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實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與風(fēng)險(xiǎn)控制程序一、檢驗(yàn)職業(yè)感染的現(xiàn)狀經(jīng)血、呼吸道、粘膜傳播疾病直接危害著檢驗(yàn)工作者身體健康。我國(guó)率為8%-20%;自90年代以來(lái)HCV感染也呈上升趨勢(shì),其感染率為3%。目前玻璃管、吸頭等銳器刺破皮膚,呼吸道吸入氣溶膠也是傳播方式之一。因的可能性在0--0.9%之間,平均為0.4%。而對(duì)于HBV,這個(gè)可能性在6%-30%每年會(huì)產(chǎn)生1例由于針頭意外造成的職業(yè)性HIV感染;而每1000個(gè)乙肝患止到2000年底美國(guó)醫(yī)護(hù)人員中已有57人被確診感染了HIV,其中實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員19人。(2)呼吸道、接觸及節(jié)肢動(dòng)物叮咬危害因素病原微生物感染:病原微生物實(shí)驗(yàn)室、特別是高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作的任何疏忽、失誤都可能造成難以彌補(bǔ)的損失。常見感染:結(jié)3.防護(hù)措施(1)增強(qiáng)檢驗(yàn)工作人員的防護(hù)意識(shí)及防護(hù)行為:為了最大限度地減再由衛(wèi)生清潔人員取走。特別注意對(duì)損傷性醫(yī)療廢物的及時(shí)處理。嚴(yán)格防檢驗(yàn)科應(yīng)制(4)重視手部清潔:院內(nèi)感染病原體傳播最主要媒介是污染的手。戴醫(yī)用乳膠手套可以為醫(yī)務(wù)人員提供很好的保護(hù)。乳膠手套盡管不能避免的密度,搓洗15s,手表面的金黃色葡萄球菌可下降77%,洗2分鐘可降低85%;對(duì)銅綠假單胞菌效果更好,搓洗12s便可去除92%,洗2分鐘可去除97.8%。(5)職業(yè)暴露的局部處理:工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場(chǎng)急救處理非常重配備1.防備火災(zāi)、洪水、地震和爆炸等自然災(zāi)害2.意外(一)生物因子危害評(píng)估(1)危害評(píng)估內(nèi)容包括生物因子已知或未知的特性,如生物因子的種類、來(lái)源、傳染性、傳播途徑、易感性、潛伏期、劑量一效應(yīng)關(guān)系、致病性、變異性、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、與其他生物和環(huán)境的交互作用、流行(2)制定評(píng)估報(bào)告:各種因素的風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生概率程度、針對(duì)這些風(fēng)險(xiǎn)依據(jù)2006年1月11日中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布的《人間傳染的病表1.細(xì)菌、放線菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體、病毒分類名錄1、金黃色葡萄球菌的生物危害評(píng)估報(bào)告(一)金黃色葡萄球菌的傳播金黃色葡萄球菌在自然界中無(wú)處不在,在空氣、水、灰塵及人和動(dòng)物的排泄物中都可找到。金黃色葡萄球菌的流行病學(xué)一般有如下特點(diǎn):季節(jié)分布,多見于春夏季;中毒食品種類多,如奶、肉、蛋、魚及其制品。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報(bào)道;上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌,可引起局部化膿血癥、膿毒癥等全身感染。金黃色葡萄球菌的致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)成雙以及排列成葡萄串狀。無(wú)芽胞、鞭毛,大多數(shù)無(wú)莢膜,革蘭氏染色陽(yáng)在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,需氧或兼性厭氧,最適生長(zhǎng)溫度35~37℃、最適pH7.4~7.6。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10-15%NaCl肉湯中金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抵抗力,對(duì)磺胺類藥物敏感性低,但對(duì)青(三)金黃色葡萄球菌的檢測(cè)與診斷1.標(biāo)本采集采自不同感染部位的各種標(biāo)本,包括血液、腦脊液、穿刺2.直接涂片鏡檢直接涂片檢查在正常情況下呈無(wú)菌狀態(tài)的體液標(biāo)本如血液、腦脊液、穿刺液等,若有檢出革蘭氏陽(yáng)性,顯微鏡下呈葡萄狀排3.分離培養(yǎng)可以選用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血平板和高鹽甘露醇平板,若接種于瓊脂平板上35℃過(guò)夜后可形成直徑約2~3mm的厚菌落、濕潤(rùn)有光澤、呈金黃色不透明圓形凸起。若接種于血平板,菌落周圍可形成明顯的透明的β—溶血環(huán)。在高甘露醇平板上金黃色葡萄球菌生成淡橙黃色菌(1)血漿凝固酶試驗(yàn):血漿凝固酶分為結(jié)合型和游離型。前者結(jié)合在細(xì)菌的細(xì)胞壁上,能直接作用于血漿中的纖維蛋白原,使之轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,環(huán)繞菌體而形成凝塊。而游離型血漿凝固酶則在產(chǎn)生后被分泌到菌體外,不能直接作用于纖維蛋白原,但可以激活血漿凝血酶原,使之轉(zhuǎn)化成凝血酶,后者再作用于纖維蛋白原使其轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。具體的測(cè)量方(2)耐熱核酸酶試驗(yàn):將24小時(shí)肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min,用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭-DNA平板,35℃培養(yǎng)24小時(shí),在刺種線周圍(3)甘露醇發(fā)酵實(shí)驗(yàn)金黃色葡萄球菌可發(fā)酵甘露醇。(4)Staphaurex膠乳凝集實(shí)驗(yàn)是鑒定金黃色葡萄球菌的一種快速、5.生化鑒定如上述,注意與其他凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌的鑒別要點(diǎn):6.免疫學(xué)方法用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和對(duì)流免疫電泳方法可檢測(cè)金葡7.分子生物學(xué)方法包括PFGE脈沖場(chǎng)凝膠電泳以及酶切圖譜分析等。(四)金黃色葡萄球菌的防治及生物安全防護(hù)1)防止金黃色葡萄球菌污染食品,防止帶菌人群對(duì)各種食物的污染。2)防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成。3)無(wú)菌措施(如檢查病人前后徹底洗手和消毒合用的器械)至關(guān)重要。無(wú)癥狀的鼻腔帶菌者,除非所帶菌株十分危險(xiǎn)或被懷疑為暴發(fā)流行的傳染養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)在開始治療前或更換抗生素之前獲取。抗生素的選擇和劑量取決醫(yī)院獲得的葡萄球菌和大多數(shù)社區(qū)獲得的菌株,通常對(duì)青霉素G,氨芐青霉素和抗假單胞菌青霉素有耐藥性。大多數(shù)菌株對(duì)耐青霉素酶青霉素、頭孢菌素、亞胺培南類、慶大霉素、萬(wàn)古霉素、替考拉寧、林可霉素和氯霉素和氯林可霉素)的耐藥性也很普遍。脈注射萬(wàn)古霉素為首選。腎功能正常成人的通用劑量是每6小時(shí)靜脈注射500mg或每12小時(shí)靜滴注1000mg,至少在1小時(shí)內(nèi)滴完。腎功能受損時(shí),劑量應(yīng)根據(jù)血清中藥物的濃度加以調(diào)整,療程視感染部位及病人的反應(yīng)而療6~8周,然后再口服治療1個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。8小時(shí)或12小時(shí),連續(xù)2~4周;利福平(600mg/d)口服或腸外給藥;腸外給亞胺培南-西拉司丁(500mg每6小時(shí)1次)或美羅匹寧(0.5~1.0g每8小時(shí)1環(huán)丙沙星及局部用莫匹羅星(mupirocin)古霉素的基因轉(zhuǎn)為凝固酶陽(yáng)性的金黃色葡萄球菌菌株,而在感染的病人中則轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂戈幮云咸亚蚓蛛x株。可是這些葡萄球菌很容易對(duì)治療這2.細(xì)菌的生物安全防護(hù)根據(jù)《病原微生物生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)金黃色葡萄球菌屬于三類,BSL-2。相關(guān)的1)實(shí)驗(yàn)時(shí),未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意,限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4)對(duì)于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻 不將之小心放入不會(huì)被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳箕、夾子或鑷子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應(yīng)按照相關(guān)7)所有的培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近實(shí)驗(yàn)室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。離開該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料,在轉(zhuǎn)出后、或受到其他傳染源污染后,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)消毒劑消毒。污染的設(shè)備在送去修理、維護(hù)前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;1)正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其他合2)確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集3)涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí),若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī),若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)離4)當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí),需采取面部保
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