第十八章 選修3 現(xiàn)代生物科技專題

目錄第十八章選修3現(xiàn)代生物科技專題第一講基因工程第二講克隆技術(shù)第三講胚胎工程第四講生態(tài)工程一、基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴(yán)格的設(shè)計，通過體外

技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在

水平上進行設(shè)計和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù)。基因工程的核心是

。DNA重組和轉(zhuǎn)基因DNA分子構(gòu)建重組DNA分子二、基因工程的基本工具

1．限制性核酸內(nèi)切酶

(1)來源：主要是從

中分離純化來的。

(2)限制性核酸內(nèi)切酶的作用及作用特點：①能識別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊的

序列(具有專一性)；②從特定部位(特定核苷酸序列)的兩個核苷酸之間斷開

。

(3)結(jié)果：產(chǎn)生

。原核生物核苷酸磷酸二酯鍵粘性末端2．DNA連接酶

(1)化學(xué)本質(zhì)：

。

(2)功能：將末端

的2個DNA片段連接起來形成

。

(3)DNA連接酶與DNA聚合酶的比較：DNA連接酶DNA聚合酶作用實質(zhì)都是催化兩個核苷酸之間形成

是否需模板

蛋白質(zhì)堿基互補配對重組DNA不需要磷酸二酯鍵需要DNA連接酶DNA聚合酶作用過程在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將

加到已存在的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵作用結(jié)果將存在的DNA片段連接成重組DNA分子合成新的

單個核苷酸DNA分子3.基因工程常用的載體

(1)基因工程常用載體是

，其化學(xué)本質(zhì)是

。

(2)條件：能在宿主細(xì)胞中保存下來并大量

，有一個至多個

切割點，有特殊的遺傳

，便于篩選。

(3)作用：①作為運載工具，將

轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞內(nèi)；②利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進行大量

。質(zhì)粒一種雙鏈環(huán)狀DNA分子復(fù)制限制性核酸內(nèi)切酶標(biāo)記基因目的基因復(fù)制三、基因工程的原理和技術(shù)

1．基因工程的基本原理讓人們感興趣的基因(即

)在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定和高效地

。

2．基因工程的基本操作步驟

(1)獲得目的基因：①目的基因：人們

的基因，如人的胰島素基因、植物的抗病基因等。目的基因表達所需要(2)形成重組DNA分子：一般用

的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割

的供體DNA分子和載體(如質(zhì)粒)，使其產(chǎn)生相同的粘性末端，然后用

將兩者連接在一起，形成

?；蛭膸炀酆厦告?zhǔn)椒磻?yīng)含有目的基因相同DNA連接酶重組DNA分子(3)將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞：①常用的受體細(xì)胞：

、枯草桿菌、

和動植物細(xì)胞等。②導(dǎo)入方法舉例：用質(zhì)粒作為載體，宿主細(xì)胞選擇

，用

處理大腸桿菌，增加其

的通透性，使含有目的基因的

更容易進入大腸桿菌宿主細(xì)胞。

(4)篩選含有目的基因的受體細(xì)胞：①篩選原因：并不是所有的細(xì)胞都接納了

。大腸桿菌酵母菌大腸桿菌氯化鈣細(xì)胞壁重組質(zhì)粒重組DNA分子②篩選方法舉例：質(zhì)粒上有抗生素如四環(huán)素的

，所以含有這種重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞就能夠在含有

的培養(yǎng)基中生長，而沒有接納

的細(xì)胞則不能生長，這樣就能篩選出含有

的受體細(xì)胞。

(5)目的基因的表達：目的基因在

中表達，產(chǎn)生人們需要的

。四、基因工程的應(yīng)用

1．基因工程與遺傳育種抗性基因四環(huán)素重組DNA分子重組DNA分子宿主細(xì)胞功能物質(zhì)(1)轉(zhuǎn)基因植物培育過程：(2)轉(zhuǎn)基因動物培育過程：2．基因工程與疾病治療

(1)基因工程藥物：如用工程菌生產(chǎn)人的胰島素、生長激素、干擾素和乙型肝炎疫苗等。

(2)基因治療：向目標(biāo)細(xì)胞中引入

的基因，以糾正或補償基因的缺陷，達到治療的目的。

3．基因工程與生態(tài)環(huán)境保護科學(xué)家正在利用基因工程技術(shù)開發(fā)生物可降解的新型材料；培育轉(zhuǎn)基因“超級細(xì)菌”，提高

的能力；利用轉(zhuǎn)基因微生物吸收環(huán)境中的重金屬等。正常功能分解石油DNA重組技術(shù)的基本工具[考情解讀]三種基本工具的作用及基因工程操作程序的關(guān)鍵步驟，近幾年高考考查的頻率較高，考查內(nèi)容包括工具酶類型、實質(zhì)及作用、載體作用及特點等，預(yù)計2014年高考仍可能對各類型操作工具的作用及特點結(jié)合圖形予以考查。

[例1]

(2013·溫州市一模)基因工程利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA(圖丙)。限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是 (

)A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體解析：Sau3AⅠ也可以識別切割BglⅡ的識別序列，且形成相同的粘性末端(GATC－)，但該信息未在圖中標(biāo)出。圖丙表示目的基因正確插入開環(huán)質(zhì)粒，而不是隨意插入。A、B、C選項酶切后，目的基因兩端形成的粘性末端都相同，會導(dǎo)致目的基因隨意插入開環(huán)質(zhì)粒。答案：D(2)識別序列的特點：呈現(xiàn)堿基互補對稱，無論是奇數(shù)個堿基還是偶數(shù)個堿基，都可以找到一條中心軸線，如圖，中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。如以中心線為軸，兩側(cè)堿基互補對稱；以

為軸，兩側(cè)堿基互補對稱。GCGCCGCGCCAGGGGTCC1．“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)特性：一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子。(3)切割后末端的種類：DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式——粘性末端和平末端(如下圖所示)。當(dāng)限制酶在它識別序列的中軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時，產(chǎn)生的是粘性末端，而當(dāng)限制酶在它識別序列的中軸線處切開時，產(chǎn)生的則是平末端。2．“分子縫合針”——DNA連接酶作用：只能將雙鏈DNA片段互補的粘性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來。如圖所示：3．“分子運輸車”——載體

(1)最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

(2)其他載體：λ噬菌體、動植物病毒。4．與核酸有關(guān)的幾種酶的比較名稱作用參與生理過程及應(yīng)用DNA連接酶連接兩個DNA片段限制性核酸內(nèi)切酶切割某種特定的脫氧核苷酸序列基因工程DNA聚合酶在脫氧核苷酸鏈上添加單個脫氧核苷酸DNA復(fù)制RNA聚合酶在核糖核苷酸鏈上添加單個核苷酸轉(zhuǎn)錄名稱作用參與生理過程及應(yīng)用解旋酶逆轉(zhuǎn)錄酶使堿基間氫鍵斷裂形成脫氧核苷酸單鏈DNA復(fù)制以RNA為模板合成DNA逆轉(zhuǎn)錄、基因工程[關(guān)鍵一點](1)限制性核酸內(nèi)切酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾。

(2)DNA連接酶起作用時不需要模板，DNA聚合酶起作用時則需模板。

(3)為使目的基因與載體形成相同的DNA片段的粘性末端以便連接，通常使用同一種限制性核酸內(nèi)切酶將二者切割，但如果不同限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子所產(chǎn)生的末端也存在互補關(guān)系時，兩末端也可連接。1．(2013·浙江名校聯(lián)盟)下圖示一種質(zhì)粒和人的胰島素基因，其中a表示標(biāo)記基因，b表示胰島素基因，E1表示某限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。現(xiàn)用該種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割質(zhì)粒和胰島素基因，后用DNA連接酶連接切割后的質(zhì)粒和胰島素基因，不可能出現(xiàn)的是(

)答案：C2．(2012·稽陽聯(lián)誼卷)高粱由于含有磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，在強光、高溫的條件下，其利用CO2的能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于水稻。從高粱的基因組中分離出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(ppc基因)，將其轉(zhuǎn)入水稻體內(nèi)，培育出了一批光合效率較高的轉(zhuǎn)基因水稻。下列說法正確的是 (

)A．從高粱的基因組中分離出ppc基因需要限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶等工具酶B．獲得的該轉(zhuǎn)基因水稻都是雜合子C．該批轉(zhuǎn)基因水稻都能產(chǎn)生磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶D．獲得的轉(zhuǎn)基因水稻每個體細(xì)胞都有ppc基因，且都能產(chǎn)生磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶答案：C3．(2013·溫州市二模)下列關(guān)于基因工程的敘述中，正確的是 (

)A.DNA連接酶和RNA聚合酶催化生成的化學(xué)鍵相同B.DNA連接酶對“縫合”序列不進行特異性識別，無專一性催化特點C.受體細(xì)菌若能表達質(zhì)粒載體上抗性基因，即表明重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入D.培育轉(zhuǎn)基因油菜，需對受體細(xì)胞進行氯化鈣處理答案：A基因工程的基本操作程序[考情解讀]基因工程的基本操作程序是近幾年高考的高頻考點，分值比重較大，一般和其他工程結(jié)合考查，考查形式既有簡答題又有選擇題。預(yù)計2014年高考通過與其他工程技術(shù)綜合考查學(xué)生解決實際問題能力的題目仍會出現(xiàn)。[例2]

(2013·學(xué)軍月考卷)采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?，培育出了轉(zhuǎn)基因羊。但是，人凝血因子只存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中。以下有關(guān)敘述正確的是 (

)A．如果人體細(xì)胞中凝血因子基因的序列是已知的，就不能用化學(xué)方法合成目的基因

B．可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵

C．在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他體細(xì)胞中

D．人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA連接酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA[解析]如果人體細(xì)胞中凝血因子基因的序列是已知的，一般用化學(xué)方法合成目的基因，A說法錯誤；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，動物多用顯微注射技術(shù)，B說法正確；在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因存在于任何體細(xì)胞中，但是由于基因的選擇性表達只在分化形成的乳腺細(xì)胞得到高效表達，C說法錯誤；人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA，D說法錯誤。[答案]B1．獲得目的基因

(1)從自然界中已有的物種中分離出來，如可從基因文庫中獲取。

(2)人工合成目的基因：根據(jù)已知的核苷酸序列利用原料以化學(xué)方法合成。

(3)利用PCR技術(shù)擴增目的基因：通過PCR技術(shù)可對已獲取的目的基因進行擴增，以獲取大量的目的基因。

2．形成重組DNA分子(基因工程的核心)(1)目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，且可遺傳給下一代，并能夠表達和發(fā)揮作用。(2)過程：3．將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞(1)導(dǎo)入原理：借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。(2)導(dǎo)入過程：生物種類植物細(xì)胞動物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法受體細(xì)胞體細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(主要)、基因槍法和花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵Ca2＋處理法原核細(xì)胞Ca2＋處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達載體與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子將含有目的基因的表達載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的DNA上→表達轉(zhuǎn)化過程微生物細(xì)胞動物細(xì)胞植物細(xì)胞生物種類4．篩選含有目的基因的受體細(xì)胞

(1)原理：質(zhì)粒上有抗生素抗性基因等標(biāo)記基因。

(2)方法：利用選擇培養(yǎng)基篩選。

(3)舉例：5．目的基因的檢測與鑒定

(1)分子水平檢測：①導(dǎo)入檢測：DNA分子雜交技術(shù)，即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作為探針檢測。(2)個體生物學(xué)水平鑒定：對轉(zhuǎn)基因生物進行抗蟲或抗病的接種實驗。[關(guān)鍵一點]

⑴只有第三步將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞不需堿基互補配對，其余都涉及堿基互補配對。

⑵工具酶只有兩種：限制酶在操作步驟1、2中用到且要求用同一種，目的是產(chǎn)生相同的粘性末端；DNA連接酶只在操作步驟2中用到。

⑶目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化的實質(zhì)是目的基因整合到受體細(xì)胞染色體基因組中。4.(2013·浙江九校卷)右圖表示人體細(xì)胞膜乙酰膽堿受體基因克隆技術(shù)操作過程，下列有關(guān)分析正確的是(

)A．該mRNA可以在人體的任何體細(xì)胞中獲取B．①過程中必不可少的酶是限制性核酸內(nèi)切酶C．重組質(zhì)粒感染細(xì)菌之前需用CaCl2

處理細(xì)菌細(xì)胞膜D．篩選的目的是淘汰未被感染的細(xì)菌，獲得被感染的細(xì)菌解析：該流程圖表示的是利用逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因后進行基因克隆的過程。由于只有某些神經(jīng)細(xì)胞的突觸后膜上才有乙酰膽堿受體，相關(guān)的mRNA也只存在于這樣的細(xì)胞中；①過程是逆轉(zhuǎn)錄形成單鏈DNA，需要逆轉(zhuǎn)錄酶；為了使質(zhì)粒容易進入受體菌，需用CaCl2

處理細(xì)菌細(xì)胞壁，使其通透性增加。答案：D5．(2012·杭州市一模)鹽害是全球水稻減產(chǎn)的重要原因之一，中國水稻研究所等單位的專家通過農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒將CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5個耐鹽基因?qū)胨?，獲得了一批耐鹽轉(zhuǎn)基因植株。下列有關(guān)耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻培育的分析正確的是 (

)A．該基因工程涉及多個目的基因，多種載體B．該基因工程所需的限制性核酸內(nèi)切酶可能有多種C、只要目的基因進入水稻細(xì)胞，水稻就會表現(xiàn)出抗鹽性狀D．可通過將水稻種植到有農(nóng)桿菌的土壤中觀察目的基因是否表達答案：B基因工程的原理及應(yīng)用[考情解讀]

近幾年高考以基因工程的成果作為背景，以大量的基因工程案例作為載體，考查基因工程的基本原理和應(yīng)用。考查形式以簡答題為主，預(yù)計2014年可結(jié)合當(dāng)今社會熱點(如轉(zhuǎn)基因食品，基因治療等)或科技前沿等載體命制基因工程的應(yīng)用類題目。

[例3]

(2013·學(xué)軍月考卷)科學(xué)家在某種農(nóng)桿菌中找到了抗枯萎病的基因，并以質(zhì)粒為運載體，采用轉(zhuǎn)基因方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品種。下列有關(guān)說法正確的是 (

)A．質(zhì)粒是最常用的運載體之一，質(zhì)粒的存在與否對宿主細(xì)胞生存有決定性的作用

B．通過該方法獲得的抗枯萎病金花茶，將來產(chǎn)生的花粉中不一定含有抗病基因

C．該種抗枯萎病基因之所以能在金花茶細(xì)胞中表達，是因為兩者的DNA結(jié)構(gòu)相同

D．為了保證金花茶植株抗枯萎病，只能以受精卵細(xì)胞作為基因工程的受體細(xì)胞[解析]質(zhì)粒的存在與否對宿主細(xì)胞生存沒有決定性的作用，A錯誤；花粉是減數(shù)分裂后的產(chǎn)物，減數(shù)分裂中等位基因分開分別進入不同的配子中，因此有的花粉是不帶有抗性基因的，B正確；該種抗枯萎病基因之所以能在金花茶細(xì)胞中表達并非兩者基因結(jié)構(gòu)相同，而是因為二者的遺傳物質(zhì)都是DNA，并且表達方式相同，所有生物都共用一套密碼子，C錯誤；植物體細(xì)胞具有全能性都可以作為受體使用，D錯誤。[答案]B(1)乳腺生物反應(yīng)器受生物性別的限制，若從動物尿液中提取目的基因產(chǎn)物則不受性別限制。

(2)基因治療是治療人類遺傳病的根本方法，但由于尚未全面了解基因調(diào)控機制和疾病產(chǎn)生的分子機理，基因治療目前只是處于初期的臨床試驗階段。

(3)基因工程的目的不同，可選用的受體細(xì)胞不同。若生產(chǎn)基因工程藥品，受體細(xì)胞一般選用微生物，利用微生物繁殖速度快的特點，可在短期內(nèi)獲得大量產(chǎn)品。6．(2013·寧波市十校聯(lián)考)基因靶向技術(shù)實質(zhì)是利用細(xì)胞DNA與外源DNA同源序列發(fā)生同源重組的性質(zhì)將一個結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因去除，或用其他序列相近的基因取代。下列關(guān)于基因靶向技術(shù)的應(yīng)用，不正確的是 (

)A．因為敲入的正?；蚩梢匀〈兄虏』虻淖饔?，所以該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療·B．對胚胎干細(xì)胞進行基因敲除，獲得基因敲除動物，可以獲得適合人體移植的豬器官，減弱或消除排斥反應(yīng)C．在基因敲除技術(shù)中涉及的變異類型是基因突變D．有了“基因靶向”這一強大的武器，人們就可以瞄準(zhǔn)某一特定基因，使其失去活性，進而研究該特定基因的功能答案：C7．(2013·嘉興市一模)下圖是某轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻培育流程簡圖。下列有關(guān)分析錯誤的是 (

)A．該過程涉及基因工程技術(shù)和植物克隆技術(shù)B．毒蛋白基因在轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻中的表達需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶C．可用帶熒光標(biāo)記的毒蛋白抗體檢測毒蛋白基因是否在水稻細(xì)胞中表達D．轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻的種植可能導(dǎo)致昆蟲群體抗毒蛋白基因頻率增加答案：B8．已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作，其簡要的操作流程如下：(1)實驗步驟①所代表的反應(yīng)過程是__________________。(2)步驟②構(gòu)建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制性核酸內(nèi)切酶和________酶，后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的________和________連接起來。(3)如果省略步驟②而將大量擴增的S蛋白基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能________，也不能_________。(4)為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用______________________與________________進行抗原－抗體特異性反應(yīng)實驗，從而得到結(jié)論。(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達的S蛋白與真核細(xì)胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是__________________________。解析：(1)利用RNA獲取DNA，一般采用逆轉(zhuǎn)錄的方法，在這一過程中需要逆轉(zhuǎn)錄酶。(2)目的基因與載體結(jié)合，先用限制性核酸內(nèi)切酶在目的基因和載體上切出相同的粘性末端，將目的基因片段插入載體的切口處，再加入適量的DNA連接酶，將粘性末端連接起來。(3)選擇性擴增后得到的含有遺傳信息的DNA片段(S蛋白基因)，直接導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，在不與其DNA整合的情況下，不進行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，得不到相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(4)檢測大腸桿菌合成的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可與人體內(nèi)產(chǎn)生的抗S蛋白的抗體進行抗原－抗體特異性反應(yīng)，以此進行檢測。(5)各種生物都共用一套遺傳密碼，因此轉(zhuǎn)入相同的目的基因，表達出的蛋白質(zhì)一般應(yīng)相同。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)DNA連接載體S蛋白基因(3)復(fù)制合成S蛋白基因的mRNA(4)大腸桿菌中表達的S蛋白SARS康復(fù)病人血清(5)相同表達蛋白質(zhì)所用的基因相同[高考隨堂體驗]1．(2009·浙江高考)下列關(guān)于基因工程的敘述，錯誤的是 (

)A．目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物B．每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進目的基因的表達解析：目的基因和受體細(xì)胞均可來自動、植物或微生物；基因工程中常用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；大腸桿菌為原核生物，不含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器，不能對蛋白質(zhì)進行加工，其合成的胰島素原無生物活性。運載體中的抗性基因為標(biāo)記基因，其作用是有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞，但不能促進目的基因的表達。答案：D2．(2010·浙江高考)在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中，下列操作錯誤的是 (

)A．用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B．用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C．將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體D．用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞解析：限制性核酸內(nèi)切酶切割的是DNA，而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)為RNA；目的基因與載體的連接由DNA連接酶催化連接；受體細(xì)胞為植物細(xì)胞，所以可以是煙草原生質(zhì)體；目的基因為抗除草劑基因，所以篩選的時候應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞。答案：A3．(2011·浙江高考)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒

pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是 (

)A．每個大腸桿菌細(xì)胞至少含一個重組質(zhì)粒B．每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點C．每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個adaD．每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子解析：受體大腸桿菌成功表達腺苷酸脫氨酶，說明每個大腸桿菌細(xì)胞至少含有一個重組質(zhì)粒，且每個ada

至少指導(dǎo)合成一個腺苷酸脫氨酶分子。重組質(zhì)粒的形成需先用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端，再在

DNA連接酶的作用下連接起來，連接起來的序列中會含有限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點。不同的限制性核酸內(nèi)切酶識別位點不同，不是每個限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點都能插入ada。答案：C4．(2012·浙江高考)天然的玫瑰沒有藍色花，這是由于缺少控制藍色色素合成的基因B，而開藍色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍玫瑰，下列操作正確的是 (

)A．提取矮牽牛藍色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補的DNA，再擴增基因BB．利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因BC．利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D．將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞解析：控制藍色色素合成的基因B即為目的基因，可通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得，再進行PCR擴增以增加其數(shù)量；基因文庫中保存的是各基因片段，提取時無須使用限制性核酸內(nèi)切酶；為使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在且能向下一代遺傳，應(yīng)先在體外使用DNA連接酶構(gòu)建基因表達載體，然后再導(dǎo)入大腸桿菌。答案：A5．(2012·四川高考)將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后，重新置入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)，通過發(fā)酵就能大量生產(chǎn)人生長激素。下列敘述正確的是(

)A．發(fā)酵產(chǎn)生的生長激素屬于大腸桿菌的初級代謝產(chǎn)物B．大腸桿菌獲得的能產(chǎn)生人生長激素的變異可以遺傳C．大腸桿菌質(zhì)粒標(biāo)記基因中腺嘌呤與尿嘧啶含量相等D．生長激素基因在轉(zhuǎn)錄時需要解旋酶和DNA連接酶解析：因人生長激素不是大腸桿菌生長和繁殖所必需的物質(zhì)，所以不是大腸桿菌的初級代謝產(chǎn)物。將大腸桿菌的質(zhì)粒連接上人生長激素的基因后，重新置入大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)，屬于基因工程中的人工基因重組，屬于可遺傳的變異。大腸桿菌質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子，不含尿嘧啶。生長激素基因在轉(zhuǎn)錄時需要解旋酶和DNA聚合酶，而不需要DNA連接酶。答案：B6．(2012·上海高考)回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞和表達的問題：(1)如下圖甲所示，若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb,1kb＝1000對堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域

(0.2kb)，那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2________。A．既能被E也能被F切開B．能被E但不能被F切開C．既不能被E也不能被F切開D．能被F但不能被E切開(2)已知在質(zhì)粒pZHZ1中，限制酶G切割位點距限制酶E切割位點0.8kb，限制酶H切割位點距限制酶F切割位點0.5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，據(jù)下表所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為________kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點標(biāo)注在圖乙中。(3)若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒pZHZ2導(dǎo)入至山羊的________細(xì)胞中。若pZHZ2進入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是________。(4)上述目的基因模板鏈中的。TGA序列對應(yīng)一個密碼子，翻譯時識別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是_______。一般而言，一個核糖體可同時容納________分子的tRNA。(5)下列四幅圖中能正確反映目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物內(nèi)部結(jié)構(gòu)的是________。TSS：轉(zhuǎn)錄起始位點，TTS：轉(zhuǎn)錄終止位點，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子解析：(1)用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb,1kb＝1000對堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域(0.2kb)，用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位點，形成的重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故本題選A。(2)根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長度為3.7kb切去EF之間的還有3.5kb，插入目的基因后構(gòu)成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒長度為1.6＋3.1＝1.2＋3.5＝4.7kb，可推導(dǎo)出目的基因長度為1.2kb。重組質(zhì)粒中G的切割位點距E的切割位點0.8kb，單獨用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb的兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的G酶識別位點外，還有一個G酶識別位點；H的酶切位點距F0.5kb，用H單獨酶切產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中含有另外一個H的酶切位點，根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H的識別位點標(biāo)注在圖乙中”，可確定在EF之間分別含有G和H的一個識別位點?？膳卸℅的識別位點，在距離E點右側(cè)0.8kb處，H的識別位點在距F左側(cè)0.7kb處。(3)將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞中，通常以受精卵作為受體細(xì)胞，當(dāng)受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達產(chǎn)物。重組質(zhì)粒插入在一條染色體DNA上，可通過雌雄轉(zhuǎn)基因山羊雜交的方法來獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。(4)目的基因的模板鏈連中堿基為TGA，則mRNA中對應(yīng)的密碼子為ACU，tRNA中的反密碼子為UGA，在翻譯的過程中，一個核糖體一般可以容納兩個tRNA攜帶氨基酸進入核糖體與mRNA進行互補配對，使得兩個氨基酸之間脫水縮合形成肽鍵，最多不會超過3個。(5)基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為mRNA，作為基因開始轉(zhuǎn)錄形成的在mRNA上的轉(zhuǎn)錄起始位點和終止位點應(yīng)在mRNA兩端；作為起始密碼子應(yīng)在轉(zhuǎn)錄起始位點之后，終止密碼子應(yīng)在轉(zhuǎn)錄終止位點之前，這樣才能保證翻譯的正常開始和終止。答案：(1)A(2)1.2見右圖(3)受精卵轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配(4)UGA

2(或3)(5)B“課時達標(biāo)檢測”見“限時集訓(xùn)（三十八）”一、克隆的概念克隆是指不通過兩個分子、兩個細(xì)胞或兩個個體的結(jié)合，只由一個模板分子、細(xì)胞或母體直接形成新一代分子、細(xì)胞或個體的

過程。二、植物的克隆

1．植物細(xì)胞全能性和組織培養(yǎng)方法

無性繁殖(1)植物細(xì)胞全能性：

①概念：植物體的每個

細(xì)胞都具有發(fā)育成完整植株的潛能。②細(xì)胞全能性的物質(zhì)基礎(chǔ)：生物體每個細(xì)胞都含有該物種所特有的全套

，都有發(fā)育成為完整個體必需的全部基因。③植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件：生活遺傳物質(zhì)無菌(2)植物組織培養(yǎng)程序：配制半固體培養(yǎng)基→獲取植物組織→培養(yǎng)植物組織，產(chǎn)生

→誘導(dǎo)愈傷組織成為

。

2．細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)愈傷組織植株3．原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程

(1)原生質(zhì)體培養(yǎng)：①原生質(zhì)體：脫去植物

后的球形植物細(xì)胞．②獲得方法：在0.5～0.6mol/L的

溶液環(huán)境下用

混合液處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，將細(xì)胞壁消化除去，獲得球形的

。③特點：比較容易攝取外來的

；便于進行

，形成雜交細(xì)胞；與完整植物細(xì)胞一樣具有全能性，仍可產(chǎn)生

，經(jīng)誘導(dǎo)分化成為完整植株。細(xì)胞壁甘露醇纖維素酶和果膠酶原生質(zhì)體遺傳物質(zhì)細(xì)胞融合細(xì)胞壁(2)植物細(xì)胞工程的概念和操作過程：培養(yǎng)植物細(xì)胞(包括原生質(zhì)體)，借助

方法，將外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入受體細(xì)胞中，或通過細(xì)胞融合(體細(xì)胞雜交)、顯微注射等將不同來源的遺傳物質(zhì)重新組合，再通過對這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞或重組細(xì)胞進行培養(yǎng)，獲得具有

的新植株。

4．辨析植物克隆應(yīng)用的正誤①培養(yǎng)特定細(xì)胞系，使得細(xì)胞的許多次生代謝產(chǎn)物得以能夠工業(yè)化的生產(chǎn)。 ()基因工程特定性狀√②通過花藥離體培養(yǎng)，進行單倍體克隆，進行植物育種。 ()③通過植物克隆不能獲得轉(zhuǎn)基因植物。 ()④在培養(yǎng)基中加入不同濃度的NaCl或病原體毒蛋白，誘發(fā)和篩選抗鹽或抗病突變體。 ()

三、動物的克隆

1．動物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成

(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)：動物取部分組織——大多取自動物胚胎、出生不久的

幼齡動物的器官和細(xì)胞↓××√√分散成單個細(xì)胞——

酶解↓細(xì)胞懸浮液↓卡氏瓶中培養(yǎng)——

培養(yǎng)↓細(xì)胞懸浮液↓卡氏瓶中培養(yǎng)——

培養(yǎng)胰蛋白酶原代傳代(2)細(xì)胞系和細(xì)胞株：細(xì)胞系：泛指可以傳代的細(xì)胞。細(xì)胞系中，由于細(xì)胞來自原代培養(yǎng)物中的不同的細(xì)胞譜系，并非所有的細(xì)胞均具有相同的

。細(xì)胞株：具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系。細(xì)胞株中的所有細(xì)胞具有

。細(xì)胞株一般具有恒定的染色體

、同工酶類型、病毒敏感性和生化特性等。

(3)克隆培養(yǎng)法：①概念：是把一個單細(xì)胞從群體中分離出來

培養(yǎng)，使之繁衍成一個新的細(xì)胞群體的技術(shù)。分化標(biāo)志和特性共同特性或分化標(biāo)志組型單獨②基本要求：保證分離出來的細(xì)胞是

。③易克隆成功的細(xì)胞：無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞等。④提高細(xì)胞克隆形成率的措施：選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、以

支持生長、激素刺激、使用二氧化碳培養(yǎng)箱調(diào)節(jié)pH等。⑤細(xì)胞克隆的用途：單一細(xì)胞的克隆由于

一致，是研究遺傳規(guī)律和生理特征的重要材料。一個滋養(yǎng)細(xì)胞基因型2.動物的克隆繁殖

(1)動物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度：①

>早期胚胎細(xì)胞>多能干細(xì)胞>單能干細(xì)胞>

的體細(xì)胞。②低等動物細(xì)胞>高等動物細(xì)胞。

(2)動物難以克隆的根本原因：動物的個體發(fā)育過程中，細(xì)胞分化使得細(xì)胞發(fā)生了基因的

，有的基因開放，有的基因關(guān)閉。使得基因組中基因的活動很不完全，不能像

那樣發(fā)揮細(xì)胞的全能性。受精卵高度分化差異表達受精卵(3)細(xì)胞核移植實驗和動物的克隆繁殖：①原理：動物

具有全能性。②過程：體細(xì)胞核③結(jié)果：產(chǎn)生

。新個體植物的克隆[考情解讀]

植物克隆在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用極為廣泛，成為新課標(biāo)高考的熱點，近幾年在高考試題中的比重逐漸提升。考查形式以簡答題為主，常與植物育種等知識結(jié)合以圖解的形式呈現(xiàn)，以考查基本概念和獲取信息的能力為主。[例1]

(2013·學(xué)軍月考卷)關(guān)于植物克隆，以下說法不正確的是 (

)A．不同種類植物或同種植物的不同基因型個體，其細(xì)胞全能性的表達程度大不相同。

B．煙草、番茄的培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)長期培養(yǎng)后，很容易成為缺乏成胚性的細(xì)胞系

C．長期培養(yǎng)中的植物細(xì)胞胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的原因可能是染色體畸變

D．小麥、玉米、水稻等作物的培養(yǎng)細(xì)胞在多次繼代培養(yǎng)后，會喪失細(xì)胞全能性的表達能力·[解析]細(xì)胞存在分化現(xiàn)象，分化程度越高，全能性越不容易表達，分裂旺盛的細(xì)胞比衰老的細(xì)胞更容易表達全能性，A說法正確；煙草和番茄等的培養(yǎng)細(xì)胞很容易再生出新植株，并能在多個代中保持細(xì)胞全能性的表達，B說法錯誤；植物培養(yǎng)過程中，細(xì)胞快速分裂，不可避免接觸各種物質(zhì)或者不良環(huán)境，有時會出現(xiàn)染色體畸變或者基因突變喪失原有的性狀，C、D說法正確。

[答案]

B1．植物細(xì)胞工程的操作過程2．植物細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的關(guān)系[關(guān)鍵一點]在脫分化和再分化時都要用到生長素和細(xì)胞分裂素，但兩者含量以及比例不同，效果也不同，歸納如下：

①細(xì)胞分裂素與生長素共同使用比例適中時——強烈促進愈傷組織的形成。

②細(xì)胞分裂素與生長素比例高時——有利于芽的形成。

③細(xì)胞分裂素與生長素比例低時——有利于根的形成。1．植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理、培養(yǎng)過程的順序及誘導(dǎo)的植物激素分別是 (

)①體細(xì)胞全能性②離體植物器官、組織或細(xì)胞③根、芽④生長素和細(xì)胞分裂素⑤生長素和乙烯⑥愈傷組織⑦再分化⑧脫分化⑨植物體A．①、②⑦⑥⑧③⑨、④

B．①、②⑧⑥⑦③⑨、④C．①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤D．①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤解析：植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；培養(yǎng)過程的順序是離體植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化得到根、芽，再由根、芽分化成植物體；所用激素是生長素和細(xì)胞分裂素。答案：B2．(2013·溫州市二模)下列關(guān)于克隆技術(shù)的敘述中，錯誤的是 (

)A.可利用原生質(zhì)體進行植物組織培養(yǎng)B.原生質(zhì)體可作為轉(zhuǎn)基因的受體細(xì)胞C.植物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是植物組織培養(yǎng)D.動物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是核移植解析：動物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動物細(xì)胞的培養(yǎng)。答案：D3．“白菜—甘藍”是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長周期短、耐熱性強和易于儲存等優(yōu)點。下圖是“白菜—甘藍”的雜交過程示意圖，請據(jù)圖回答：(1)在上述方法中，除去細(xì)胞壁的方法是________。(2)圖中原生質(zhì)體A和原生質(zhì)體B能融合形成一個雜種細(xì)胞，所依據(jù)的生物學(xué)原理是________________。(3)通常情況下，白菜和甘藍雜交是不能成功的，原因是__________________。(4)通過細(xì)胞工程獲得的“白菜一甘藍”是否可育？為什么？__________________________________________________________________________________________________。解析：(1)植物體細(xì)胞雜交時先要除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體。細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因而可用纖維素酶和果膠酶除去。(2)原生質(zhì)體融合時首先是細(xì)胞膜的融合，這說明了細(xì)胞膜具有流動性。(3)自然狀態(tài)下，白菜和甘藍為不同物種，存在著生殖隔離，所以不能雜交。(4)通過體細(xì)胞雜交獲得的“白菜—甘藍”是可育的，因為它的細(xì)胞中存在同源染色體，可以通過減數(shù)分裂產(chǎn)生有性生殖細(xì)胞，再經(jīng)受精作用形成種子。答案：(1)酶解法(用纖維素酶、果膠酶除去細(xì)胞壁)(2)細(xì)胞膜的流動性(3)存在生殖隔離(4)可育?？山?jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生有性生殖細(xì)胞，再經(jīng)受精作用形成受精卵并發(fā)育成種子s動物的克隆[考情解讀]

對本考點的考查主要以簡答題的形式呈現(xiàn)。常與一些社會熱點和科技前沿知識相聯(lián)系，以相關(guān)的重要成果為背景進行命題，考查應(yīng)用基本原理分析解決實際問題的能力。預(yù)計2014年高考中，與基因工程、胚胎工程相結(jié)合的試題仍會出現(xiàn)。

[例2]

(2013·溫州市一模)科學(xué)家利用小鼠成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系來培養(yǎng)肝細(xì)胞，下列敘述正確的是 (

)A．肝組織經(jīng)胰酶處理和懸浮培養(yǎng)可獲得肝細(xì)胞克隆

B．培養(yǎng)液中常添加抗生素

C．培養(yǎng)體系中小鼠成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期大于肝細(xì)胞

D．肝細(xì)胞貼壁生長時沒有接觸抑制現(xiàn)象

[解析]克隆培養(yǎng)法所得到的克隆細(xì)胞，應(yīng)來自一個單細(xì)胞而不是一群細(xì)胞；培養(yǎng)體系中的小鼠成纖維細(xì)胞失去增殖能力，無細(xì)胞周期；培養(yǎng)的動物細(xì)胞都有貼壁生長和接觸抑制的特點。

[答案]B1．動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物體細(xì)胞核移植的比較過程原理細(xì)胞增殖動物細(xì)胞核的全能性項目動物細(xì)胞培養(yǎng)動物體細(xì)胞核移植2．動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足的條件

(1)無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。項目動物細(xì)胞培養(yǎng)動物體細(xì)胞核移植結(jié)果獲得細(xì)胞群獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體聯(lián)系動物細(xì)胞培養(yǎng)是體細(xì)胞克隆的基礎(chǔ)(2)營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。

(3)溫度：適宜溫度：哺乳動物多是36.5℃±0.5℃；pH：7.2～7.4。

(4)氣體環(huán)境：95%空氣＋5%CO2，其中O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。[關(guān)鍵一點](1)在動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中有貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象。

(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶，第一次用胰蛋白酶處理剪碎的組織使之分散成單個細(xì)胞，第二次使貼壁細(xì)胞從瓶壁上脫落下來。

(3)細(xì)胞核移植選用去核卵(母)細(xì)胞的原因：雖然細(xì)胞核內(nèi)具有發(fā)展成為一個完整個體所需的全套基因，但動物體細(xì)胞分化程度較高，因此很難表達全能性。而卵(母)細(xì)胞比較大，容易操作；卵(母)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富，含有促使細(xì)胞核表達全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。將體細(xì)胞核移植入去核卵(母)細(xì)胞內(nèi)，既保證了重組細(xì)胞的完整性，又能刺激體細(xì)胞核表達其全能性，發(fā)育成為一個新的個體。(4)克隆動物與有關(guān)的親本的遺傳關(guān)系：動物體細(xì)胞核移植產(chǎn)生的新個體的親本有三個：體細(xì)胞核供體、卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體、代孕母體。新個體細(xì)胞核基因型與體細(xì)胞核供體完全一樣，因此新個體性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中也有少量的DNA，新個體性狀與卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體有一些地方相同。代孕母體沒有為新個體提供遺傳物質(zhì)，新個體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系。

(5)在發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變、染色體畸變導(dǎo)致性狀改變，也可能因外界環(huán)境條件的影響引起不可遺傳的變異。4．動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別在于 (

)A．培養(yǎng)基不同B．動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行C．動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D．動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株解析：動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基不同，動物細(xì)胞一般用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，而植物組織培養(yǎng)一般用固體培養(yǎng)基，與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還要加動物血清等。它們都是在無菌條件下進行的。答案：A5．(2013·稽陽聯(lián)誼卷)據(jù)英國《衛(wèi)報》披露，紐卡斯?fàn)柎髮W(xué)研究人員不久前成功實現(xiàn)一項生殖醫(yī)學(xué)技術(shù)，將患有線粒體疾病婦女的受精卵中的細(xì)胞核移植到健康婦女捐獻的去核卵子中，最終產(chǎn)下了健康的嬰兒。下列敘述錯誤的是 (

)A．此項技術(shù)的基礎(chǔ)是動物的細(xì)胞和組織培養(yǎng)B．此項技術(shù)的原理與克隆羊“多莉”完全相同C．健康婦女捐獻的卵子的細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控移入細(xì)胞核發(fā)育的作用D．嬰兒出生后具有患病夫婦以及捐獻健康卵子的婦女三方的遺傳特征解析：克隆羊“多莉”的產(chǎn)生是將動物體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，題中所述過程是將受精卵的細(xì)胞核的入去核卵母細(xì)胞，因此兩者不完全相同。答案：B6．(2013·寧波五校卷)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于制備流感疫苗。下列說法錯誤的是 (

)A．流感病毒的衣殼是該病毒具有抗原特異性的原因

B．培養(yǎng)動物細(xì)胞所用的培養(yǎng)液中需要添加動物血清和胰島素

C．病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)增殖的原因主要是其對外界抵抗力弱

D．將特定的流感病毒注射到相應(yīng)動物細(xì)胞內(nèi)進行培養(yǎng)，經(jīng)滅活后可制成疫苗解析：病毒是嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生微生物，只有在活細(xì)胞內(nèi)才能進行增殖。答案：C[高考隨堂體驗]1．(2009·浙江高考)用動、植物成體的體細(xì)胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是 (

)A．都需用CO2培養(yǎng)箱B．都須用液體培養(yǎng)基C．都要在無菌條件下進行

D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性解析：植物組織培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基，不需用CO2培養(yǎng)箱，而動物細(xì)胞培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基；植物組織培養(yǎng)可得到完整的植物個體，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，動物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的是動物細(xì)胞或代謝產(chǎn)物，未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性；植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)均需要在無菌條件下進行。答案：C2．(2010·浙江高考)下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是

(

)A．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B．克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C．二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D．惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進行傳代培養(yǎng)解析：由于接觸抑制，動物細(xì)胞培養(yǎng)時只能形成單層細(xì)胞；克隆培養(yǎng)法在培養(yǎng)時，由于所有子代細(xì)胞來自于一個親代細(xì)胞，所以基因型一般都相同；二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的，只有少數(shù)遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞，才能無限增殖；惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有癌變的特點，可進行傳代培養(yǎng)。答案：D3．(2011·上海高考)關(guān)于哺乳動物細(xì)胞體外培養(yǎng)的難易程度，下列表述正確的是 (

)A．乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞；胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞B．乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞；胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞C．乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞；脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞D．乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞；脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞解析：哺乳動物的乳腺細(xì)胞和脂肪細(xì)胞都是高度分化的細(xì)胞，體外培養(yǎng)難度大，乳腺癌細(xì)胞能夠惡性增殖，容易進行體外培養(yǎng)，胚胎細(xì)胞具有很強的分裂增殖能力，容易進行體外培養(yǎng)。答案：A4．(2012·廣東高考)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是 (

)A．組織培養(yǎng)

B．細(xì)胞雜交C．顯微注射

D．核移植解析：草莓植株分生區(qū)的細(xì)胞含病毒的量比較少，可以利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出脫毒幼苗。答案：A“課時達標(biāo)檢測”見“限時集訓(xùn)（三十九）”一、從受精卵談起

1．受精作用

(1)概念：成熟的精子和卵細(xì)胞融合成為

的過程。

(2)過程：包括

、精子附著于卵膜、

等幾個過程。

(3)同種動物精卵才能結(jié)合的原因之一：同種動物精子、卵細(xì)胞表面有

相互識別的

。受精卵精卵識別精卵質(zhì)膜融合特異性蛋白

2．胚胎發(fā)育的過程

(1)個體發(fā)育起點：

。

(2)受精卵進行的細(xì)胞分裂是

分裂。

(3)胚胎發(fā)育各時期的特點：卵裂期：當(dāng)卵裂球含2～8個細(xì)胞時，其中的每個細(xì)胞

都具有

↓囊胚期：中間有空腔，即

；外表為扁平細(xì)胞，稱為

，將來發(fā)育成胚胎的

或

(如胚盤)；囊胚內(nèi)細(xì)胞團的細(xì)胞為

，是具

的細(xì)胞，能分化出成體動物的所有組織和器官受精卵有絲全能性囊胚腔滋養(yǎng)層附屬結(jié)構(gòu)胚外結(jié)構(gòu)胚胎干細(xì)胞全能性↓原腸胚期：具有內(nèi)、中、外三個胚層二、胚胎工程胚胎工程研究的重點內(nèi)容：

、胚胎體外培養(yǎng)、

、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等。

1．體外受精

(1)概念：采取雌性動物的卵細(xì)胞和雄性動物的精子，使其在

中受精。體外受精胚胎移植試管(2)過程：從

中取出成熟的精子，在培養(yǎng)液中使其達到

狀態(tài)；從

中獲得未成熟的卵細(xì)胞，在體外培養(yǎng)促進其成熟，最常用的方法是卵巢經(jīng)過

處理后，插入穿刺針吸取卵泡液(連同

細(xì)胞)取出，獲能的

和成熟后的

在體外適合的環(huán)境下共同培養(yǎng)一段時間，便可受精。

2．胚胎體外培養(yǎng)指應(yīng)用人工創(chuàng)造的環(huán)境，對獲取的

進行體外培養(yǎng)。附睪獲能卵巢超數(shù)排卵卵母精子卵細(xì)胞早期胚胎3．胚胎移植是指將經(jīng)濟價值較高、遺傳性狀優(yōu)秀的

，經(jīng)過激素處理，使其

后受精，然后將發(fā)育的早期胚胎分別移植到同期發(fā)情的代孕母的子宮內(nèi)，通過代孕母妊娠產(chǎn)仔的技術(shù)。

4．胚胎分割

(1)定義：是指借助

技術(shù)將

切割成幾等份，再移植到代孕母畜子宮中發(fā)育，產(chǎn)生同卵多仔后代的技術(shù)。

(2)基本步驟：在

下用切割針或者切割刀把

分割開，或者用

等方式將卵裂球中的細(xì)胞分散開；

或者細(xì)胞直接移植給受體，或者在體外培養(yǎng)到

階段，再移植到受體子宮內(nèi)著床發(fā)育。母畜超數(shù)排卵顯微操作早期胚胎顯微鏡胚胎酶處理分割的胚胎囊胚(3)優(yōu)點：可以成倍增加

，是一種

的方法。

5．胚胎干細(xì)胞

(1)定義：當(dāng)受精卵分裂發(fā)育到

(囊胚)時，

的細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞。

(2)胚胎干細(xì)胞的特點：未分化，具有

和二倍體核型，能被誘導(dǎo)分化為機體幾乎所有的細(xì)胞類型。

(3)胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)過程：將干細(xì)胞放在含有一層飼養(yǎng)層的培養(yǎng)基上培養(yǎng)；等內(nèi)細(xì)胞團突出飼養(yǎng)層外，用

或機械剝離

將內(nèi)細(xì)胞團用酶消化成單個細(xì)胞，置于新鮮培養(yǎng)液中培養(yǎng)。胚胎數(shù)量快速繁殖優(yōu)良種畜早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團發(fā)育全能性酶消化內(nèi)細(xì)胞團(4)培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的關(guān)鍵：具備一種必須能促進胚胎干細(xì)胞

，同時抑制其

的培養(yǎng)體系。

(5)胚胎干細(xì)胞核移植：是指把

移植到去核的

中，經(jīng)過胚激活、胚胎培養(yǎng)、

后直接由受體完成克隆動物的技術(shù)。

(6)干細(xì)胞研究的重要作用：可以進行基因敲除，獲得基因敲除的動物；可以轉(zhuǎn)變?yōu)槿梭w的任何一種細(xì)胞和組織；可以在試管中改良并創(chuàng)造動物新品種。生長分化胚胎干細(xì)胞核卵細(xì)胞胚胎移植從受精卵談起[考情解讀]本考點的高考命題側(cè)重于基礎(chǔ)知識的考查，近幾年高考賦分有所提升，考查形式既有選擇題又有簡答題。預(yù)計2014年高考中，將早期胚胎的培養(yǎng)條件及各時期特點與胚胎工程等知識結(jié)合考查的可能性較大。

[例1]下列關(guān)于動物胚胎發(fā)育過程的敘述中，錯誤的是 (

)A．胚胎發(fā)育的起點是受精卵

B．胚胎發(fā)育過程包括細(xì)胞的分裂與分化

C．受精卵首先通過卵裂發(fā)育成囊胚

D．原腸胚具備內(nèi)、外兩個胚層

[解析]動物胚胎發(fā)育的起點是受精卵，發(fā)育過程中，通過細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量和補充衰老死亡的細(xì)胞，通過細(xì)胞分化產(chǎn)生多種組織，進而形成各種器官。動物胚胎發(fā)育依次經(jīng)過受精卵、卵裂、囊胚、原腸胚、幼體等階段，原腸胚時期已具有三個胚層。

[答案]

D1．卵細(xì)胞只允許同種單個精子完成受精的保障

(1)同種生物精卵結(jié)合的保障：卵細(xì)胞透明帶上存在精子的特異識別受體，只允許同種生物的精子與卵細(xì)胞結(jié)合。

(2)防止多精入卵的保障：①單個精子穿過透明帶，觸及卵黃膜的瞬間引發(fā)透明帶反應(yīng)，透明帶蛋白質(zhì)變性成為較堅韌的一層，阻止其他精子進入，這是防止多精入卵的第一道屏障。②單個精子穿過卵黃膜入卵后，立即引發(fā)卵黃膜的封閉作用，拒絕其他精子再進入卵細(xì)胞，這是防止多精入卵的第二道屏障。(3)受精的標(biāo)志和受精完成的標(biāo)志：①受精標(biāo)志：在透明帶和卵黃膜之間觀察到兩個極體。②受精完成的標(biāo)志：雌、雄原核的融合。

2．早期胚胎發(fā)育

(1)過程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚

(2)圖示：(3)早期胚胎發(fā)育注意的問題：①起點是受精卵分裂，在輸卵管內(nèi)完成受精作用時即已開始，直至發(fā)育成為成熟的胎兒。②卵裂期的特點：細(xì)胞有絲分裂使細(xì)胞數(shù)目增加，但胚胎總體積并不增加或略縮小，因此每個細(xì)胞的體積會隨分裂的進行不斷縮小，但核內(nèi)遺傳物質(zhì)并未減少。③桑椹胚至囊胚的發(fā)育過程中，細(xì)胞開始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。④原腸胚的特點：個體發(fā)育中分化能力最強，細(xì)胞已分化形成外、中、內(nèi)三個胚層。⑤個體發(fā)育過程中從桑椹胚階段開始初步分化，分化出內(nèi)細(xì)胞團和滋養(yǎng)層細(xì)胞。1．(2009·江蘇高考)下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是 (

)A．卵裂期胚胎中細(xì)胞數(shù)目和有機物總量在不斷增加B．胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團均等分割C．胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點D．胚胎干細(xì)胞是一類未分化細(xì)胞，可從早期胚胎中分離獲取解析：卵裂期細(xì)胞不斷分裂，故細(xì)胞數(shù)目增多，但有機物因逐漸消耗而減少；內(nèi)細(xì)胞團是囊胚時期的，不是原腸胚時期的；胚胎干細(xì)胞具有細(xì)胞核大、核仁比較大而明顯的特點。胚胎干細(xì)胞是全能干細(xì)胞，是未分化細(xì)胞。答案：D2．(2013·杭州市一模)近年來發(fā)展起來的胚胎工程技術(shù)為優(yōu)良種畜的快速繁殖帶來了無限生機，下圖為經(jīng)體外受精和胚胎分割、移植培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程。下列相關(guān)敘述正確的是 (

)A．①可直接來自于母體，②要在體外進行獲能處理B．如胚胎③為卵裂球可用酶進行“分割”C．④⑤子宮內(nèi)的胚胎遺傳物質(zhì)有所不同D．⑥對移植的胚胎不發(fā)生排斥反應(yīng)是因為它們的遺傳物質(zhì)相同解析：卵裂球是指含2～8個細(xì)胞的早期胚胎，因此可用酶處理以獲得單個細(xì)胞，達到“分割”的目的。答案：B3．下面是畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，請分析回答： (

)(1)方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技術(shù)有____________和________。(2)用激素處理的目的是使B牛________。(3)A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應(yīng)的生理變化后，才能與B牛的卵子結(jié)合，完成受精作用，這個過程叫________。卵子受精的標(biāo)志是在卵黃膜和透明帶的間隙能夠觀察到________。(4)生產(chǎn)上常用________期的胚胎進行胚胎移植。若希望同時獲得多個性狀相同的家畜個體，可以使用______技術(shù)。解析：圖示方法中Ⅰ為利用體外受精和胚胎移植的方法培育試管牛，Ⅱ為克隆牛技術(shù)，兩者均用到動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)；進行體外受精前，要用促性腺激素處理促使B牛超數(shù)排卵。精子在受精前要經(jīng)過獲能過程，受精后卵子即可完成分裂進程，排出第二極體，所以在透明帶和卵黃膜的間隙中看到兩個極體，標(biāo)志著受精作用已經(jīng)完成；為保證移植胚胎的成活率，應(yīng)在囊胚期或桑椹胚期移植，利用胚胎分割技術(shù)還可獲得多個性狀相同的個體。答案：(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植(2)超數(shù)排卵(3)精子獲能兩個極體(4)桑椹胚(或囊胚)胚胎分割胚胎工程[考情解讀]

本考點命題以簡答題為主，多以圖解的形式呈現(xiàn)。主要與畜牧生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)實踐的應(yīng)用及與科技發(fā)展相聯(lián)系進行考查，“高起點，低落點”是相關(guān)考題的特點，以最新的胚胎工程和干細(xì)胞培養(yǎng)的研究成果為背景，對獲取信息的能力和綜合應(yīng)用知識的能力進行考查將可能成為2014年高考的熱點，備考時應(yīng)予以關(guān)注。[例2]下圖表示利用胚胎工程培育優(yōu)質(zhì)奶牛的基本流程：(1)桑椹胚是胚胎細(xì)胞數(shù)目為32個左右的胚胎，這個階段的每一個細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛力，屬于________。補充填寫胚胎發(fā)育的幾個重要階段：受精卵―→桑椹胚―→________―→________。優(yōu)質(zhì)奶牛的培育過程需要進行胚胎移植，移植后的胚胎能在受體子宮中存活，其生理基礎(chǔ)是________________________。

(2)在優(yōu)質(zhì)奶牛的培育過程中，為了能夠快速繁殖，常用體外受精技術(shù)，其過程為：該過程中卵母細(xì)胞可以直接在體外受精嗎？________(“能”或者“不能”)，在進行體外受精前要對精子進行________處理。

(3)若要同時獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可進行胚胎分割。應(yīng)選擇發(fā)育到________時期的胚胎進行操作，進行分割時，應(yīng)注意將________分割，通過胚胎分割產(chǎn)生的兩個或多個個體具有相同的______。(4)胚胎干細(xì)胞(簡稱ES細(xì)胞或EK細(xì)胞)是由________胚胎或者原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。具有很強的________能力和多向________的潛能。ES細(xì)胞將會給人類移植醫(yī)學(xué)帶來一場革命，原因是ES細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化形成新的________，還可以培育出新的________。[解析]

(1)桑椹胚的胚胎細(xì)胞數(shù)為32個左右，這些細(xì)胞屬全能細(xì)胞；移植后的胚胎能在受體子宮中成活的生理基礎(chǔ)是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生排斥反應(yīng)。(2)在進行體外受精時，卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)成熟后方可與獲能的精子受精。(3)進行胚胎分割移植最好選桑椹胚或囊胚予以分割。(4)胚胎干細(xì)胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出的一類細(xì)胞，ES細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化成新的組織細(xì)胞，還可培育出新的組織器官。

[答案]

(1)全能細(xì)胞囊胚原腸胚受體子宮對外來胚胎不發(fā)生排斥反應(yīng)(2)不能獲能(3)桑椹胚或囊胚內(nèi)細(xì)胞團均等遺傳物質(zhì)(4)早期增殖分化組織細(xì)胞組織器官1．體外受精和胚胎體外培養(yǎng)的流程2．胚胎移植的流程3．胚胎分割的流程4．胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)及核移植(1)胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)流程：(2)胚胎干細(xì)胞核移植的流程：[關(guān)鍵一點](1)胚胎分割：①材料選擇：發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。②囊胚期分割要求：內(nèi)細(xì)胞團均等分割，以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。

(2)胚胎移植：①胚胎移植成功與否要具備的兩個條件：

a．胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進行。

b．進行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。②同種動物之間進行胚胎移植易于成功。這里的“同種”是指“同物種”。③不同動物其胚胎移植的時間不同。牛、羊要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段；小鼠、家兔在桑椹胚前；人胚胎可在4個細(xì)胞階段移植；幾乎所有動物都不能到原腸胚階段移植，因為此時分化程度高，移植成功率很低。4．下圖表示利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)所做的一系列研究，過程Ⅰ是將帶有遺傳標(biāo)記的ES細(xì)胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過組織化學(xué)染色，用于研究動物體器官形成的時間、發(fā)育過程以及影響的因素。過程Ⅱ是將目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞的過程。下列有關(guān)敘述不正確的是(

)A．過程Ⅰ的研究利用了胚胎干細(xì)胞具有全能性的特點B．過程Ⅰ中，囊胚的后一個階段形成了內(nèi)、中、外三個胚層及兩個囊胚腔C．過程Ⅱ中可用顯微注射法將目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞D．過程Ⅱ中需要用到的工具有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和載體解析：過程Ⅰ利用了細(xì)胞的全能性。囊胚的后一個階段是原腸胚，具有內(nèi)、中、外三個胚層和原腸腔、囊胚腔兩個囊腔。過程Ⅱ中，將目的基因?qū)雱游锸荏w細(xì)胞常用的方法是顯微注射法，基因工程中常用的工具有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶及載體。答案：B[高考隨堂體驗]1．(2011·浙江高考)培育“試管山羊”的基本過程如下圖所示。若要培育成功，下列敘述正確的是 (

)A．甲過程中可通過給母山羊注射有關(guān)激素使其超數(shù)排卵B．乙過程的目的之一是促進卵母細(xì)胞和精子的成熟C．丙過程與乙過程中應(yīng)采用相同成分的培養(yǎng)液D．丁過程中早期胚胎需移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內(nèi)解析：甲過程的目的是采集卵母細(xì)胞并培養(yǎng)成熟，可通過注射促性腺激素促進母山羊超數(shù)排卵。乙過程的目的是促進精子和卵細(xì)胞結(jié)合，完成受精作用。受精是在獲能溶液或?qū)ｉT的受精溶液中進行，而早期胚胎培養(yǎng)是在發(fā)育培養(yǎng)液中進行；丁過程是胚胎移植，是將早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動物子宮內(nèi)使之繼續(xù)發(fā)育。答案：A2．(2012·江蘇高考)通過胚胎移植技術(shù)，可以實現(xiàn)良種牛的快速繁殖。下列相關(guān)敘述正確的是 (

)A．對供體和受體母牛都要進行相同激素處理B．受精和胚胎的早期培養(yǎng)都需要在體外進行C．對沖卵獲得的原腸胚檢查合格后方可移植D．胚胎分割移植實現(xiàn)同卵多胎的成功率較低解析：在胚胎移植時，需用促性腺激素對供體母牛進行超數(shù)排卵處理，而對受體母牛進行同期發(fā)情處理時，通常用孕激素或前列腺素；胚胎移植技術(shù)中移植的胚胎可來自體內(nèi)受精后發(fā)育，也可以來自體外受精培養(yǎng)；胚胎移植時，移植的胚胎應(yīng)該用桑椹胚或囊胚；目前二分胚進行胚胎移植的成功率較高，而同卵多胚成功率很低。答案：D3．(2012·天津高考)下列關(guān)