湖北青霉素茶降血脂作用研究

湖北青霉素茶降血脂作用研究

現(xiàn)在，隨著高脂肪和蛋白等食物的增加，老年人的高血脂癥患者越來越多。現(xiàn)有的降血脂藥物大多有副作用,不宜長期服用。因此,尋求從天然植物中提取具調(diào)節(jié)血脂的活性成分已備受關(guān)注。大量研究表明,茶葉具有抗脂質(zhì)過氧化、預(yù)防高血脂癥、減少心腦血管疾病發(fā)生的作用,其中研究較多的是綠茶、烏龍茶及其活性成分茶多酚和茶色素等。近年來,有關(guān)普洱茶、茯磚茶的降脂活性研究日益增多。傅冬和研究了茯磚茶不同提取物對過氧化物酶增殖體活化受體、肝X受體(LXR)、法尼酯衍生物X受體(FXR)具有一定的作用,提示其多條降脂途徑。宋魯彬等人選用不同黑茶材料進行對比分析,結(jié)果表明,所分析黑茶對PPARδ及PPARγ兩種核受體模型具有一定的激活能力,具有潛在的降血糖和降血脂作用的可能。青磚茶為湖北特有的黑茶,為西北高寒高脂飲食地區(qū)人們的生活必需品,前期研究表明其具顯著的減肥功效。本文擬對其輔助降血脂作用和機制進行深入研究,為青磚茶的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。1材料和方法1.1血脂康取助劑制備工藝青磚茶由湖北省赤壁市趙李橋茶廠提供,分貯藏1年磚和10年磚;陽性藥為血脂康膠囊(北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn))。試驗時,先將青磚茶打碎,按料水比(m/V)為1:20加沸蒸餾水煮沸7min,煮兩次,過濾后合并茶湯,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至相應(yīng)的體積。綠茶(湖北宣恩炒青綠茶一芽二葉左右嫩度)用沸蒸餾水浸泡兩次(料水比m/V為1:20,浸泡時間為每次40min),過濾后合并茶湯于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至相應(yīng)的體積。血脂康取粉劑用蒸餾水配制而成。飼料:動物普通飼料由湖北省實驗動物研究中心提供。高脂飼料配方:基礎(chǔ)飼料78.8%、豬油10.0%、蛋黃粉10.0%、膽固醇1.0%、膽鹽0.2%。1.2centrifacifge50r天平,解剖器械,751型分光光度計,RE-52AA旋轉(zhuǎn)濃縮儀,HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋,EppendorfCentrifuge5810R(Germany),微量移液器等。膽固醇、膽鹽、血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)測定試劑盒(上海科欣生物技術(shù)研究所提供);超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所);其他試劑均為國產(chǎn)分析純。1.3實驗分組、給藥及飼料雄性Wistar大鼠80只,體重為(150±5)g,(SPF級,由湖北省實驗動物研究中心提供,)在實驗環(huán)境下將大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)5d,然后取尾血,測定血清TC,根據(jù)TC水平,參考體重隨機分為8組(每組10只):空白對照組(NC)、模型對照組(MC)、陽性藥對照組(XZK,0.12g/kg),貯藏1年青磚低劑量組(QT1-L,0.75g/kg)、中劑量組(QT1-M,1.5g/kg)、高劑量組(QT1-H,3.0g/kg)和10年青磚劑量組(QT10,1.5g/kg)、綠茶劑量組(GT,1.5g/kg)?？瞻讓φ战M灌胃蒸餾水,喂飼普通飼料;模型對照組灌胃蒸餾水,喂飼高脂飼料;其它6個劑量組分別灌胃相應(yīng)的受試樣品,喂飼高脂飼料。實驗喂養(yǎng)6周,定期稱量體重。實驗結(jié)束時,禁食12h,稱體重,頸動脈取血,2000r/min4℃離心10min,分離出血清,測定血清TC、TG、HDL-C及SOD、GSH-PX、MDA水平,解剖大鼠,肉眼觀察大鼠體內(nèi)臟器變化情況。取大鼠同一部位肝臟0.5g左右于10%的中性福爾馬林液中固定,石蠟包埋切片,HE染色,用Olympus萬用顯微鏡攝影記錄。1.4大鼠相關(guān)指標(biāo)的測定血清TC、TG、HDL-C、SOD、GSH-PX、MDA按試劑盒要求進行測定。1.5處理數(shù)據(jù)采用SPSS16.0版本軟件,用one-wayanova方法進行方差分析。2結(jié)果分析2.1各組大鼠的最終體重、體重增重情況分組時各組初始體重差異不明顯,經(jīng)過6周喂養(yǎng)后,模型對照組體重最高,增重最多,其最終體重及體重增幅都極顯著高于其他各組大鼠。喂飼貯藏10年的青磚茶組大鼠體重及增重幅度為各實驗組最小,其次是高倍劑量的儲藏1年青磚茶組(表1)。說明,青磚茶較綠茶對高脂大鼠降低體重效果更明顯。2.2兩組大鼠血脂水平的比較實驗結(jié)果(表2)表明,經(jīng)6周高脂飼料喂養(yǎng),模型組大鼠血清TC、TG顯著高于空白對照組,說明建模成功。與高脂模型組比較,喂飼青磚茶的大鼠血清TC、TG顯著降低,1年青磚茶有劑量依賴關(guān)系。各處理中,以10年青磚茶組大鼠血清的TC、TG最低,接近正常對照組大鼠血脂水平。其次是1年青磚茶的高、中劑量組。綠茶組大鼠血清TC、TG的值為各實驗組最高。HDL-C以10年青磚茶喂食組最高,極顯著高于模型組及對照組。1年青磚茶高、中劑量喂食組大鼠血清HDL-C提高明顯,極顯著高于模型組。綠茶對大鼠血清HDL-C的提高也比較明顯;血脂康對大鼠血清HDL-C提高不顯著。以上分析結(jié)果表明,1年青磚、10年青磚、綠茶都有降低大鼠血清TC、TG,升高大鼠血清HDL-C的作用,尤以1年青磚高劑量組和10年青磚茶的降TC、TG效果最好。2.3加強動力學(xué)mda、gsh-px抗氧化能力研究實驗結(jié)果如表3所示,與模型組比較,陽性對照及各受試樣品組大鼠血清SOD、GSH-PX的活性都顯著或極顯著提高,血清MDA極顯著降低作用,其中,1年青磚茶對大鼠血清抗氧化作用有明顯的量效關(guān)系。2.4肝臟水腫,肝臟以紅色解剖大鼠后肉眼觀察肝臟形態(tài),發(fā)現(xiàn)高脂模型組大鼠肝臟腫脹,顏色大多為黃褐或泛白,喂飼青磚茶后,肝臟大小、顏色趨于正常。說明青磚茶對喂飼高脂飼料的大鼠肝臟有調(diào)節(jié)保護作用。3不同給藥劑量對大鼠降血脂效果的影響本實驗結(jié)果顯示,青磚茶對實驗大鼠血清TC、TG水平有明顯的降低作用,對HDL-C水平有明顯的升高作用。說明青磚茶對實驗大鼠具有輔助降血脂功能。實驗所用陽性藥血脂康是一種由紅曲中提煉制成的血脂調(diào)節(jié)劑,主要功能性成分為洛伐他汀,其藥理作用是調(diào)節(jié)異常血脂,可降低血清TC、TG、LDL-C含量和升高HDL-C含量;抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成,保護血管內(nèi)皮細胞;抑制脂質(zhì)在肝臟沉積。血脂康是人們常用的降血脂藥物,但長期服用對肝臟有副作用。實驗結(jié)果顯示,青磚茶的輔助降血脂效果優(yōu)于血脂康。顯微切片圖(圖1)可以看出,正常組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,中央靜脈清楚,肝細胞索呈放射狀排列,肝竇正常,肝細胞大小一致,細胞核清晰,胞漿均勻。而模型組大鼠肝細胞組織結(jié)構(gòu)異常,肝竇縮小甚至消失,細胞界限不清,肝索排列紊亂,肝細胞大面積腫脹,胞漿呈空泡樣,淺染。其余各實驗組癥狀減輕,細胞界限較明顯,空泡面積較少。其中喂食10年青磚組和1年青磚高劑量組大鼠肝臟保護較好,已趨于正常組大鼠肝細胞狀態(tài),說明青磚茶對實驗大鼠的肝臟有較好的保護作用。本實驗同時比較了青磚茶與綠茶的降血脂效果,結(jié)果顯示,即使1年青磚茶低劑量的降血脂效果也優(yōu)于綠茶。青磚茶由于原料、加工工藝與綠茶存在較大差異,因此,內(nèi)含成分與綠茶也有較大差異,據(jù)筆者分析,青磚茶中,茶多酚明顯減少,而多酚的氧化聚合產(chǎn)