不同藥物干預(yù)對大鼠骨量指標(biāo)的影響

不同藥物干預(yù)對大鼠骨量指標(biāo)的影響

0蛋白質(zhì)松茸動物模型的力學(xué)性質(zhì)核電站骨質(zhì)疏松癥與年齡有關(guān)，尤其是更年期后的女性。由于卵巢功能的衰退、雌激素的分泌減少、骨組織微觀結(jié)構(gòu)的變化、骨脆弱性的增加，以及骨折的易骨折。更年期后，骨質(zhì)疏松癥以其嚴(yán)重的發(fā)病率和嚴(yán)重的有害影響而成為威脅中小學(xué)生和老年人健康的主要殺手。研究其發(fā)病機(jī)制,尋找有效的防治方法,降低骨質(zhì)疏松的發(fā)病率是一個有待解決的問題。關(guān)于骨質(zhì)疏松的預(yù)防和治療,國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量的研究。國內(nèi)外的學(xué)者對骨質(zhì)疏松動物模型骨的力學(xué)性質(zhì)也做了大量的研究[11,12,13,14,15,16,17,18,19,20]。以往的研究多為研究人的尸體和骨質(zhì)疏松動物模型骨或以單一藥物治療動物骨質(zhì)疏松模型骨的力學(xué)性能、多以三點彎曲力學(xué)實驗居多。以去卵巢法復(fù)制骨質(zhì)疏松動物模型以多種藥物治療骨的剪切力學(xué)性質(zhì)研究極少報道。在骨質(zhì)疏松的研究中,體內(nèi)動物實驗被廣泛使用,評價骨質(zhì)疏松新藥的有效性必須進(jìn)行體內(nèi)動物實驗。通過觀察藥物對病理、實驗動物的生理功能、生化指標(biāo)及骨組織形態(tài)方面的影響,以判斷藥物對動物疾病的治療效果。體內(nèi)動物實驗是對臨床研究的補充,當(dāng)藥物主要作用是減少骨質(zhì)疏松的脆性骨折傾向時,就難以用人體實驗考察藥物的作用效果,而通過動物試驗的生物力學(xué)分析則能對藥物進(jìn)行評價。建立一個理想的骨質(zhì)疏松模型是研究骨質(zhì)疏松的基礎(chǔ),對于絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松動物模型的復(fù)制,大鼠卵巢摘除以后骨代謝活躍,松質(zhì)骨出現(xiàn)明顯的骨失,骨強(qiáng)度下降,這些松質(zhì)骨的骨丟失是伴隨骨轉(zhuǎn)換而進(jìn)行的,這種特性較好的模仿了絕經(jīng)時高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松發(fā)生骨性失狀態(tài),同時手術(shù)后雌性大鼠在骨質(zhì)疏松性骨折和骨量減少部位上也表現(xiàn)出與人類很大相似性。作者以去卵巢法復(fù)制骨質(zhì)疏松動物模型,對骨質(zhì)疏松動物模型大鼠分別以中藥、西藥、鈣劑進(jìn)行治療。搞清楚骨質(zhì)疏松動物模型骨和治療組骨的力學(xué)性能,可為藥物治療效果提高依據(jù)。1阿侖膦酸鈉保濕活性測定設(shè)計:隨機(jī)對照動物實驗。實驗方法:動物分組與模型制作:將60只大鼠,分別設(shè)為正常對照組10只,其余50只去除雙側(cè)卵巢法復(fù)制骨質(zhì)疏松動物模型,再隨機(jī)分為5組:模型組、復(fù)方中藥組、阿侖膦酸鈉組、維生素K組、鈣劑組,每組10只,組間體質(zhì)量差異無顯著性意義(P>0.05)。所有動物自由攝食、飲水。模型組不用藥,復(fù)方中藥組動物每日給服中藥0.9g/kg、阿侖膦酸鈉組動物每日給服阿侖膦酸鈉1mg/kg、維生素K組動物每日給服維生素K0.1mg/kg、鈣劑治療組動物每日給服逸得樂2mg/kg。各組大鼠飼養(yǎng)15周后以腹主動脈放血法處死大鼠,取大鼠左、右側(cè)股骨用以生理鹽水浸濕的沙布包裹試樣,貯于-20℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩嶒炦^程:試樣存放3d后,取出試樣,在常溫下解凍后,以讀數(shù)顯微鏡測量各組試樣的長度和直徑,試樣長32.2-32.6mm,直徑2.72-2.76mm。分別將每個試樣兩端置于外徑為10mm、內(nèi)徑為6mm、深為5mm的模具內(nèi),向模具內(nèi)填充稀釋的牙托粉和快干膠;固化后待用。大鼠股骨為生物黏彈性材料,所以實驗前必須對試樣進(jìn)行預(yù)調(diào)處理,本實驗按參考文獻(xiàn)[11-20]的方法對每個試樣預(yù)調(diào)處理后進(jìn)行實驗。分別將每個試樣置于剪切實驗夾具內(nèi),之后置于試驗機(jī)的工作臺上,以5mm/min的實驗速度對試驗施加剪切力,直至試樣破壞。為使試樣保濕實驗過程中不斷的向試樣淋液。實驗結(jié)束后打印機(jī)自動打印出每個試樣的剪切力和剪應(yīng)力。主要觀察指標(biāo):每個試樣的剪切力和剪應(yīng)力,每個試樣的斷口形貌。統(tǒng)計學(xué)分析:由第一作者采用SPSS11.0軟件完成統(tǒng)計處理,計量資料以表示,采用完全隨機(jī)分組單因素方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,組間比較采用t檢驗,P<0.05為差異有顯著性意義。2結(jié)果2.1對實驗動物的數(shù)量進(jìn)行分析。試驗中選擇了60只大鼠，它們被分為6組。沒有釋放。結(jié)果的分析將進(jìn)行中2.2各組大鼠切割實驗的所有圖像剪切試樣破壞后分別對各組試樣破壞斷口進(jìn)行大體觀察發(fā)現(xiàn),72%為橫斷口,28%為斜斷口。2.3模型組大載荷配對t檢驗表1可見,模型組最大載荷與復(fù)方中藥組最大載荷配對t檢驗,差異有顯著性意義(P=0.019),模型組最大應(yīng)力與復(fù)方中藥組最大應(yīng)力配對t檢驗,差異有顯著性意義(P=0.017)。模型組最大載荷與阿侖膦酸鈉組最大載荷配對t檢驗,差異有顯著性意義(P=0.021),模型組最大應(yīng)力與阿侖膦酸鈉組最大應(yīng)力配對t檢驗,差異有顯著性意義(P=0.019)。模型組最大載荷與生素K組最大載荷配對t檢驗,差異有顯著性意義(P=0.027),模型組最大應(yīng)力與維生素K組最大應(yīng)力配對t檢驗,差異有顯著性意義(P=0.029)。模型組最大載荷與鈣劑組最大載荷配對t檢驗,差異無顯著性意義(P=0.056),模型組最大應(yīng)力與鈣劑組最大應(yīng)力配對t檢驗,差異無顯著性意義(P=0.057)。正常對照組與復(fù)方中藥組最大載荷配對t檢驗,差異無顯著性意義(P=0.058),正常對照組與復(fù)方中藥組最大應(yīng)力配對t檢驗,差異無顯著性意義(P=0.055)。3關(guān)于水分植物、特殊藥物與骨疏康制劑的聯(lián)合應(yīng)用研究試樣破壞后大體觀察每個式樣的斷口形貌,各組式樣破壞斷口橫斷口居多,少數(shù)為斜斷口。原發(fā)性骨質(zhì)疏松是以骨量減少,骨的微觀結(jié)構(gòu)退化為特征的使骨脆性增加的易發(fā)生骨折的一種全身性疾病。近年來的研究表明,骨質(zhì)疏松直接影響骨的生物力學(xué)性能,使骨的強(qiáng)度下降。本實驗支持參考文獻(xiàn)的觀點。提示,骨質(zhì)疏松動物模型骨剪切強(qiáng)度下降,復(fù)方中藥組、阿侖膦酸鈉組、維生素K組,通過治療剪切力學(xué)強(qiáng)度有一定的提高,尤其是復(fù)方中藥組效果最好。鈣劑組治療組剪切力學(xué)強(qiáng)度沒有提高。關(guān)于中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松學(xué)者們進(jìn)行大量的研究。周丕琪報道了對密骨片治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的臨床研究。壽折星等報道了健骨顆粒治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥臨床研究。宋獻(xiàn)文報道了補腎中藥治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的臨床研究。陳健平等報道了骨疏康口服液治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥療效觀察。梁克玉等報道了中藥增骨湯序貫療法治療絕經(jīng)骨質(zhì)疏松癥。大量的研究表明中醫(yī)藥對治療骨質(zhì)疏松收到了較好的效果。以往的研究多以一種藥物治療骨質(zhì)疏松動物模型,本實驗以多種藥物干預(yù)骨質(zhì)疏松動物模型,進(jìn)行生物力學(xué)實驗更具有臨床意義?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》曰:“腎藏精、主骨、生髓”,“腎者主蟄,封藏之本,精之處也。”“腎氣熱,則腰脊不舉,骨枯而髓減,發(fā)為骨痿?！比裟I氣虧虛無以填精生髓,骨骼失養(yǎng),則骨骼脆弱無力,致骨質(zhì)疏松癥發(fā)生,中藥治療骨質(zhì)疏松可能是通過抑制破骨細(xì)胞的活性或直接促進(jìn)成骨細(xì)胞的增值分化,使骨活動增強(qiáng);調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣的代謝及微量元素的含量,維持骨鈣-血鈣的平衡;提高機(jī)體內(nèi)雌激素受體數(shù)量及敏感性,改善內(nèi)分泌失調(diào)狀況等途徑。藥理研究證明,補腎藥除具有補腎、強(qiáng)骨、壯骨、止痛的功效以外還具有抑制骨吸收和促進(jìn)骨形成的雙重作用。本實驗骨質(zhì)疏松的中藥配方主要是以補腎為主,其中有多種微量元素,對鈣磷代謝和骨礦鹽沉積,對骨膠原合成,對骨膠原纖維和彈性纖維的恢復(fù)和功能重建發(fā)揮著重要的作用,從而提高了骨的強(qiáng)度和韌性等。雙膦酸鹽類藥物治療骨質(zhì)疏松,歐美國家的科學(xué)家對該藥物防治骨質(zhì)疏松的作用做了較為系統(tǒng)的研究,該藥物已成為目前用以防治破骨細(xì)胞吸收為主的各種代謝性骨病及較高轉(zhuǎn)化型(以骨吸收為主)骨質(zhì)疏松的主要藥物之一。以往使用雙膦酸鹽類藥物治療時,曾發(fā)現(xiàn)有骨軟化癥的發(fā)生。因為長期服用藥是否會由于過度抑制骨吸收而影響骨轉(zhuǎn)化過程,降低骨質(zhì)量仍將是人們關(guān)注問題,有待與于長期觀察。在骨質(zhì)疏松的治療中,補鈣是一項必要的輔助措施,已報道雌激素治療中補鈣能使雌激素減半,補鈣聯(lián)合補維生素D能減低老年婦女四肢骨的骨折發(fā)生率。崔少千等對骨疏康沖劑與聯(lián)合應(yīng)用防治維甲酸所致大鼠骨質(zhì)疏松進(jìn)行了研究。觀察了模型組、骨疏康沖劑組,鈣劑防治組、骨疏康沖劑與鈣劑聯(lián)合應(yīng)用組大鼠骨的骨強(qiáng)度、組織形態(tài)、三點彎曲力學(xué)實驗最大載荷、最大應(yīng)力等指標(biāo),得出了單純補鈣并未改善股骨的力學(xué)性能等結(jié)論,骨疏康聯(lián)合鈣劑防治骨質(zhì)疏松有效地防止了骨丟失,使骨顯微結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常,骨生物力學(xué)性能顯著提高。Stevenson等認(rèn)為單純補鈣不能降低骨折的發(fā)生率。實驗結(jié)果支持參考文獻(xiàn)和文獻(xiàn)的觀點,單純補鈣不能有效防止骨丟失,補鈣對于骨質(zhì)疏松只是一個輔助措施,聯(lián)合應(yīng)用其他藥物可起到一定的作用。關(guān)于維生素K治療骨質(zhì)疏松,陶天遵等對維生素K對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松防治治進(jìn)行了研究,應(yīng)用維生素K2治療難愈性骨折,收到了良好的效果。白木正孝等研究表明,維生素K的治療作用有明顯的藥物劑量依賴性。維生素K的作用機(jī)制已經(jīng)明確,其確切的臨床效果仍有待進(jìn)一步探討。在眾多的醫(yī)藥預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松的臨床和動物實驗表明,中醫(yī)藥對預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松發(fā)揮