藥的殘；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)現(xiàn)草甘膦和alp的作用模，并可視化其作位點(diǎn)和結(jié)合力等信；(4)以alp分別降解濃度為0.5mg/l1mg/l、2mg/l、3mg/l和5mg/l的甘膦農(nóng)藥，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積分降解速率。所述的食品級(jí)菌為乳酸菌。所述的計(jì)算機(jī)輔分子模擬技術(shù)為子對(duì)接autodock技術(shù)。附圖說(shuō)明圖1是本發(fā)明的技流程圖；圖2是alp與草甘農(nóng)藥相互結(jié)合的維作用圖；圖3是alp對(duì)草甘的降解圖。具體實(shí)施方式本發(fā)明的方法如：一種利用乳酸菌性磷酸酯酶降解甘膦農(nóng)藥的方法其特征在于，該方包括以下步驟：(1)養(yǎng)乳酸菌并采用聲粉碎方法得到堿磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相色譜檢草甘膦農(nóng)藥的殘；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)現(xiàn)草甘膦和alp的作用模，并可視化其作位點(diǎn)和結(jié)合力等信；(4)以alp分別降解濃度為0.5mg/l1mg/l、2mg/l、3mg/l和5mg/l的甘膦農(nóng)藥，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積分降解速率。所述的食品級(jí)菌為乳酸菌。所述的計(jì)算機(jī)輔分子模擬技術(shù)為子對(duì)接autodock技術(shù)。實(shí)施例1(1)培養(yǎng)乳酸菌并用超聲粉碎方法到堿性磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相譜檢測(cè)草甘膦農(nóng)的殘留；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)發(fā)現(xiàn)甘膦和alp的作用模式并可視化其作用位點(diǎn)和結(jié)合力等息；(4)以alp分別降濃度為0.5mg/l草甘膦農(nóng)，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積析降解速率。實(shí)施例2(1)培養(yǎng)乳酸菌并用超聲粉碎方法到堿性磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相譜檢測(cè)草甘膦農(nóng)的殘留；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)發(fā)現(xiàn)甘膦和alp的作用模式并可視化其作用位點(diǎn)和結(jié)合力等息；(4)以alp分別降濃度為1mg/l的草甘膦農(nóng)，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積析降解速率。實(shí)施例3(1)培養(yǎng)乳酸菌并用超聲粉碎方法到堿性磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相譜檢測(cè)草甘膦農(nóng)的殘留；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)發(fā)現(xiàn)甘膦和alp的作用模式并可視化其作用位點(diǎn)和結(jié)合力等息；(4)以alp分別降濃度為2mg/l的草甘膦農(nóng)，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積析降解速率。實(shí)施例4(1)培養(yǎng)乳酸菌并用超聲粉碎方法到堿性磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相譜檢測(cè)草甘膦農(nóng)的殘留；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)發(fā)現(xiàn)甘膦和alp的作用模式并可視化其作用位點(diǎn)和結(jié)合力等息；(4)以alp分別降濃度為3mg/l的草甘膦農(nóng)，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積析降解速率。實(shí)施例5(1)培養(yǎng)乳酸菌并用超聲粉碎方法到堿性磷酸酯酶；(2)通過(guò)高效液相譜檢測(cè)草甘膦農(nóng)的殘留；(3)用分子對(duì)接autodock技術(shù)發(fā)現(xiàn)甘膦和alp的作用模式并可視化其作用位點(diǎn)和結(jié)合力等息；(4)以alp分別降濃度為5mg/l的草甘膦農(nóng)，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積析降解速率。技特：1.一種利用乳菌堿性磷酸酯酶解草甘膦農(nóng)藥的方，其特征在于，方法包括以下步驟(1)培養(yǎng)乳酸菌并采用超聲碎方法得到堿性磷酯酶；(2)通過(guò)高效液相色譜測(cè)草甘膦農(nóng)藥的留；(3)用分子對(duì)接autodock技發(fā)現(xiàn)草甘膦和alp的作用式，并可視化其用位點(diǎn)和結(jié)合力等息；(4)以alp分別降解濃度為0.5mg/l、、2mg/l、3mg/l和5mg/l的草膦農(nóng)藥，4小時(shí)后結(jié)合液相峰面積析降解速率。2.根據(jù)權(quán)利要1所述的一種利乳酸菌堿性磷酸酯降解草甘膦農(nóng)藥方法，其特征在于所述的食品級(jí)菌為乳酸菌。3.根據(jù)權(quán)利要1所述的一種利乳酸菌堿性磷酸酯降解草甘膦農(nóng)藥方法，其特征在于所述的計(jì)算機(jī)輔分子模擬技術(shù)為子對(duì)接autodock技術(shù)。技總本發(fā)明的目的是食品級(jí)菌株乳酸中提取堿性磷酸酶(ALP)，將其應(yīng)用到