HIV快診檢測點作業(yè)指導書

涼山彝族自治州HIV快診檢測點實驗室作業(yè)指導書涼山州人民政府防治艾滋病工作委員會辦公室涼山州疾病防止控制中中國-默沙東艾滋病合作項目涼山辦公室二0一一年七月涼山州HIV快速檢測點實驗室作業(yè)指導書目錄前言………………（1）涼山州艾滋病快速檢測樣本的接受、登記與運輸……………（2）涼山州艾滋病快診檢測點檢測環(huán)節(jié)及規(guī)定……（3）涼山州HIV抗體快速檢測流程圖………………（6）涼山州HIV抗體快速檢測質量控制……………（7）涼山州HIV抗體快速檢測實驗室消毒與污物解決……………（9）涼山州HIV抗體快速檢測實驗室生物安全及職業(yè)暴露………（10）涼山州HIV抗體快速檢測實驗統(tǒng)計及成果上報………………（13）涼山州HIV快診檢測實驗室管理制度…………（14）涼山州HIV抗體快速檢測保密程序……………（15）涼山州艾滋病檢測點資格審批申請表…………（16）涼山州醫(yī)療衛(wèi)生機構HIV常規(guī)檢測記錄表……（19）涼山州HIV快速實驗原始統(tǒng)計表………………（20）涼山州HIV抗體篩查報告單……………………（21）涼山州艾滋病檢測點HIV抗體復檢檢測單……（22）涼山州艾滋病檢測各類試劑入庫、領取使用記錄表…………（23）涼山州艾滋病檢測實驗室儀器使用溫度統(tǒng)計…………………（24）涼山州艾滋病檢測實驗室廢棄物及生物垃圾解決統(tǒng)計表……（25）四川省艾滋病檢測點審評驗收狀況一覽表……（26）涼山州HIV抗體檢測月報表……………………（27）涼山州HIV抗體檢測季度報表…………………（28）前言為認真貫徹貫徹溫家寶總理考察涼山州艾滋病防治工作的重要批示精神，實現國家艾滋病防治工作目的，加大艾滋病檢測力度，加強對基層工作人員的技術指導，進一步規(guī)范HIV快速檢測工作，提高防治工作的質量，我辦委托州疾控中心，在國家艾滋病防治技術指南和規(guī)范的基礎上，結合我州實際狀況，制訂了《涼山彝族自治州HIV快速檢測點實驗室作業(yè)指導書》（試行）（下列簡稱《指導書》）?！吨笇穬热萆婕啊皹颖镜慕邮?、登記和解決”、“HIV抗體快速檢測流程圖”“HIV抗體快速檢測質量控制”、“實驗室消毒與污物解決”、“實驗室生物安全及職業(yè)暴露”、“檢測實驗統(tǒng)計及成果上報”“保密程序”、“統(tǒng)計表格”等。為提高《指導書》科學性、權威性和可操作性，特邀請國家和省級專家共同參加了《指導書》的制訂工作。在此，我辦對予以指導和支持的全部單位和機構，以及為《指導書》做出奉獻的有關領導和專家表達衷心的感謝。由于時間和水平等諸多因素和限制，本書難免存在疏漏、不當之處，請各使用單位和檢測人員提出修改意見，我為將對《指導書》進行修訂和完善。涼山州人民政府防治艾滋病工作委員會辦公室8月涼山州艾滋病快速檢測樣本的接受、登記與運輸一、標本的接受登記：對受檢人群的全部信息（檢測日期、編號、姓名、性別、年紀、民族、婚姻、文化、身份證號碼、戶籍所在地、樣本類型）具體登記在艾滋病咨詢檢測記錄表和快診原始統(tǒng)計表中。二、標本的采集：采集樣品應按臨床采血技術規(guī)范采集指尖血或靜脈血，采集標本時應注意生物安全，直接接觸HIV感染者或艾滋病病人血液和體液時操作應戴手套，避撤職業(yè)暴露。三、標本運輸：陽性標本在送往縣疾控進行復檢時，嚴格按照“生物安全運輸管理條例”包裝。事先檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現溢漏應立刻將樣品移出，對樣品管和盛器消毒。同時與“艾滋病檢測點HIV抗體復檢檢查單”一并送往縣疾控，雙方簽字驗收。對所采集的血樣不能及時送往縣疾控中心，可短期內將樣品寄存2～8℃冰箱。涼山州艾滋病快診檢測點檢測環(huán)節(jié)及規(guī)定一、工作環(huán)節(jié)【環(huán)節(jié)一】對受檢人群的全部信息（檢測日期、編號、姓名、性別、年紀、民族、婚姻、文化、身份證號、戶籍所在地、樣本類型）具體登記在艾滋病咨詢檢測記錄表和快診原始統(tǒng)計表中。見附表1?！经h(huán)節(jié)二】按臨床采血技術規(guī)范采集指尖血或靜脈血，無菌條件下采集指尖血或（靜脈血3～5ml）室溫靜置，讓血漿自然分離。（做HIV快診等實驗用）。【環(huán)節(jié)三】按照試劑盒闡明書規(guī)定，從包裝盒中取出測試卡，平衡至室溫并編號，精確加入血漿（或全血、稀釋液）樣品于測試卡的架處。30分鐘內觀察成果，成果鑒定見圖。對照區(qū)（C）線SCTCTCTCTCT對照區(qū)（C）線SCTCTCTCTCT檢測區(qū)（T檢測區(qū)（T）線加樣孔（S加樣孔（S）線SSSSSSSS陽性陽性陰性無效無效陽性陽性陰性無效無效快診試劑保存條件：能夠保存2～30℃,有稀釋液和快速試劑,建議保存在2～8℃冰箱.試劑出入庫一定要有統(tǒng)計,涉及試劑廠家名稱、規(guī)格、試劑效期、批號、接受人、使用人簽名、使用日期等。見附表2。每天統(tǒng)計寄存試劑冰箱溫度、實驗溫度、環(huán)境溫濕度。【環(huán)節(jié)四】加入樣品后，普通在15～30分鐘內觀察成果（根據各試劑廠家的規(guī)定）不得超出30分鐘，否則無效。在質控區(qū)和反映區(qū)均出現紅線，成果評定為陽性。只在質控區(qū)出現紅線，反映區(qū)不出現紅線，成果陰性。不出現質控帶，實驗無效，（實驗溫度保持在20～25℃）。【環(huán)節(jié)五】陽性成果做好統(tǒng)計，并認真填寫二表二卡，同時將血漿樣本一同送往縣疾控中心做復檢實驗。初篩實驗按《全國艾滋病檢測規(guī)范技術》?！经h(huán)節(jié)六】待確證成果返回后，一并裝入個人隨訪檔案袋中。二、篩查點實驗室生物安全規(guī)定：全部使用過的采血針頭、真空采血器、測試卡、一次性手套、一次性工作服必須通過嚴格消毒或高壓消毒，焚燒解決。嚴禁在實驗室內進食、喝水、吸煙、化妝等違反生物安全規(guī)定的行為。三、艾滋病檢測實驗室慣用的消毒辦法：（一）物理消毒辦法：1、高壓蒸汽消毒，121℃，消毒15～20分鐘。2、干烤消毒，140℃，消毒2～3小時。3、定點集中式焚燒，要有專人看守。（二）化學消毒辦法：1、含氯消毒劑，有效含氯量～5000mg/L。2、使用75%乙醇消毒儀器表面20～30分鐘。3、使用2%的戊二醛消毒儀器表面20～30分鐘。四、艾滋病篩查點實驗室房屋規(guī)定：（一）房屋面積：規(guī)定在16～20平方米獨立的實驗用房，決不允許和疫苗防止注射、配制輸液液體，注射液體等無關聯(lián)的工作混合使用。（二）房間內擺放一張清潔的桌子，專門用于登記統(tǒng)計，另外一張桌子用于采血和做快診實驗專用。擺放一種文獻柜，寄存文獻檔案。一臺消毒高壓鍋（有條件的單位），一種帶蓋的消毒桶，內裝含氯量在～5000mg/L的消毒液，專門用于裝被污染過的或使用過的實驗耗材。另外在放置一種垃圾桶，放置無污染性垃圾。涼山州HIV抗體快速檢測流程圖樣品樣品快診實驗快診實驗陽性反映陰性反映陽性反映陰性反映將樣本送篩查實驗室將樣本送篩查實驗室復檢實驗復檢實驗均陽性反映均陰性反映一陰一陽均陽性反映均陰性反映一陰一陽送確證明驗室做確證明驗報告陰性送確證明驗室做確證明驗報告陰性涼山州HIV抗體快速檢測質量控制一、目的監(jiān)控每次檢測的重復性和穩(wěn)定性以及檢查試劑盒批間差別、批間操作的重復性，驗證檢測成果。二、合用范疇合用于HIV-1/2抗體定性快速檢測。三、作業(yè)程序（一）檢測前質控：1、樣品規(guī)定唯一編號，實驗前認真核對，檢查。2、檢測人員每日檢查室內溫度，實驗環(huán)境溫濕度應在試劑盒闡明書的范疇內，試劑和樣品應按規(guī)定寄存，并做好統(tǒng)計。3、檢查與否有足夠的試劑庫存量，確證試劑是在使用期范疇內，嚴禁使用過期試劑。4、每批實驗如果應用不同批號的試劑，應做好統(tǒng)計。（二）檢測過程質控：1、準備好實驗區(qū)域，擺放好必要器具。2、具體統(tǒng)計樣品編號、姓名、地址、試劑名稱及批號，操作者、復檢者簽名。3、核對樣品編號、標記、檢測、避免錯號。4、實驗前認真閱讀試劑盒闡明書，嚴格按照闡明書操作。5、需要在冰箱保存的試劑，先從冰箱內取出，放置室溫，平衡后在使用。剩余的試劑條應立刻放入自封袋中密封2～8℃保存，能夠寄存在室溫的試劑，要盡量避免高溫。6、建議每一次最多做10份樣品，確保試劑條和編號與標本編號精確對應，避免錯號和交叉污染。7、成果鑒定時，質控帶必須出現實驗條帶才干成立。如實驗完畢后未出現質控條帶，本次實驗成果無效，實驗需重做。8、外部質控，由國家或省疾控中心提供，或試劑廠家購置。規(guī)定在更換不同試劑批號時，更換不同廠家時，更更換不同檢測人員時做外部質控。（三）檢測后質控：1、實驗成果進行判讀時，應確保判讀地點光線充足。對于難以判讀的條帶，最佳有2人判讀。2、復核樣品編號并填寫實驗成果。3、向實驗室負責人報告檢測成果。4、檢查試劑庫存量，根據實際需要，提前向上級實驗室申請補充。5、在收到或檢測時，發(fā)現試劑出現外包裝盒或內容物已損傷，標簽出現錯誤、缺失或筆跡含糊（特別是產品廠家名稱、批號、生產日期或失效期），應具體統(tǒng)計。涼山州HIV抗體快速檢測實驗室消毒與污物解決按照“生物安全管理條例”對污染物品、進行有效消毒解決。一、血液標本應置于運輸箱內，按照三層包裝后運輸，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。送檢單位外面套清潔的塑料袋封口一并運輸。二、多種化學消毒劑均應貼有標簽，放置于適宜和位置，實驗臺上不放置不必要的物品。實驗室環(huán)境一旦污染，限在污染區(qū)外周邊倒入消毒液，逐步向中心消毒解決。并做好統(tǒng)計。三、實驗室全部生物垃圾，涉及用過的一次性手套和工作衣，置于黃色污物袋內，經焚燒或有效消毒解決后定點深埋。污染的非一次性工作衣應先消毒后洗滌。四、全部鋒利品、血樣管和血液標本放置于不適宜刺破的容器內（銳器盒，帶蓋塑料桶），限制在實驗室內消毒后在指定地點焚燒解決。五、慣用的消毒劑和消毒辦法與病毒性肝炎消毒法相似。（一）銳器盒或塑料消毒桶：5000mg/L次氯酸鈉。（二）生物安全柜、工作臺面和儀器表面：使用75%乙醇。（三）溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。涼山州HIV抗體快速檢測實驗室生物安全及職業(yè)暴露一、建立安全制度（一）成立生物安全領導小組，隨時自查和督導生物安全隱患。（二）實驗室的設備、建筑和設施的安全必應通過專家的評審。（三）建立安全原則操作程序，該程序應合用于現有的實驗條件，并與實驗室其它規(guī)章制度一致。（四）無論與否發(fā)生意外事故，每年都要對安全原則操作程序及其實施狀況進行檢查。（五）制訂意外事故解決預案，建立意外事故的登記和報告制度。出現職業(yè)暴露意外事故應及時解決，同時報告主管領導。二、人員管理和培訓（一）人員管理1、新調入人員、外來合作、進修學習的人員在進入實驗室前，須通過實驗室主任同意。非實驗室人員和非實驗室物品不得進入實驗室。2、實驗室工作人員每年采血檢測HIV、HBV、HCV、PT抗體檢測，建立個人健康檔案制度，血清樣本應長久保存。（二）培訓1、全部工作人員必須通過HIV檢測技術和實驗室安全培訓，涉及上崗培訓和復訓，并接受管理人員的監(jiān)督。實驗室的安全負責人要對工作和環(huán)境的安全負責，全部工作人員都有責任保護自己和別人的安全。2、必須告知新上崗人員實驗室工作的潛在危險，進行安全教育，直至有能力后方可單獨工作。三、安全保障方法（一）個人保健和防護1、高原則的個人保健對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、患病都會增加感染的危險。手部皮膚有開放性傷口及其它不適于工作的狀況，應暫停工作。2、進實驗室前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。3、進入實驗室應穿隔離衣、戴手套。如手套破損，立刻丟棄，洗手后換上新手套。4、離開實驗室前必須脫去隔離衣、手套并洗手。5、嚴禁在艾滋病檢測實驗室內進食、飲水、吸煙和化妝。（二）帶入和帶出實驗室的物品1、對全部帶入實驗室的樣品都應進行檢查，裝有測試樣品的包裝箱（袋）應在安全柜或其它適宜的裝置內打開。2、將HIV測試樣品轉送到上級實驗室復檢時，應按照生物安全三層包裝，避免對人員和環(huán)境的污染。運輸樣品的人應明確接受地點為和接受人，在樣品接受單上雙方簽名，確認樣品無外溢，無不合格現象。3、污染或可能造成污染的材料在帶出實驗室前應進行嚴格消毒。（三）減少利器的使用1、實驗室最佳不使用玻璃器皿，應作用塑料器皿。2、盡量使用安針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以減少直接接觸血液的刺傷的危險性。應將用過的針頭直接放入銳器盒內，消毒解決。四、意外事故解決（一）緊急解決方法1、皮膚針刺傷或切割傷：立刻用肥皂洗和大量流水沖洗，盡量擠出損傷處的血液，用70%乙醇或其它消毒劑消毒傷口。2、皮膚污染：用水和肥皂沖洗污染部位，并用適宜的消毒劑浸泡，如70%乙醇或其它皮膚消毒劑。3、粘膜污染：用大量流水或生理鹽水徹底沖洗污染部位。4、衣物污染：盡快脫掉污染的衣物，進行消毒解決。5、污染物潑濺：無論發(fā)生大、小范疇污染物潑濺事故時，應立刻進行消毒解決。（二）事故登記1、統(tǒng)計事故發(fā)生的時間、地址及具體通過。2、統(tǒng)計暴露方式，受傷部位、傷口深淺、暴露程度。3、解決辦法：經專家評定暴露級別和與否采用暴露后藥品防止，如果是，應具體統(tǒng)計用藥狀況。4、隨訪檢測日期：0、1、3、6、12，統(tǒng)計每次檢測成果。（三）發(fā)生上述事件后，遵照三條原則，及時解決原則，報告原則，保密原則。涼山州HIV抗體快速檢測實驗統(tǒng)計及成果上報一、目的由于快速檢測成果難以進行電子化統(tǒng)計，檢測條無法作為原始統(tǒng)計長久保存，因此現場檢測數據的統(tǒng)計和管理就變得十分重要。真實和精確的原始統(tǒng)計是審核檢測成果報告的唯一基礎性數據，統(tǒng)計信息不全或錯誤，將造成感染者無法追蹤和管理。二、內容快速檢測統(tǒng)計本用于登記日常快速檢測成果，涉及的基本內容有：檢測日期、檢測序號、受檢者姓名、年紀、性別、民族、文化、婚姻、人群來源、戶籍所在地和單位住址，身份證號碼或新農合號。三、規(guī)定（一）對于陽性樣本，除了要統(tǒng)計具體地址、身份證號碼或新農合號外，還規(guī)定填寫二表二卡（傳染病報告卡、艾滋病性病附卡、個案隨訪表、艾滋病感染者/病人及家眷狀況記錄表），用指尖血檢測的的要重新采集靜脈血（3～5ml），分離血漿，按規(guī)范包裝好和送檢單一同送往本地縣疾控中心復檢。（二）檢測點每月將成果統(tǒng)計一報到縣疾控中心，縣疾控中心再把轄區(qū)內各個檢測點數據收集匯總后，上報到涼山州疾控中心艾滋病確證明驗室，涼山州疾控中心艾滋病確證明驗室將全州的數據匯總后，上報省疾控中心。（詳見：涼山州醫(yī)療衛(wèi)生機構HIV常規(guī)檢測記錄表及檢查原始統(tǒng)計）涼山州HIV快診檢測實驗室管理制度一、進入本實驗室的人員必須是通過上崗培訓合格的人員。外來人員需經領導同意后，方可進入。二、本實驗室為專用實驗室，不能和其它科室共用。實驗室分為清潔區(qū)和污染區(qū)，必須嚴格恪守生物安全管理條例。三、進入實驗室前要換上一次性鞋套，口罩、工作帽，穿上本實驗室專用的工作服，戴上一次性乳膠手套方可進行實驗操作。四、實驗結束后，要對工作臺面消毒，工作臺面應當用含氯消毒劑（～5000mg/L）或75%的乙醇進行消毒。五、離開實驗室之前應脫去工作服、手套，嚴禁將實驗室工作服穿出，按照原則程序徹底洗凈雙手。六、實驗室不能放置任何玻璃器皿。清潔區(qū)桌子只能放置檢測登記本和原始統(tǒng)計表格，實驗用桌子用于采血和做快診檢測。七、遇見意外事故，應立刻解決并分別以口頭和書面報告上級部門。八、每天實驗前統(tǒng)計冰箱、孵箱溫度，登記在維護統(tǒng)計本上。九、注意門窗、水電安全防護。十、保持實驗室清潔，每天清掃地面，桌面。全部廢棄物品須消毒后焚燒解決。十一、嚴格按照《全國艾滋病檢測技術規(guī)范》（）進行操作，對全部檢測成果遵行保密制度。涼山州HIV抗體快速檢測保密程序一、HIV抗體檢測實驗室要有專人負責妥善保存多種實驗統(tǒng)計、感染者檔案，不得私自修改和銷毀；嚴格恪守保密制度，未經省級衛(wèi)生行政部門許可，不得向無關人員或單位提供任何狀況。二、HIV抗體快診檢測實驗室檢測的陽性成果不是最后成果，應及時作進一步復檢、確認?？煸\檢測實驗室不能出具HIV抗體陽性的成果報告，不能告知無關聯(lián)人員。三、HIV抗體確認實驗室確認的陽性成果，以注意保密形勢向送檢單位出具陽性報告，送檢單位接到陽性報告后，應報告本地疾控和衛(wèi)生行政部門，在對陽性者告知檢測成果時要先杉好法律、醫(yī)學、生活等方面的咨詢。四、經確認的陽性標本，應寄存在實驗室走低溫冰箱保存，冰箱規(guī)定上鎖（雙人雙鎖保管），不得私自解決。標本保存時間根據衛(wèi)生行政部門規(guī)定。五、電腦保存的全部HIV資料應加密保存。涼山州艾滋病檢測點資格審批申請表申請單位：地址：郵編：電話：聯(lián)系人：E—mail：年月日填一、艾滋病檢測點人員名單及基本狀況：姓名性別年紀技術職稱何時何時獲得檢測點上崗證備注二、實驗室儀器、設備狀況：儀器設備名稱廠家型號購置時間運轉狀況核算者注：1.儀器、設備表格不夠可另附頁2.運轉狀況可按運轉正常、需小修、需大修三檔填寫三、申請理由：單位（蓋章）年月日四、縣（區(qū)、市）衛(wèi)生行政主管部門意見：單位（蓋章）年月日五、市（州）級專家組驗收意見：組長（簽字）專家（簽字）年月日六、衛(wèi)生行政（或主管）部門審評成果：單位（簽字）年月日涼山州醫(yī)療衛(wèi)生機構HIV常規(guī)檢測記錄表略涼山州HIV抗體篩查報告單HIV抗體篩查報告REPORTOFHIVANTBODYSCEENINGTESTING秘密SECRET編號NO：送檢單位FROM送檢日期DATE送檢標本SPECIMEN送檢人群POPULATION姓名NAME性別SEX年紀AGE職業(yè)OCCUPATION國籍或民族NATIONALITY地址ADDRESS檢測辦法METHOD檢測日期DATE檢測成果RESULTS快速檢測結論CONCLUSION檢測者OPERATOR簽發(fā)者HEAD報告日期DATE篩查單位或實驗室（公章）INSTITUTIONORLABORATORY備注NOTE本報告僅對送檢樣品負責縣HIV抗體篩查快診實驗原始統(tǒng)計實驗批次：樣品來源收樣日期檢測日期樣品名稱樣品性狀樣品數量試劑名稱試劑批號試劑效期室內溫度檢查原則《全國艾滋病檢測技術規(guī)范》實驗流程：取出檢測卡放至室溫，取樣品于加樣處，分鐘內讀取成果。在試劑盒規(guī)定成果讀取時間內檢測卡反映以下圖：12121212TCCTTC對照區(qū)（C）線TCTCTCCTTC對照區(qū)（C）線TCTC檢測區(qū)（T）線檢測區(qū)（T）線加樣孔（S）加樣孔（S）圖A（陽性）圖B（陰性）圖C（無效）實驗編號成果描述成果判斷實驗編號成果描述成果判斷檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符檢測卡反映與圖相符備注:檢測人：復核人：涼山州艾滋病檢測點HIV抗體復檢送檢單秘密編號送檢單位送檢日期送檢標本送檢人群姓名年紀性別職業(yè)國籍民族婚姻狀況文化程度身份證號聯(lián)系電話現住址戶籍地址檢測辦法檢測日期試劑廠家批號使用期成果檢測者審核者送檢單位（公章）電話郵編備注本報告