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青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)課件EXPERIMENTOFANIMALPHYSIOLOGY10/17/2023實(shí)驗(yàn)室要求準(zhǔn)守實(shí)驗(yàn)室守則,勿亂動(dòng)儀器,保持安靜每組六人,設(shè)一小組長(zhǎng)(試驗(yàn)前后檢查實(shí)驗(yàn)材料和器材)輪流打掃衛(wèi)生,帶走垃圾
實(shí)驗(yàn)報(bào)告專業(yè)、班級(jí)、學(xué)號(hào)、姓名、同實(shí)驗(yàn)者(1個(gè))題目、目的、原理、器材儀器、方法步驟、注意事項(xiàng)、結(jié)果分析等10/17/2023目錄INDEXEXP1.腸系膜血流顯微觀察EXP2.坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備EXP3.蛙心收縮記錄和心肌特性EXP4.骨骼肌收縮特性EXP5.離體腸段運(yùn)動(dòng)描記EXP6.離體蛙心灌流EXP7.神經(jīng)動(dòng)作電位、肌電和肌張力同步記錄EXP8.動(dòng)脈血壓的間接測(cè)定EXP11.紅細(xì)胞的凝集與ABO血型鑒定EXP9.紅細(xì)胞顯微計(jì)數(shù)EXP10.血紅蛋白測(cè)定EXP12.人體心電圖描記EXP13.動(dòng)脈血壓的直接測(cè)定及影響因素14.動(dòng)物生理學(xué)試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)10/17/2023腸系膜血流顯微觀察請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求觀察蛙腸系膜血管內(nèi)血液的流動(dòng),了解外周血管的血流特點(diǎn)及其影響因素10/17/2023基本原理腸系膜薄而透明,可觀察血流情況及神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)內(nèi)臟血管舒縮的作用。
動(dòng)脈血管內(nèi)血液由主干流向分支;靜脈血管內(nèi)血液由分支流向主干;毛細(xì)血管內(nèi)血細(xì)胞往往單排流動(dòng)。腸系膜10/17/2023儀器材料蟾蜍蛙類手術(shù)器械、顯微鏡、任氏液、0.01%去甲腎上腺素溶液。
具體請(qǐng)以每組清單為準(zhǔn)10/17/2023方法步驟1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:損毀蟾蜍的腦、脊髓10/17/20232.然后用大頭針將蛙腹位(背位)固定在蛙板上;在腹部側(cè)方做一縱行切口,輕輕拉出一段小腸袢,將腸系膜展開,用大頭針將腸系膜固定在蛙板孔上。10/17/20232、實(shí)驗(yàn)觀察項(xiàng)目(1)動(dòng)脈、靜脈、毛細(xì)血管內(nèi)血液流動(dòng)特點(diǎn)。(2)機(jī)械刺激的影響。(3)腎上腺素的影響。實(shí)驗(yàn)報(bào)告描繪觀察到的現(xiàn)象。10/17/2023注意事項(xiàng)1、固定腸系膜時(shí)大頭針要扎在腸外,避免撕裂要觀察的腸系膜;2、大頭針斜插固定,便于物鏡上下移動(dòng);3、注意不要污染顯微鏡。10/17/2023思考題1、根據(jù)觀察結(jié)果,歸納交感神經(jīng)及其遞質(zhì)對(duì)內(nèi)臟血管活動(dòng)的作用。2、如何判斷動(dòng)脈血管和靜脈血管?3、微循環(huán)是如何調(diào)節(jié)的?10/17/2023坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求學(xué)習(xí)并掌握兩棲類神經(jīng)-肌肉標(biāo)本的制備方法;觀察肌肉的收縮現(xiàn)象?;驹韮蓷惿窠?jīng)肌肉標(biāo)本體外保持活性的條件相對(duì)簡(jiǎn)單,操作容易,其興奮、收縮特性與哺乳動(dòng)物的類似。10/17/2023儀器材料蟾蜍。蛙毀脊針、蛙類手術(shù)器械、玻璃分針、鋅銅弓、任氏液等。具體請(qǐng)以每組清單為準(zhǔn)10/17/2023方法步驟1、損毀腦脊髓。2、在兩前肢附近剪斷脊柱,去掉內(nèi)臟,剝離皮膚,制備雙后肢標(biāo)本。10/17/20233、從正中間剪開后肢。4、用玻璃分針分離坐骨神經(jīng)。5、用玻璃分針分離腓腸肌。6、活性檢驗(yàn)。用線結(jié)扎8cm左右股骨留2-3cm椎骨留0.5cm10/17/2023注意事項(xiàng)1、剪刀的用法:粗剪刀用于剪骨骼、皮膚等,大剪刀用于剪肌肉、眼科剪用于剪神經(jīng)、血管等纖薄組織。2、神經(jīng)組織用玻璃分針分離,避免牽拉及用金屬器械夾持。3、制備過(guò)程中用任氏液保持神經(jīng)肌肉的濕潤(rùn)。10/17/2023思考題1、興奮是如何從神經(jīng)傳遞到肌肉的?2、肌肉收縮是鈣離子有什么作用?3、神經(jīng)興奮與肌肉收縮如何保證是一對(duì)一的關(guān)系?10/17/2023蛙心收縮記錄和心肌特性請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求了解心肌的某些特性并掌握蛙心收縮的記錄方法。觀察心肌的期前收縮與代償間歇現(xiàn)象。基本原理心肌的有效不應(yīng)期長(zhǎng),在心肌的相對(duì)不應(yīng)期之后、節(jié)律性興奮傳來(lái)之前給予單個(gè)閾上刺激,可引起一次期前(額外)收縮,其后便產(chǎn)生一個(gè)較長(zhǎng)的代償間歇。10/17/2023儀器材料蟾蜍。RM6240B信號(hào)采集處理系統(tǒng)、張力換能器、蛙心刺激電極、鐵支架、雙凹夾、蛙心夾、蛙板、蛙針、手術(shù)器械、絲線、小燒杯、滴管、大頭針、紗布,任氏液。10/17/2023方法步驟1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:將蛙雙毀髓,仰臥固定于蛙板上,用剪刀剪去胸壁,再小心地剪開心包膜,暴露心臟。將連有絲線的蛙心夾在心室舒張時(shí)夾住心尖,絲線另一端連張力換能器(小心!切勿用力牽拉換能器的彈簧片),換能器接RM6240B信號(hào)采集處理系統(tǒng)。10/17/20232、實(shí)驗(yàn)操作(1)打開儀器開關(guān)(背面)(2)雙擊電腦桌面“RM6240B”圖標(biāo)(3)打開“實(shí)驗(yàn)”下拉菜單,找到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目:“循環(huán)”--“期前收縮-代償間歇”(4)點(diǎn)擊“開始記錄”圖標(biāo)單擊此處觀看示范10/17/20233、觀察項(xiàng)目(1)描記正常心搏活動(dòng)曲線。(2)在心室收縮期給予中等強(qiáng)度的單個(gè)刺激,觀察能否引起心臟活動(dòng)的改變?(3)期前收縮和代償間歇。10/17/2023注意事項(xiàng)1、實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常給蛙心滴加任氏液,以防心肌組織干燥。2、引起期前收縮后,須間隔一段時(shí)間再給予心臟第二次刺激。3、固定刺激電極時(shí)確保電極接觸心室壁,并且不得影響心室的收縮。4、實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于把握施加刺激的時(shí)間。10/17/2023思考題1、心肌的絕對(duì)不應(yīng)期長(zhǎng)有何生理意義?2、心肌收縮與鈣離子的關(guān)系?3、心肌受到連續(xù)刺激后會(huì)發(fā)生強(qiáng)直收縮嗎?10/17/2023骨骼肌收縮特性請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求熟悉神經(jīng)肌肉標(biāo)本的制備方法理解刺激的強(qiáng)度、頻率對(duì)骨骼肌收縮的影響。10/17/2023基本原理骨骼肌機(jī)械收縮時(shí)間>>興奮不應(yīng)期,可以發(fā)生收縮的疊加;刺激的頻率增大到一定數(shù)值時(shí),會(huì)發(fā)生強(qiáng)直收縮。10/17/2023儀器材料蟾蜍。蛙類手術(shù)器械,任氏液,生理數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)、張力換能器、肌槽。具體以清單為準(zhǔn)。10/17/2023方法步驟1、神經(jīng)肌肉標(biāo)本的制備。注意問(wèn)題:(1)保留股骨2cm左右(2)結(jié)扎牢固,防止滑脫(3)肌肉、神經(jīng)保持濕潤(rùn)10/17/20232、聯(lián)結(jié)儀器(教師示范)(1)股骨用肌槽的螺絲固定;(2)結(jié)扎線聯(lián)結(jié)于張力換能器;(小心!切勿用力牽拉換能器的彈簧片)(3)神經(jīng)搭在電極上。10/17/20233、觀察項(xiàng)目(1)單收縮(2)不完全強(qiáng)直收縮(3)完全強(qiáng)直收縮操作系統(tǒng):
神經(jīng)肌肉—刺激頻率—典型實(shí)驗(yàn)點(diǎn)擊觀看示范10/17/2023注意事項(xiàng)1、制備標(biāo)本過(guò)程中,應(yīng)隨時(shí)用任氏液潤(rùn)濕神經(jīng)和肌肉,防止干燥。2、游離神經(jīng)時(shí),切勿用玻璃分針逆向剝離,以防損傷神經(jīng)干,又要避免金屬器械對(duì)神經(jīng)的不必要觸碰。10/17/2023思考題1、骨骼肌完全強(qiáng)制收縮時(shí),其細(xì)胞膜上的動(dòng)作電位是怎樣的?2、骨骼肌收縮一段時(shí)間后為什么會(huì)收縮能力下降?3、影響骨骼肌收縮的因素有哪些?返回目錄10/17/2023離體腸段運(yùn)動(dòng)描記請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作!??!返回目錄10/17/2023目的要求觀察平滑肌運(yùn)動(dòng)的一般特性,了解某些理化因素對(duì)平滑肌運(yùn)動(dòng)的影響。10/17/2023基本原理腸道平滑肌具有自律性,離體腸段在適宜條件下可保持自律性收縮的特性,其收縮頻率和幅度受到某些理化因素的影響。10/17/2023儀器材料兔。哺乳動(dòng)物手術(shù)器械、注射器、離體器官恒溫裝置、充氣裝置、張力換能器、RM6240B生理信號(hào)采集系統(tǒng)腎上腺素、乙酰膽堿等。具體以試驗(yàn)臺(tái)貼出的清單為準(zhǔn)10/17/2023方法步驟1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備(1)恒溫裝置預(yù)熱38℃a.臺(tái)氏液b.麥?zhǔn)显∶蟊3?00ml左右的臺(tái)氏液一直在水浴中預(yù)熱。10/17/2023注意:必須在完成預(yù)熱工作后方可進(jìn)行本部分操作?。。。?)離體腸段制備快速處死兔子(擊打延髓或耳緣靜脈注射空氣,一定要迅速?。。┭杆倨书_腹腔找到與胃連接的十二指腸,食糜后推,剪取十二指腸,將其剪成2cm的腸段,立即放入38℃臺(tái)氏液燒杯中。關(guān)鍵:操作迅速,否則影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果!10/17/2023(3)聯(lián)結(jié)儀器注意:
腸段浸入臺(tái)氏液;
通氣,控制通氣速度。10/17/20232、實(shí)驗(yàn)操作(1)打開儀器開關(guān)(背面)(2)雙擊電腦桌面“RM6240B”圖標(biāo)(3)打開“實(shí)驗(yàn)”下拉菜單,找到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(4)點(diǎn)擊“開始記錄”圖標(biāo)單擊此處觀看示范10/17/20233、觀察項(xiàng)目(1)正常運(yùn)動(dòng)曲線。(2)溫度的影響。(3)乙酰膽堿的影響。(4)腎上腺素的影響。(5)鈣離子(6)酸(7)堿10/17/2023注意事項(xiàng)1.
標(biāo)本安裝好后,應(yīng)在新鮮38℃臺(tái)氏液中穩(wěn)定5~10min,有收縮活動(dòng)時(shí)即可開始實(shí)驗(yàn)。2.注意控制溫度。加藥前,要先準(zhǔn)備好更換用的新鮮38℃臺(tái)氏液,觀察到實(shí)驗(yàn)結(jié)果后,應(yīng)立即用38℃臺(tái)氏液沖洗,待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后,再進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。3.平滑肌反應(yīng)較慢,若效果不明顯,可以增補(bǔ)劑量,但要防止一次性加藥過(guò)量。10/17/2023思考題1、各種藥物對(duì)平滑肌運(yùn)動(dòng)的影響機(jī)理。2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中為什么要不斷通氣?3、滴加藥物的順序有什么要求?10/17/2023離體蛙心灌流請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求掌握離體蛙心制備和灌流方法;了解體液因素對(duì)蛙心收縮的影響。10/17/2023基本原理心肌的收縮強(qiáng)度、頻率等受腎上腺素、乙酰膽堿等激素、神經(jīng)遞質(zhì)以及各種離子濃度等因素影響。10/17/2023儀器材料蟾蜍。蛙心套管、蛙心夾、蛙板、蛙類手術(shù)器械、RM6240生理信號(hào)采集系統(tǒng)、張力換能器、任氏液、長(zhǎng)滴管、鐵架臺(tái)等。
10/17/2023方法步驟1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備對(duì)蛙雙毀髓,仰臥固定于蛙板上,用剪刀剪去胸壁,再小心地剪開心包膜,暴露心臟,識(shí)別心臟動(dòng)脈球(圓錐)、靜脈竇(背面)等結(jié)構(gòu)(圖17-1A、B、C)。球10/17/2023球10/17/20232.于主動(dòng)脈干下穿雙線備用。3.用玻璃分針將蛙心向前翻轉(zhuǎn),在心臟背側(cè)找到靜脈竇,在靜脈竇以外用一條備用線結(jié)扎(注意勿結(jié)扎靜脈竇),阻止血回心。球2110/17/20234.在左主動(dòng)脈靠近動(dòng)脈球處剪一向心斜口(勿把血管剪斷),將注有少許任氏液的蛙心插管由此開口插入動(dòng)脈球,使插管尖端向動(dòng)脈球背部后方及心尖方向推進(jìn),在心室收縮時(shí)把插管推入心室內(nèi)(套管中有血噴出)。插管進(jìn)入心室后,調(diào)整合適位置,可見插管內(nèi)液面隨心跳而升降。小心用任氏液反復(fù)沖洗管內(nèi)的液體至清澈為止。10/17/2023用另一條備用線把血管和插管扎緊,并固定于插管的玻璃小鉤上,以免心臟滑脫。
玻璃小鉤10/17/20235.輕提插管,剪斷與心臟相連的血管和組織(注意勿損傷靜脈竇及兩心房),摘下心臟。用任氏液反復(fù)沖洗插管內(nèi)的液體至清澈為止。將離體蛙心聯(lián)結(jié)記錄儀器。進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。10/17/20236、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1)描記正常心跳曲線(2)鈣離子的影響。(3)鉀離子的影響。(4)腎上腺素。(5)乙酰膽堿。仿實(shí)驗(yàn)結(jié)果描記曲線10/17/2023注意事項(xiàng)1.結(jié)扎靜脈及固定插管時(shí)一定避開靜脈竇,否則心臟停止跳動(dòng)。2.固定換能器時(shí)應(yīng)稍向下傾斜,以免自心臟滴下的水流入換能器內(nèi)造成短路。3.滴加藥物勿混用滴加試劑的滴管;加試劑應(yīng)由少到多,作用不明顯再補(bǔ)加;加后立即用滴管攪勻,使之迅速發(fā)揮作用;出現(xiàn)明顯效應(yīng)后,應(yīng)立即吸出全部灌流液,并以新鮮任氏液換洗,直至恢復(fù)正常。4.隨時(shí)滴加任氏液于心臟表面,使之保持濕潤(rùn)狀態(tài)。5.保證記錄連續(xù),及時(shí)在曲線上加以標(biāo)記,分析各現(xiàn)象產(chǎn)生原因.10/17/2023思考題1、分析有的蛙心標(biāo)本插管內(nèi)液面升降不明顯的原因并提出相應(yīng)的對(duì)策。2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中套管內(nèi)液面為什么每次都應(yīng)保持一定的高度?3、高Ca2+任氏液與腎上腺素引起的心臟活動(dòng)變化有何不同?為什么?10/17/2023神經(jīng)動(dòng)作電位、
肌電和肌張力同步記錄請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作!??!返回目錄10/17/2023目的要求掌握神經(jīng)干動(dòng)作電位、肌肉動(dòng)作電位、肌張力同步記錄方法;理解動(dòng)作電位的產(chǎn)生、傳導(dǎo)、傳遞及興奮收縮偶聯(lián)的過(guò)程;理解強(qiáng)直收縮時(shí)動(dòng)作電位的形態(tài)。10/17/2023基本原理神經(jīng)、肌肉興奮的不應(yīng)期較短,可以發(fā)生較高頻率的興奮,使骨骼肌的收縮發(fā)生疊加。閾強(qiáng)度與頂強(qiáng)度的概念。10/17/2023儀器材料蟾蜍。蛙板、蛙類手術(shù)器械、RM6240生理信號(hào)采集系統(tǒng)、張力換能器、任氏液、長(zhǎng)滴管、鐵架臺(tái)等。10/17/2023方法步驟1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備(1)制備坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本(2)連接儀器將標(biāo)本的股骨固定在屏蔽盒的股骨固定孔內(nèi),腓腸肌跟腱的結(jié)扎線與張力換能器的彈簧片連接,坐骨神經(jīng)干置于屏蔽盒中的刺激電極和黃金引導(dǎo)電極上。針式引導(dǎo)電極斜插入腓腸肌,但不要太深。張力換能器接計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集系統(tǒng)(RM6240B信號(hào)采集處理系統(tǒng))1通道,神經(jīng)干動(dòng)作電位引導(dǎo)(黃金)電極接3通道,骨骼肌肌膜電位引導(dǎo)電極接2通道。屏蔽盒上的刺激電極和系統(tǒng)的刺激輸出相連。接地電極可以接在屏蔽盒或鐵架臺(tái)上。調(diào)節(jié)張力換能器高低,使肌肉長(zhǎng)度約為原長(zhǎng)度的1.2倍,開始試驗(yàn)。10/17/20232、實(shí)驗(yàn)操作(1)打開操作系統(tǒng)(2)一通道改為“張力”,(3)二通道調(diào)靈敏度2.5mV(測(cè)神經(jīng)干AP)(4)三通道調(diào)靈敏度1.0-2.5mV(測(cè)肌AP)(5)關(guān)閉四通道。(6)調(diào)出刺激器對(duì)話框(7)選擇刺激模式:強(qiáng)度遞增刺激,強(qiáng)度改為0.0110/17/2023(8)點(diǎn)擊開始記錄,并施加刺激,觀察閾強(qiáng)度與頂強(qiáng)度;(9)重新選擇刺激模式:頻率遞增刺激,觀察并記錄融合頻率。(10)保存文件,分析結(jié)果:神經(jīng)干AP與肌電AP有無(wú)間隔?肌電AP與肌張力的出現(xiàn)有無(wú)間隔?10/17/2023注意事項(xiàng)制備標(biāo)本時(shí)務(wù)必保證神經(jīng)的生理完整性。保留的脊椎骨盡量小。記錄下蟾蜍的體重,閾強(qiáng)度與頂強(qiáng)度、融合頻率的數(shù)值。10/17/2023思考題分析由刺激引起骨骼肌收縮的生理過(guò)程,那個(gè)階段耗時(shí)最長(zhǎng)?骨骼肌強(qiáng)直收縮時(shí),AP融合了嗎?10/17/2023紅細(xì)胞的凝集與ABO血型鑒定請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求觀察紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象。學(xué)習(xí)血型鑒定的基本原理,掌握利用標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行人類ABO血型鑒定的方法。10/17/2023基本原理血型是根據(jù)紅細(xì)胞細(xì)胞膜上抗原(凝集原)的種類而將血液分成的類型。紅細(xì)胞膜上只含有A型凝集原、血清中含有抗B凝集素的為A型血,紅細(xì)胞膜上只有B型凝集原、血清中只有抗A凝集素的為B型血,紅細(xì)胞膜上具有AB兩種凝集原、血清中沒有凝集素的為AB型血,紅細(xì)胞膜上沒有AB凝集原、血清中具有抗A和抗B兩種凝集素的為O型血。當(dāng)相應(yīng)的凝集原、凝集素相互作用時(shí),就產(chǎn)生紅細(xì)胞的凝集??梢来擞脴?biāo)準(zhǔn)血清判定被測(cè)定人紅細(xì)胞上凝集原的類型,即血型。10/17/2023儀器材料人。雙凹載玻片、一次性采血針、牙簽、酒精棉球、干棉球、標(biāo)準(zhǔn)血清
10/17/2023方法步驟1、取一干燥清潔雙凹載玻片,在左、右上角標(biāo)好“A”、“B”字樣,分別滴入抗A(即B型)、抗B(即A型)標(biāo)準(zhǔn)血清1滴。2、人指尖或耳垂消毒,待酒精揮發(fā)后用采血針采血。擠出第一滴血用干棉球擦去。再擠出一滴血液,用牙簽刮下,與標(biāo)準(zhǔn)血清混合均勻;再擠出一滴血,用牙簽另一端刮下,與另一側(cè)的標(biāo)準(zhǔn)抗血清混合均勻,室溫下靜置幾分鐘,觀察。10/17/20233、觀察判定:如有凝集反應(yīng)可見到紅色點(diǎn)狀或小片狀凝集塊浮起,紅細(xì)胞聚集成團(tuán),雖經(jīng)振蕩或輕輕攪動(dòng)亦不散開,為“凝集”;紅細(xì)胞散在均勻分布或雖似成團(tuán),一經(jīng)振蕩即散開,則為未凝集或“假凝集”。必要時(shí)可在顯微鏡下觀察。按下圖判定血型。10/17/202310/17/2023A型標(biāo)準(zhǔn)血清(含抗B凝集素)B型標(biāo)準(zhǔn)血清(含抗A凝集素)10/17/2023注意事項(xiàng)1、所用雙凹玻片實(shí)驗(yàn)前必須清洗干凈,以免出現(xiàn)假凝集現(xiàn)象。
2、采血針一定要專人專用。3、牙簽兩端不可混用。10/17/2023思考題如果沒有標(biāo)準(zhǔn)血清,僅知道1人的血型為A型或B型,請(qǐng)你設(shè)計(jì)無(wú)標(biāo)準(zhǔn)血清情況下測(cè)知全班同學(xué)血型的實(shí)驗(yàn)方案。10/17/2023動(dòng)脈血壓的間接測(cè)定請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真學(xué)習(xí)本課件然后開始實(shí)驗(yàn)操作?。?!返回目錄10/17/2023目的要求1、學(xué)習(xí)并掌握人體間接測(cè)壓法的原理和方法。2、觀察在正常情況下,某些因素對(duì)動(dòng)脈血壓的影響。10/17/2023基本原理外加壓力使血管變窄形成血液渦流時(shí),則可發(fā)生聲音.當(dāng)外加壓力超過(guò)動(dòng)脈收縮壓時(shí),動(dòng)脈血流完全被阻斷.此時(shí)聽不到聲音,當(dāng)外加壓力等于或稍低于動(dòng)脈內(nèi)的收縮壓時(shí)而高于舒張壓時(shí),則在心臟收縮時(shí),動(dòng)脈內(nèi)有少量血流通過(guò),而心室舒張時(shí)而無(wú)血流通過(guò).血流連續(xù)通過(guò)血管時(shí),會(huì)發(fā)出聲音.故恰好可以完全阻斷血流的最小外加壓力相當(dāng)于收縮壓。當(dāng)外加壓的等于或小于舒張壓時(shí)沒,血管內(nèi)血流連續(xù)通過(guò),所發(fā)出的音調(diào)會(huì)突然降低或聲音消失.在心室舒張時(shí)有少許血液通過(guò)的最大管外壓力相當(dāng)于舒張壓.
10/17/2023打氣球螺絲壓脈帶胸具壓脈帶壓脈帶10/17/2023儀器材料血壓計(jì)、聽診器10/17/2023方法步驟1、正常血壓的測(cè)定(1)松開打氣球上的螺絲,將壓脈帶內(nèi)的空氣放出,再將螺絲扭緊。(2)受試者脫左臂衣袖,靜坐。肘臂伸直,掌心向上,平放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。(3)將壓脈帶裹于左上臂,其下緣在臂彎上2-3cm處,松緊適宜(松緊以能放入一指為宜),位置與心臟同一水平。(4)在肘窩部找到肱動(dòng)脈搏動(dòng)處,將聽診器的胸具置于其上。注意:不可用力下壓。10/17/2023(5)用聽診器聽取血管音變化。右手持打氣球,向壓脈帶打氣加壓到血壓計(jì)200mmHg處。然后扭開打氣球螺絲,緩慢放氣(切勿過(guò)快)。此時(shí)可聽到血管音的一系列變化,聲音從無(wú)聲——有聲(收縮壓)——無(wú)聲(舒張壓)。(6)扭緊打氣球螺絲再打氣加壓,反復(fù)聽取聲音變化2~3次。算出血壓平均值。10/17/20232、運(yùn)動(dòng)對(duì)血壓的影響
受試者作原地蹲起運(yùn)動(dòng),1min內(nèi)完成30次,共做2min。運(yùn)動(dòng)后立即坐下,30s測(cè)量血壓一次,直至血壓恢復(fù)正常。10/17/2023注意事項(xiàng)1、保持室內(nèi)安靜,以利聽診。2、在聽診過(guò)程中,充氣或放氣不宜過(guò)快或過(guò)慢。3、戴聽診器時(shí),務(wù)使耳具的彎曲方向與外耳道一致,即接耳的彎曲端向前。4、重復(fù)測(cè)壓時(shí),須將壓脈帶內(nèi)空氣放盡,使壓力降至零位,而后再加壓測(cè)量。測(cè)壓前囑受試者休息10分鐘。10/17/2023思考題1、心動(dòng)周期中血管的平均壓與舒張壓和收縮壓的關(guān)系。2、測(cè)定血壓時(shí)為什么要與心臟基本保持水平?3、高血壓與低血壓分別反映了心血管什么方面的問(wèn)題?10/17/2023紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
[目的]了解紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理并掌握其計(jì)數(shù)的方法。[原理]血細(xì)胞的計(jì)數(shù)是用適當(dāng)?shù)娜芤簩⒀合♂尯?,放入?jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi),在顯微鏡下記錄一定容積血液稀釋液中的血細(xì)胞個(gè)數(shù),再將所得結(jié)果換算成每升血液中的血細(xì)胞個(gè)數(shù)。返回目錄10/17/2023[材料及用具]計(jì)數(shù)器,顯微鏡,生理鹽水,蒸餾水,抗凝血,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,1.5毫升吸管,血紅蛋白(微量)采血管,試管。[方法及步驟]:1.首先檢查計(jì)數(shù)板及血紅蛋白(微量)采血管是否清潔,如有污垢,應(yīng)先洗滌干凈。然后將計(jì)數(shù)板放于低倍鏡(4倍)下,熟悉計(jì)數(shù)室的構(gòu)造。10/17/20232.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu):計(jì)數(shù)板是一塊長(zhǎng)方形厚玻璃板,每塊計(jì)數(shù)板由H型凹槽分為兩個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池。計(jì)數(shù)池平面比整個(gè)玻璃板的平面低0.1mm。╬╬計(jì)數(shù)池10/17/2023計(jì)數(shù)池的長(zhǎng)寬各3mm,被平均分為邊長(zhǎng)為1mm的9個(gè)大方格,稱為計(jì)數(shù)室。每個(gè)大方格面積為1mm2,體積為0.1mm3。中央的大方格由雙線劃分為25個(gè)中方格,每個(gè)中方格面積為0.04mm2,體積為0.004mm3。其中位于正中及四角的5個(gè)中方格是計(jì)數(shù)紅細(xì)胞的區(qū)域,每個(gè)中方格又各分成16個(gè)小方格。10/17/20233.稀釋:用微量采血管吸取20微升的血液,用干棉球擦去管外面的血液,再放入盛有4毫升生理鹽水的試管內(nèi),用上清液清洗管內(nèi)殘留血液,并混勻.4.充池(布血):將蓋玻片一邊與計(jì)數(shù)池縱線末端接觸,然后緩慢放下,使蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)室上,然后用滴管吸取稀釋血液,滴半滴于計(jì)數(shù)室與蓋玻片交界處,稀釋血液可自動(dòng)均勻地滲入計(jì)數(shù)室。放置1—2分鐘,待紅細(xì)胞下沉后,就可將計(jì)數(shù)室置于低倍鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。10/17/20235.計(jì)數(shù):計(jì)數(shù)時(shí)光線不必過(guò)強(qiáng),紅細(xì)胞在10倍鏡下計(jì)數(shù),記錄計(jì)數(shù)室四角及中間共五個(gè)中方格(共80個(gè)小方格)中所有的紅細(xì)胞數(shù)。計(jì)數(shù)視野的移動(dòng)路線見右圖。對(duì)于壓線的血細(xì)胞,按照數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右原則計(jì)數(shù)。如發(fā)現(xiàn)各中方格紅細(xì)胞數(shù)目相差20個(gè)以上,表明血細(xì)胞分布不均勻,必須把稀釋液搖勻后重新充池計(jì)數(shù)。6.紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法是,將5個(gè)中方格所得的紅細(xì)胞數(shù)乘以1010,即為要求的每一升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。10/17/20237.儀器洗滌
計(jì)數(shù)板、蓋玻片等用清水沖洗,立著晾干。
8.要求與思考題:
計(jì)算結(jié)果,報(bào)告中簡(jiǎn)要說(shuō)明計(jì)算過(guò)程求出本組同學(xué)測(cè)定的均值并評(píng)價(jià)之
9.注重事項(xiàng):
充液前應(yīng)充分混勻血細(xì)胞懸液,充液要連續(xù)、適量,充液后應(yīng)待血細(xì)胞下沉后再計(jì)數(shù);
計(jì)數(shù)板、蓋玻片、微量吸血管等用過(guò)后必須立即按要求洗滌干凈
10/17/2023目的要求利用沙里氏比色法測(cè)定動(dòng)物血紅蛋白的含量。血紅蛋白的測(cè)定返回目錄10/17/2023基本原理血液中的血紅蛋白在氧化劑(稀鹽酸)作用下,可轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定、棕色的高鐵血紅蛋白,其顏色與血紅蛋白(或高鐵血紅蛋白)的濃度成正比。與標(biāo)準(zhǔn)色進(jìn)行對(duì)比,可求出血紅蛋白的濃度,即每升血液中含血紅蛋白克數(shù)(g·L-1)。10/17/2023儀器材料沙里氏血紅蛋白計(jì)、血紅蛋白(微量)采血管、試管、培養(yǎng)皿、1%HCl、蒸餾水、乙醇、乙醚10/17/2023沙里氏血紅蛋白計(jì):標(biāo)準(zhǔn)褐色玻璃比色箱和1只方形刻度測(cè)
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