脂質(zhì)沉積性肌病 白細(xì)胞脂滴

脂質(zhì)沉積性肌病外周血白細(xì)胞脂滴沉積的超微結(jié)構(gòu)研究福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科慕容慎行王檸

福建省泉州市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科蔡江萍脂質(zhì)沉積性肌病(lipidstoragemyopathy,LSM)是由于肉毒堿（carnitine）或作用于脂質(zhì)代謝的一些酶等缺乏，直接或間接地干擾了肌肉細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)代謝，導(dǎo)致脂滴在肌纖維中的異常積聚而引起的肌病LSM有許多不典型的臨床表現(xiàn)，其診斷必須依靠肌肉病理檢查。但肌肉活組織檢查，具有損傷性，不易重復(fù)，病人較難接受，不適于隨訪病人。因此探討LSM的其他輔助性診斷手段，配合肌肉活組織病理檢查具有重要的臨床意義。研究現(xiàn)況國外陸續(xù)有學(xué)者報道LSM患者的周圍血液白細(xì)胞脂肪染色可觀察到脂滴存在。但文獻中未見進一步系統(tǒng)研究的報道。國內(nèi)在這一研究領(lǐng)域尚為空白。研究目的利用電鏡檢查較為深入地研究周圍血液白細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)特征探討白細(xì)胞胞漿脂滴檢測在LSM中的臨床應(yīng)用價值研究對象

LSM患者8例，男3例，女5例；年齡：10-41歲，平均年齡20.9±9.7歲；病程2-12年。全部病例均經(jīng)臨床表現(xiàn)、實驗室檢查、電鏡和病理組化等檢查綜合確診。健康對照者5名，男性2名，女性3名，年齡：23-44歲，平均年齡30.6±8.3歲。5位自愿者血清CPK、LDH、ALT、AST、Mb均正常，無遺傳性疾病家族史。臨床資料全部LSM病例均呈亞急性或慢性病程，復(fù)發(fā)者4例。均以肌無力為首發(fā)癥狀，雙側(cè)對稱性，近端肌肉受累嚴(yán)重，遠(yuǎn)端肌肉受累較輕。各部位肌肉受累情況：下肢8例，上肢7例，肩胛帶及骨盆帶肌各7例，頸肌7例，咀嚼肌5例，吞咽肌2例，呼吸肌2例。肌萎縮6例，肌痛及肌壓痛5例，有家族史5例。實驗室檢查：CPK：241-3297IU/L，LDH：303-3080IU/L，ALT：52-418IU/L，AST：31-717IU/L，3例Mb＞110μg/L。肌電圖均為肌源性損害。研究方法

標(biāo)本取材及制作：采血→離心→吸去上清液→加入3%戊二醛-1.5%多聚甲醛-0.1M磷酸鹽緩沖液→4℃固定半小時→細(xì)切成長條狀標(biāo)本→4℃固定2小時以上→0.1MPBS漂洗三次→1%鋨酸-1.5%亞鐵氰化鉀溶液4℃固定2小時→系列梯度酒精、丙酮脫水→定向包埋→超薄切片→電子染色。電鏡觀察及細(xì)胞計數(shù)：Hu-12A型透射電鏡觀察并攝片。每份標(biāo)本均按固定方向統(tǒng)一順序計數(shù)50個中性粒細(xì)胞，統(tǒng)計沉積的脂滴總數(shù)和含有脂滴的陽性細(xì)胞數(shù)。統(tǒng)計學(xué)分析兩組中性粒細(xì)胞含脂滴總數(shù)及含脂滴的中性粒細(xì)胞陽性率比較，若方差齊性采用t檢驗，若方差不齊采用t′檢驗，并用SPSS10.0軟件包統(tǒng)計。結(jié)果

LSM患者：周圍血液白細(xì)胞胞漿中可見到脂滴存在，多圓形或橢圓形，內(nèi)容物接近透明，有的電子密度較高，體積大小不等，直徑約0.1-1.1μm，同一個細(xì)胞中脂滴常為2-3個，有的細(xì)胞脂滴多達5個，脂滴沉積以中性粒細(xì)胞明顯，