sTWEAK在子癇前期患者血清中的表達(dá)及其意義-

sTWEAK在子癇前期患者血清中的表達(dá)及其意義【摘要】目的:檢測子癇前期患者的外周血血清中sTWEAK的表達(dá)水平，并分析其臨床意義。方法：選取2017年5月至2019年3月在上海交通大學(xué)附屬新華醫(yī)院崇明分院產(chǎn)檢及入院分娩的輕度子癇前期、重度子癇前期及正常孕婦共90例，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）方法檢測外周血sTWEAK的表達(dá)水平。結(jié)果：與正常孕婦組相比，重度子癇前期組及輕度子癇前期組的體重指數(shù)明顯升高（P＜0.01），重度子癇前期組的糖化血紅蛋白明顯升高（P＜0.01）。與重度子癇前期組相比，輕度子癇前期組的糖化血紅蛋白明顯降低（P＜0.01）。重度子癇前期組、輕度子癇前期組及正常孕婦組的sTWEAK表達(dá)水平三組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。與血糖正常組相比，血糖異常組孕婦sTWEAK的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.01）。與BMI＜24組孕婦相比，BMI≥24組的孕婦sTWEAK的表達(dá)水平明顯降低（P＜0.01）。所有孕婦sTWEAK的表達(dá)水平與體重指數(shù)呈負(fù)相關(guān)性（rs=-0.339，P=0.001），與糖化血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)性（rs=-0.251，P=0.017）。結(jié)論：孕晚期sTWEAK的表達(dá)與子癇前期的發(fā)生及進(jìn)展相關(guān)，其表達(dá)水平可能對預(yù)測子癇前期患者是否存在糖尿病或超重等代謝異常具有一定的作用。【關(guān)鍵詞】子癇前期；sTWEAK；酶聯(lián)免疫吸附測定SerumsTWEAKExpressionandItsClinicalSignificanceinpreeclampsiaPatients[Abstract]Objective:Toexploretheexpressionlevelandclinicalimplicationsofserumsolubletumornecrosisfactor—likeweakinducerofapoptosis（sTWEAK）inpreeclampsiapatients.Methods:90patientsofmildpreeclampsia,severepreeclampsiaandnormalpregnantwomenwereselectedfromXinhuaHospitalChongmingBranch，SchoolofMedicine,ShanghaiJiaoTongUniversity.ThesepatientswereadmittedtothehospitalduringtheperiodfromMay2017toMarch2019.ThelevelsofserumsTWEAKweredetectedbyEnzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA).Results:Comparedtothenormalpregnantgroup,thebody

mass

index(BMI)oftheseverepreeclampsiagroupandthemildpreeclampsiagroupweresignificantlyincreased(P<0.01),andtheglycosylated

hemoglobin(HbA1c)intheseverepreeclampsiagroupweresignificantlyincreased(P<0.01).Comparedtotheseverepreeclampsiagroup,theHbA1cinthemildpreeclampsiagroupweresignificantlyreduced(P<0.01).sTWEAKexpressionlevelsofseverepreeclampsiagroup,mildpreeclampsiagroupandnormalpregnantwomengroupshowedstatisticallysignificantdifferences(P<0.01).Comparedtothenormalgroup,theexpressionlevelsofsTWEAKofpregnantwomeninthegroupwithabnormalbloodglucoseweresignificantlydecreased(P<0.01).ComparedtothegroupwithBMI<24,theexpressionlevelsofsTWEAKweresignificantlydecreasedinthegroupwithBMI≥24(P<0.01).Inallpregnantwomen,theexpressionlevelsofsTWEAKwerenegativelycorrelatedwithBMI(rs=-0.339,P=0.001)andHbA1c(rs=-0.251,P=0.017).Conclusion:TheexpressionofsTWEAKinlatepregnancyisrelatedtotheoccurrenceandprogressofpreeclampsia,anditsexpressionlevelmayplayacertainroleinpredictingwhetherpreeclampsiapatientshavediabetesmellitus,overweightorothermetabolicabnormalities.【Keywords】Preeclampsia；sTWEAK；Enzyme-linkedimmunosorbentassay懷孕前血壓正常的孕婦在妊娠20周以后出現(xiàn)高血壓、蛋白尿，稱子癇前期，為妊娠期特發(fā)疾病，發(fā)病率約占全部妊娠的3.9%，對母兒造成危害，甚至導(dǎo)致母兒死亡。其發(fā)病原因可能涉及母體、胎盤和胎兒等多種因素，我們查閱文獻(xiàn)后發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑（tumornecrosisfactor-likeweakinducerofapoptosis，TWEAK）蛋白水解產(chǎn)生可溶性TWEAK（sTWEAK）[1]，很多研究報道sTWEAK在心血管疾病，腎病，肝癌，卵巢癌等疾病中發(fā)揮作用，尤其是在肥胖和糖尿病患者中也有表達(dá)，而子癇前期患者易出現(xiàn)代謝異常及糖尿病，關(guān)于sTWEAK在子癇前期中的作用目前為止研究很少，故本課題擬研究子癇前期患者血清中sTWEAK的表達(dá)水平，并分析其與患者臨床資料的相關(guān)性，以探討體內(nèi)sTWEAK與子癇前期發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。一、對象與方法1．研究對象選取2017年5月-2019年3月在上海交通大學(xué)附屬新華醫(yī)院崇明分院產(chǎn)檢及入院分娩的30例輕度子癇前期患者、30例重度子癇前期患者，30例正常孕婦?；颊呷朐簳r收縮壓≥140mmHg和（或）舒張壓≥90mmHg，伴蛋白尿≥0.3g/24h,或隨機(jī)尿蛋白+，則入輕度子癇前期組?；颊呷朐簳r收縮壓≥160mmHg和（或）舒張壓≥110mmHg，或蛋白尿≥5g/24h,或隨機(jī)尿蛋白+++，或發(fā)生母體臟器功能不全或胎兒并發(fā)癥，則入重度子癇前期組。無產(chǎn)科合并癥或并發(fā)癥者入正常孕婦組。上述患者入院時孕28-41周，平均孕37周，于入院當(dāng)天或次日抽血備用。入選者均未使用藥物治療，臨床資料完整，試驗獲本人知情同意并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。2．方法研究對象空腹抽取肘正中靜脈血2mL，經(jīng)高速離心分離后取血清置于-80℃凍存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附試驗（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）方法檢測外周血sTWEAK的表達(dá)水平，同時檢測患者的血小板及糖化血紅蛋白水平。ELISA試劑盒購自上海通蔚實業(yè)有限公司，操作方法參照說明書。3.統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（EQ\O(x,ˉ)±s）表示，兩組比較采用Independent-samplesT檢驗，多組比較采用One-WayANOVA，相關(guān)性檢驗采用Pearson相關(guān)分析，以P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。二、結(jié)果1．三組產(chǎn)婦臨床資料分析體重指數(shù)（BodyMassIndex，BMI）：與正常孕婦組相比，重度子癇前期組及輕度子癇前期組的體重指數(shù)明顯升高，P＜0.01。糖化血紅蛋白：與正常孕婦組相比，重度子癇前期組的糖化血紅蛋白明顯升高，P＜0.01。與重度子癇前期組相比，輕度子癇前期組糖化血紅蛋白明顯降低，P＜0.01。新生兒出生體重：與正常孕婦組相比，重度子癇前期組的新生兒出生體重明顯減少，P＜0.01。與重度子癇前期組相比，輕度子癇前期組新生兒出生體重明顯增加，P＜0.01。分娩孕周：與正常孕婦組相比，重度子癇前期組及輕度子癇前期組的分娩孕周明顯提前，P＜0.01。與重度子癇前期組相比，輕度子癇前期組分娩孕周明顯推后，P＜0.05。余各組資料兩兩比較均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。表1三組孕婦臨床資料分析指標(biāo)重度子癇前期組（n=30）輕度子癇前期組（n=30）正常孕婦組（n=30）年齡（歲）29.17±3.9628.53±4.7328.67±4.92身高(cm)159.83±4.73161.0±4.98160.93±6.02體重指數(shù)23.85±3.9**23.83±2.96**21.04±2.14血小板（*10=9\*Arabic9/L）194.63±68.52210.27±55.84216.10±55.15糖化血紅蛋白5.21±0.58**4.83±0.32##4.81±0.32出生體重（g）2789.3±655.7**3301.7±515.53##3515.0±387.78分娩孕周（周）37.06±2.28**38.37±2.49**#39.93±1.27備注：*與正常孕婦組相比，P<0.05，**與正常孕婦組相比，P<0.01。#與重度子癇前期組相比，P<0.05，##與重度子癇前期組相比，P<0.01。2.三組患者的血清sTWEAK表達(dá)水平與正常孕婦組相比，重度子癇前期組及輕度子癇前期組的sTWEAK表達(dá)水平明顯降低，P<0.01。與重度子癇前期組相比，輕度子癇前期組的sTWEAK水平明顯升高，P<0.01。見表2。表2各組孕婦sTWEAK表達(dá)水平的比較組別nsTWEAK水平（pg/mL）重度子癇前期組30274.52±77.03**輕度子癇前期組30335.39±73.1**##正常孕婦組30526.21±67.52備注：*與正常孕婦組相比，P<0.05，**與正常孕婦組相比，P<0.01。##與重度子癇前期組相比，P<0.01。3.血糖正常組與血糖異常組sTWEAK的表達(dá)情況所有孕婦孕24-28周及以后行75g葡萄糖耐量試驗，空腹及服糖后1、2小時血糖分別為5.1mmol/L、10.0mmol/L、8.5mmol/L，任何一點(diǎn)血糖值達(dá)到或超過上述標(biāo)準(zhǔn)，或妊娠前已確診糖尿病，或首次產(chǎn)檢空腹血糖≥7.0mmol/L，則入血糖異常組，其余則入血糖正常組。與血糖正常組相比，血糖異常組孕婦sTWEAK的表達(dá)水平明顯降低，P<0.01。見表3表3血糖正常孕婦與血糖異常孕婦sTWEAK的表達(dá)水平：組別nsTWEAK水平（pg/mL）血糖異常組21245.38±71.80**血糖正常組69419.28±115.30備注：**與血糖正常組相比，P<0.01。4．BMI≥24組與BMI＜24組sTWEAK的表達(dá)情況所有孕婦若建卡時體重指數(shù)≥24，則入BMI≥24組，建卡時體重指數(shù)＜24，則入BMI＜24組。與BMI＜24組孕婦相比，BMI≥24組的孕婦sTWEAK的表達(dá)水平明顯降低，P<0.01。表4BMI≥24組與BMI＜24組sTWEAK表達(dá)水平：組別nsTWEAK水平（pg/mL）BMI≥24組35319.55±87.95**BMI＜24組55416.36±138.14備注：**與BMI＜24組相比，P<0.01。5．sTWEAK與體重指數(shù)及糖化血紅蛋白的相關(guān)性分析所有孕婦sTWEAK的表達(dá)水平與體重指數(shù)呈負(fù)相關(guān)性（rs=-0.339，P=0.001），與糖化血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)性（rs=-0.251，P=0.017）。三、討論最近在子癇前期管理方面的研究進(jìn)展提高了安全妊娠的水平，并且在一定程度上降低了該病的發(fā)病率和死亡率，但是，目前為止仍然缺少有效預(yù)測子癇前期發(fā)病嚴(yán)重程度的方法。近期雖有文獻(xiàn)提示sTWEAK與子癇前期的發(fā)病有關(guān)，但是相關(guān)報道總體較少。ShahidS[2]等通過檢測了63例高危孕婦孕12周時的sTWEAK水平，發(fā)現(xiàn)以后發(fā)生子癇前期的sTWEAK表達(dá)水平比正常妊娠婦女降低，由此推斷sTWEAK可以作為子癇前期的獨(dú)立預(yù)測因子。而本研究檢測孕周平均為37周，通過孕晚期所測sTWEAK水平分析發(fā)現(xiàn)子癇前期患者的sTWEAK水平比正常對照組明顯下降，且隨著子癇前期的嚴(yán)重程度，sTWEAK的表達(dá)水平也有明顯下降，表明sTWEAK不僅與子癇前期的發(fā)生具有一定相關(guān)性，而且與子癇前期病情嚴(yán)重程度有關(guān)。目前認(rèn)為子癇前期是由于胎盤血流灌注下降，進(jìn)而引起以全身小血管痙攣、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及功能障礙為特征的病理改變。Dai等[3]研究發(fā)現(xiàn)TWEAK能上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的表達(dá)。Jakubowski[4]等人在體內(nèi)證明了sTWEAK在血管生成中的調(diào)節(jié)作用及其與血管內(nèi)皮生長因子的關(guān)系。DonohuePJ[5]等研究認(rèn)為TWEAK是一種內(nèi)皮細(xì)胞生長因子和遷移因子，能增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞成纖維細(xì)胞生長因子和VEGF-A的絲裂原活性，因此，通過與VEGF-A或者成纖維細(xì)胞生長因子協(xié)同作用，TWEAK可能可以調(diào)控病理血管生成。Yilmaz等在兩項研究中發(fā)現(xiàn)慢性腎病患者sTWEAK與內(nèi)皮功能障礙之間存在很強(qiáng)的相關(guān)性[6,7]。近年來研究顯示，炎癥與子癇前期密切相關(guān)，在子癇前期的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用，子癇前期是母體對妊娠的一種過度性炎癥反應(yīng)，血管內(nèi)皮功能障礙是這種反應(yīng)在子癇前期的主要表現(xiàn)。很多研究表明TWEAK與成纖維細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白14結(jié)合后可以促進(jìn)各種炎癥介質(zhì)的表達(dá)。Izquierdo[8]等實驗證實，TWEAK通過在腎小管上皮細(xì)胞上調(diào)表達(dá)趨化因子CXCL16來促進(jìn)腎小管間質(zhì)炎癥。因此，sTWEAK可能通過介導(dǎo)某些炎癥因子的表達(dá)，導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，或是否通過調(diào)控病理血管的生成在子癇前期的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用?？蛇M(jìn)一步檢測血管內(nèi)皮生長因子及其他炎癥因子的表達(dá)水平，來研究其與sTWEAK在子癇前期的發(fā)生及發(fā)展進(jìn)程中的作用機(jī)制。FernandezAlba[9]等研究發(fā)現(xiàn)體重指數(shù)的增加與子癇前期和妊娠高血壓的發(fā)病風(fēng)險之間存在很強(qiáng)的直接相關(guān)性。本研究結(jié)果與之相符，我們發(fā)現(xiàn)重度和輕度子癇前期組的體重指數(shù)均比正常孕婦組升高，且重度子癇前期組的糖化血紅蛋白顯著高于輕度子癇前期組和正常孕婦組，提示子癇前期，尤其是重度子癇前期孕婦存在代謝異常。在非孕狀態(tài)下，已有研究發(fā)現(xiàn)TWEAK與糖脂代謝異常有關(guān)。如TillerG[10]等研究表明，在不影響脂肪組織的中心代謝通路或促炎細(xì)胞因子分泌的情況下，TWEAK和相應(yīng)的激動抗體有可能阻止脂肪組織的生長。BennettG[11]等通過建立誘導(dǎo)脂肪細(xì)胞凋亡的轉(zhuǎn)基因小鼠模型，研究TWEAK在小鼠病理脂肪組織重塑及肥胖并發(fā)癥中的作用，發(fā)現(xiàn)TWEAK可抑制健康的脂肪組織擴(kuò)張，并促進(jìn)嚴(yán)重肥胖的代謝并發(fā)癥。Díaz-LópezA[12]等研究發(fā)現(xiàn)sTWEAK在終末期腎病和2型糖尿病患者中的濃度降低。Simón-MuelaI[13]等對71例糖耐量正常婦女和66例妊娠期糖尿病婦女進(jìn)行了研究發(fā)現(xiàn)，與健康孕婦相比，妊娠期糖尿病患者sTWEAK濃度較低，且sTWEAK濃度低與胰島素抵抗有關(guān)，sTWEAK低表達(dá)可能與妊娠期糖尿病的發(fā)生相關(guān)。我們的研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)入組的孕婦中sTWEAK的表達(dá)水平與體重指數(shù)及糖化血紅蛋白均呈負(fù)相關(guān)，且血糖異常組的孕婦sTWEAK表達(dá)水平顯著低于血糖正常組孕婦，BMI≥24的孕婦sTWEAK表達(dá)水平顯著低于BMI＜24的孕婦，說明sTWEAK在一定程度上可以反映子癇前期患者是否存在糖尿病或超重等代謝異常情況。綜上所述，孕晚期sTWEAK的表達(dá)與子癇前期的發(fā)生及進(jìn)展相關(guān)，其表達(dá)水平可能對預(yù)測子癇前期患者是否存在糖尿病或超重等代謝異常具有一定的作用。參考文獻(xiàn)：[1]HassanSB，El-demeryAB，AhmedAI，etal.SolubleTWEAKandcardiovascularmorbidityandmortalityinchronickidneydiseasepatients.ArabJNephrolTransplant，2012，5（1）：27-32.[2]ShahidS,KhalidE,FatimaSS,etal.EvaluationofsolubleTNF-likeweakinducerofapoptosis(sTWEAK)levelstopredictpreeclampsiainearlyweeksofpregnancy.\o"Europeanjournalofobstetrics,gynecology,andreproductivebiology."EurJObstetGynecolReprodBiol.2019，234:165-170.[3]DaiL,GuL,DingC,QiuL,DiW:TWEAKpromotesovariancancercellmetastasisviaNF-kappaBpathwayactivationandVEGFexpression.CancerLett2009,283(2):159-167.[4]JakubowskiA,

AmbroseC,

ParrM,etal.TWEAKinducesliverprogenitorcellproliferation.\o"TheJournalofclinicalinvestigation."JClinInvest.

2005，115(9):2330-40.[5]DonohuePJ,

RichardsCM,

BrownSA,

etal.TWEAKisanendothelialcellgrowthandchemotacticfactorthatalsopotentiatesFGF-2andVEGF-Amitogenicactivity.\o"Arteriosclerosis,thrombosis,andvascularbiology."ArteriosclerThrombVascBiol.

2003，23(4):594-600.[6]YilmazMI,

CarreroJJ,

OrtizA,

etal.SolubleTWEAKplasmalevelsasanovelbiomarkerofendothelialfunctioninpatientswithchronickidneydisease.\o"ClinicaljournaloftheAmericanSocietyofNephrology:CJASN."ClinJAmSocNephrol.

2009，4(11):1716-23.[7]YilmazMI,

SonmezA,

OrtizA,

etal.SolubleTWEAKandPTX3innondialysisCKDpatients:impactonendothelialdysfunctionandcardiovascularoutcomes.\o"ClinicaljournaloftheAmericanSocietyofNephrology:CJASN."ClinJAmSocNephrol.

2011，6(4):785-92.[8]IzquierdoMC，SanzAB，MezzanoS，etal.TWEAK(tumornecrosisfactor-likeweakinducerofapoptosis)activatesCXCL16expressionduringrenaltubulointerstitialinflammation.KidneyInt,2012,81(11):1098-1107.[9]FernándezAlbaJJ,

MesaPáezC,

VilarSánchezá,,etal.Overweightandobesityatriskfactorsforhypertensivestatesofpregnancy:aretrospectivecohortstudy.

\o"Nutricionhospitalaria."NutrHosp.2018Aug2;35