高二生物植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

植物組織培養(yǎng)技術(shù)組織培養(yǎng)概述1.組織培養(yǎng)定義

組織培養(yǎng)是指用無菌方法使植物體的離體器官、組織和細(xì)胞在人為提供的條件下生長和發(fā)育的所有培養(yǎng)技術(shù)的總稱，也稱之為離體培養(yǎng)。2.組織培養(yǎng)的發(fā)展植物組織培養(yǎng)是二十世紀(jì)發(fā)展起來的新技術(shù)。它的發(fā)展經(jīng)歷了四個(gè)發(fā)展階段：（一）萌芽階段（從20世紀(jì)初到30年代中）：

1902年德國植物生理學(xué)家Haberlandt提出細(xì)胞全能性概念，并首次進(jìn)行離體細(xì)胞培養(yǎng)，但沒有成功。1904年，Hanning最先成功地培養(yǎng)了蘿卜和辣根菜的胚。1922年，Knudson采用胚培養(yǎng)法獲得大量蘭花幼苗。（二）奠基階段（從20世紀(jì)30年代末到50年代中）：1934年，White用番茄根尖建立起第一個(gè)活躍生長的無性繁殖系，從而使非胚器官的培養(yǎng)首先獲得成功。1939年，Gautherete培養(yǎng)胡蘿卜根小外植體成功。1943年，White提出了植物細(xì)胞“全能性”學(xué)說，標(biāo)志組織培養(yǎng)成為一門新興學(xué)科。1952-1953年：美國科學(xué)家StewardF.C.用胡蘿卜根的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)單個(gè)細(xì)胞能象受精卵發(fā)育成胚一樣的途徑，發(fā)育成完整植抹。證實(shí)了植物細(xì)胞“全能性”學(xué)說。（三）快速發(fā)展和應(yīng)用階段（從20世紀(jì)50年代末到現(xiàn)在）1960年以來組織培養(yǎng)理論、實(shí)踐、技術(shù)和方法不斷完善和發(fā)展，并廣泛應(yīng)用于生物學(xué)的許多分支學(xué)科。1960年，Cocking酶解法分離原生質(zhì)體獲得成功，使植物細(xì)胞可以象動(dòng)物細(xì)胞一樣進(jìn)行細(xì)胞融合。1960年，Morel等人通過對蘭花莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，獲得了快速繁殖的脫毒蘭花，隨后在國內(nèi)外進(jìn)行了“蘭花試管苗產(chǎn)業(yè)化”。1964年，印度學(xué)者Guha和Maheshwari成功地培養(yǎng)曼陀羅花藥獲得單倍體再生植株，從而促進(jìn)了植物花藥培養(yǎng)單倍體育種技術(shù)的發(fā)展。3.植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)理論――植物細(xì)胞的全能性定義：植物細(xì)胞具有該植物體全部遺傳的可能性，在一定條件下具有發(fā)育成完整植物體的潛在能力。原理：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因，從理論上講，生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都應(yīng)該具有全能性。差異：（1）受精卵的全能性最高；（2）受精卵分化后的細(xì)胞中，體細(xì)胞的全能性比生殖細(xì)胞的低。植物全能性的表達(dá)離體的植物器官、組織、細(xì)胞游離單細(xì)胞或原生質(zhì)體胚狀體根、芽愈傷組織人工種子再生植株脫分化

培養(yǎng)條件：基本培養(yǎng)基和適宜的植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，適宜的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。

脫分化：將分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。

再分化：經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下可有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類型的能力。4.植物組織培養(yǎng)分類愈傷組織培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)器官培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng)最為常見的組織培養(yǎng)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)單細(xì)胞培養(yǎng)胚、胚乳、珠心、子房、根、莖、葉、花和幼果的部分組織的培養(yǎng)按材料的類別分⑴愈傷組織培養(yǎng)

將外植體接種在人工培養(yǎng)基上，由于植物生長調(diào)節(jié)劑的存在，而其細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后通過再分化形成再生植株。它是最為常見的。

⑵器官培養(yǎng)：

將植物的器官如胚、胚乳、珠心、子房、根、莖、葉、花和幼果的部分組織接種在無菌培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。⑶細(xì)胞和原