花鱸培育及促熟催產(chǎn)技術(shù)

花鱸培育及促熟催產(chǎn)技術(shù)

歷史記錄，又稱魚(yú)類和寨花，屬于科和花慈氏科。這是東亞特有的物種，只分布在中國(guó)、日本和朝鮮沿海地區(qū)。屬于幾乎淺水海岸的中下層經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。因其肉質(zhì)鮮美,頗受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài),是我國(guó)主要的名優(yōu)水產(chǎn)品之一。由于它適溫廣,是我國(guó)南北方皆可養(yǎng)殖的少數(shù)經(jīng)濟(jì)魚(yú)種之一;其適鹽性也強(qiáng),無(wú)論海淡水都可養(yǎng)殖。在我國(guó),近年養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大,養(yǎng)殖方式也開(kāi)始多樣化,于70年代初期的港養(yǎng)、池塘養(yǎng)殖,發(fā)展到現(xiàn)今海水網(wǎng)箱、工廠化等集約化養(yǎng)殖。國(guó)外花鱸養(yǎng)殖也呈上升趨勢(shì),日本、韓國(guó)的養(yǎng)殖均已達(dá)到一定的規(guī)模。由于花鱸具有巨大的養(yǎng)殖前景,完全依賴捕撈天然苗種來(lái)滿足生產(chǎn)的需求,已成為花鱸養(yǎng)殖業(yè)的瓶頸。規(guī)模化和穩(wěn)定的苗種生產(chǎn)供應(yīng),在我國(guó)已提到議事日程。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)該魚(yú)生物學(xué)及苗種培育已做過(guò)許多研究。但人工育苗技術(shù)尚不甚成熟。對(duì)目前普遍認(rèn)為黃渤海產(chǎn)花鱸這一生長(zhǎng)快、抗病力強(qiáng)的優(yōu)良種群,其系統(tǒng)的規(guī)?；斯し庇夹g(shù)的文獻(xiàn)卻鮮有報(bào)道。作者通過(guò)兩年多的花鱸親魚(yú)培育及人工繁殖的育苗生產(chǎn),培育出百萬(wàn)尾苗種,獲得了較好的結(jié)果。本文主要探討花鱸親魚(yú)的培育及催產(chǎn)等環(huán)節(jié)中的技術(shù)措施,以期為花鱸大規(guī)模人工育苗提供有關(guān)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和方法。1材料和方法1.1親魚(yú)的放養(yǎng)試驗(yàn)點(diǎn)選在威海市羊亭水產(chǎn)總公司育苗場(chǎng)。利用海捕的天然幼魚(yú)為原種,逐步篩選出部分體質(zhì)健壯,體型、色澤優(yōu)良,具有典型生物學(xué)特征的個(gè)體,在池塘或網(wǎng)箱中精心投喂,強(qiáng)化培育。根據(jù)其性腺發(fā)育規(guī)律,我們提出“冬保、春肥、夏育、秋繁”4個(gè)親魚(yú)培育環(huán)節(jié):冬保:冬季對(duì)即將產(chǎn)卵的親魚(yú),要加強(qiáng)保護(hù),避免受傷;對(duì)產(chǎn)過(guò)卵的親魚(yú)要加強(qiáng)護(hù)理,使其安全過(guò)冬。為此需保持水溫在6℃以上,并不定時(shí)投喂少量餌料,以增強(qiáng)體質(zhì)。春肥:越冬后的親魚(yú)體質(zhì)虛弱,隨著水溫的逐漸升高,應(yīng)不失時(shí)機(jī)地加強(qiáng)投喂,提高親魚(yú)的肥滿度。其投餌量一般為魚(yú)體重的5%～10%。夏育:夏天水溫高,親魚(yú)攝食量減少,而此時(shí)正是親魚(yú)性腺發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期,即由Ⅱ期向Ⅲ期的過(guò)度時(shí)期。此時(shí)的餌料供給以高蛋白、高脂肪的鮮活餌料為主,多吃多投、不吃不投,對(duì)活餌料可略有過(guò)剩。秋繁:進(jìn)入秋季,水溫開(kāi)始下降至16℃～18℃時(shí),正是親魚(yú)的繁殖季節(jié),除正常的生產(chǎn)管理外,要經(jīng)常觀察親魚(yú)的攝食情況及體型變化,隨時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行人工催產(chǎn)。在整個(gè)培育過(guò)程中,還要做好病害的防治工作。隔半月喂一次藥餌(連續(xù)5d)。定期潑灑漂白粉或在網(wǎng)箱中掛袋,以防止細(xì)菌性病害的發(fā)生;特別要注意核隱蟲(chóng)及淀粉卵甲藻的寄生,遇此情況,可淡水浸泡5～10min或10mg/L的硫酸銅及硫酸亞鐵合劑(5:2)藥浴10～15min,連續(xù)4～7d。1999年共培育出4～6齡的親魚(yú)50尾,全長(zhǎng)64～92cm,體重3.2～9.0kg。1999年10月24日開(kāi)始移至室內(nèi)水泥池待催產(chǎn)用。此時(shí)的水溫為16℃左右,pH值為7.8～8.3,每天早晚各換水一次,使其溶解氧保持在6mg/L以上,鹽度為28～31。1.2睪丸骨髓細(xì)胞微注射使用寧波市激素制品廠生產(chǎn)的注射用促黃體素釋放激素A3(促排卵素3號(hào),LHRH-A3)和注射用絨促性素(HCG)。當(dāng)親魚(yú)性腺發(fā)育至IV期中后時(shí),進(jìn)行多次背鰭基部肌肉注射(表1)。開(kāi)始雌魚(yú)每次注射劑量LHRH-A3為2～5μg/kg,每?jī)商煲淮?部分雌魚(yú)再添加HCG700～1500IU/kg混合注射。由于大多數(shù)雄魚(yú)已自行成熟,其注射激素次數(shù)是根據(jù)精液在水中分散狀況而定,一般只注射1～2次,劑量為雌魚(yú)一半。1.3卵粒的發(fā)育情況注射激素后,效應(yīng)期內(nèi)隨時(shí)觀察親魚(yú)的活動(dòng)情況及外形變化,當(dāng)腹部明顯膨大,下腹向兩邊擴(kuò)展時(shí),表明排卵已開(kāi)始,此時(shí)應(yīng)該擠卵檢查。當(dāng)擠出的卵子大部分圓潤(rùn)、飽滿、透明,直徑在1.2mm左右,油球大多為1～2個(gè)時(shí),表示卵子已經(jīng)成熟,可進(jìn)行人工受精。首先,將雄魚(yú)精液擠入一干凈的燒杯內(nèi),然后,再將成熟雌親魚(yú)提起,將魚(yú)體擦凈,緩緩?fù)茢D腹部,使成熟的卵子流入盛卵器中,并立即倒入精液,攪拌均勻,使精卵混合,靜止1～3min后,再加入少量澄清的海水,稍攪拌再靜止1～3min。然后用海水漱洗數(shù)次,撈出上浮卵,計(jì)數(shù)后移入孵化器中孵化。2結(jié)果2.1成蟲(chóng)的催熟作用自1992年開(kāi)始逐步篩選至1999年秋用于人工繁殖,共獲親魚(yú)50尾,其中雄魚(yú)24尾,雌魚(yú)26尾。1999年10月24日檢查親魚(yú),已有3尾雌魚(yú)外觀性腺隆起,生殖孔圓形且稍外突。大部分雄魚(yú)可擠出精液。經(jīng)初步篩選,共選出成熟度不同的8尾雌魚(yú)、5尾雄魚(yú),作為第一批進(jìn)行促熟催產(chǎn)親魚(yú);以后又分三批進(jìn)行人工促熟催產(chǎn)。其結(jié)果見(jiàn)表1。2.2產(chǎn)卵與產(chǎn)卵量通過(guò)多次注射激素,花鱸親魚(yú)可在較短時(shí)間內(nèi)多批產(chǎn)卵。自10月28日開(kāi)始至11月24日結(jié)束,共人工采卵1560×104粒(每kg卵按70×104粒計(jì)算)見(jiàn)表1,獲上浮卵950×104粒,平均上浮率為61%(40%～84%)。對(duì)于產(chǎn)卵親魚(yú)而言,平均每尾產(chǎn)卵68×104粒(18～175×104粒)。其中在最先成熟較好的三尾親魚(yú)中,共產(chǎn)卵435×104粒,上浮卵365×104粒,該批卵的上浮率高達(dá)84%,平均每尾產(chǎn)卵145×104粒。從表1還可發(fā)現(xiàn),產(chǎn)卵量與體重具有明顯的相關(guān)性,其相關(guān)關(guān)系以指數(shù)模式為最好:Y=7.4358e0.3624wR2=0.7475n=23式中Y為產(chǎn)卵量(×104粒),W示體重(kg)。經(jīng)檢驗(yàn),兩者相關(guān)達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。孵化期間,通過(guò)對(duì)不同批次的卵進(jìn)行抽樣檢查。結(jié)果表明,卵的受精率平均為78%(60%～85%),仔魚(yú)孵化率平均為85.7%左右(69%～94%),表2。3討論3.1配合阻燃劑、淡化水資源量過(guò)大的條件下,一般可選用外源激素來(lái)促熟本研究的主要內(nèi)容之一,是培育性腺成熟親魚(yú)和提高催產(chǎn)率。它是花鱸人工繁殖的難點(diǎn)。我們的調(diào)查研究表明,花鱸性腺是在II期越冬的,這就需要春夏特別是夏季的強(qiáng)化培育,使性腺較快進(jìn)入III期并迅速向IV期過(guò)渡,這樣才有可能為秋后的性腺成熟奠定基礎(chǔ)。如果措施不到位,性腺則發(fā)育滯后,仍處II期或III期初,當(dāng)年繁殖便難以成功。為此我們提出了“冬保、春肥、夏育、秋繁”的八字措施。兩年的實(shí)踐證明這一措施是可行的。1998年的試驗(yàn),由于夏季高溫期、低水位、投餌跟不上,9月27日搬回室內(nèi)進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化,吃食不旺,水流不足,雖也采取控溫、調(diào)光處理,直至11月11日第一次注射時(shí),性腺發(fā)育最好個(gè)體的平均卵徑為480μm,發(fā)育不好的個(gè)體仍只有118μm,雖然進(jìn)行了多次注射(作為試驗(yàn)),最后性腺還是退化,人工催產(chǎn)失敗。如作者連續(xù)追蹤的一尾親魚(yú),其體重為3.3kg,11月12日第一次注射時(shí),平均卵徑為312μm,11月22日第三次注射時(shí)卵徑為317μm,到12月21日最后檢查時(shí)降為252μm。其他個(gè)體有的已降到125μm,即退化到Ⅱ期。盡管當(dāng)時(shí)調(diào)控的水溫仍在16℃～16.5℃,但魚(yú)體已進(jìn)入越冬狀態(tài)。這與彭鏡洲的試驗(yàn)結(jié)果非常一致。1999年采取了“八字”技術(shù)措施,則獲得了成功。因此,可以這樣認(rèn)為,性腺發(fā)育至第IV期,卵粒直徑達(dá)600μm以上時(shí),注射激素才能達(dá)到較為理想的結(jié)果;如卵徑仍處400μm以下時(shí),盡管注射了外源激素,很可能會(huì)起到相反的結(jié)果,即阻礙性腺的正常發(fā)育;當(dāng)性腺卵徑處于500μm階段,通過(guò)適當(dāng)水流,配合控溫、調(diào)光與連續(xù)注射外源激素,可望促熟,進(jìn)行人工繁殖。因此,對(duì)于花鱸的促熟催產(chǎn)程序可總結(jié)如下:3.2促熟催產(chǎn)激素由于親魚(yú)性腺發(fā)育的不同步性,為促使親魚(yú)能集中產(chǎn)卵,滿足生產(chǎn)性育苗的需求,故需采取適當(dāng)生理、生態(tài)學(xué)調(diào)控措施,其中以性激素及其類似物進(jìn)行促熟催產(chǎn)較普遍。有關(guān)花鱸促熟催產(chǎn)所用激素的種類,目前還沒(méi)有統(tǒng)一規(guī)范,不同的學(xué)者所用的種類各有不同,使用較多的一般為魚(yú)類腦垂體,合成激素及促性腺激素制品等?？紤]到生產(chǎn)中激素的可獲得性,我們選用了一般的商品制劑LHRH-A3及HCG。LHRH-A3為人工合成的促黃體素釋放激素D-色氨酸類似物,能使魚(yú)類垂體釋放促性腺激素(GTH),促使垂體前葉分泌促黃體生成素和促濾泡素,進(jìn)而誘發(fā)魚(yú)類排卵與精子產(chǎn)生和成熟,其藥效較持久,并且安全,使用簡(jiǎn)單,是目前花鱸較為理想的促熟催產(chǎn)激素。HCG為絨毛膜促性腺激素,來(lái)自胎盤絨毛膜,是糖蛋白激素,注射到親魚(yú)體內(nèi),能促使性機(jī)能的興奮,具有促進(jìn)親魚(yú)體內(nèi)排卵、排精的作用,是一種高效的催產(chǎn)劑?；|的促熟催產(chǎn)所用激素的劑量,李明云對(duì)親魚(yú)促熟所用劑量為10～50μg/kgLRH-A,每5天注射一次;催產(chǎn)每千克雌魚(yú)體重用1.5～2.5mgPG+1200～2200IUHCG+70～140μgLRH-A或用6～10mgDOM+200～380μgLRH-A,雄魚(yú)劑量減半;彭鏡洲等則采用了與花鱸雌魚(yú)同體重的鯉魚(yú)垂體(PG)+1000IUCG,一天一次注射。我們所用種類和劑量為L(zhǎng)HRH-A32～5μg/kg或HCG700～1500IU/kg混合或單一使用,均取得了成功。因此,我們認(rèn)為這主要取決于親魚(yú)性腺發(fā)育的程度。同時(shí)還要考慮到激素藥效的持久性和生產(chǎn)管理中的方便操作以及藥品的可獲得性?？梢淮位蚨啻巫⑸?每次劑量溶解在1～2mL范圍內(nèi),行胸、腹腔或肌肉注射。這是大多數(shù)學(xué)者所共同接受的,但注射的間隔時(shí)間卻不同,一般為1～5d。3.3產(chǎn)卵的培養(yǎng)花鱸屬?gòu)V鹽性魚(yú)類,其生存鹽度在0～40范圍內(nèi),但性腺的成熟發(fā)育卻受鹽度的影響。這一影響只是要到成熟排卵時(shí)期才能表現(xiàn)出來(lái)。所以,生產(chǎn)中無(wú)論是在淡水或海水中培育成熟的親魚(yú),在繁殖季節(jié)都必須過(guò)渡到一定鹽度的海水中,才能得到產(chǎn)卵孵化的結(jié)果?？梢栽O(shè)想:在北方沿海地區(qū),秋冬季進(jìn)行花鱸人工繁殖,適當(dāng)利用鹽度稍低、溫度較高的地下井水來(lái)代替天然海水,可以減少加熱費(fèi)用,降低生產(chǎn)成本。但對(duì)此還有待進(jìn)一步試驗(yàn)驗(yàn)證。3.4人工誘導(dǎo)產(chǎn)卵表1可見(jiàn),花鱸的產(chǎn)卵量與體重有明顯的相關(guān)性,對(duì)于體重較大的個(gè)體,通過(guò)人工催產(chǎn),不論其產(chǎn)卵批次的多少,都能獲得較大的產(chǎn)卵量。伏見(jiàn)對(duì)養(yǎng)成體重為0.9～3.1kg的親魚(yú)進(jìn)行人工采卵,其產(chǎn)卵量?jī)H為5～33×104粒。我們所用養(yǎng)成親魚(yú)的體重為3.2～9.0kg,獲得的產(chǎn)卵量卻達(dá)18～175×104粒,特別是體重達(dá)6.8kg以上時(shí),產(chǎn)卵量大多都在100×104粒以上?；|屬分批非同步產(chǎn)卵魚(yú)類,1999年11月上旬對(duì)即將產(chǎn)卵的親魚(yú)取卵檢查,發(fā)現(xiàn)卵巢中有較為整齊的3批卵,其平均卵徑分別為1.17、0.62、0.37mm。這說(shuō)明了在正常情況下,鱸魚(yú)在繁殖季節(jié)有可能分3批產(chǎn)卵。但在人工催產(chǎn)擠卵的情況下,短時(shí)間內(nèi)實(shí)施的采卵次數(shù),并不與卵巢中的卵母細(xì)胞發(fā)育相一致。我們對(duì)已經(jīng)實(shí)施3次采卵的一尾親魚(yú)進(jìn)行解剖發(fā)現(xiàn),其性腺指數(shù)(GSI)仍達(dá)7.4,卵巢中尚存有大量處于III～I(xiàn)V期的卵粒。由此看來(lái),人為的促熟采卵次數(shù)與自然狀態(tài)下的產(chǎn)卵批次是不一致的。這與湯弘吉的無(wú)法