家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)

華南師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告學(xué)生姓名：000學(xué)號(hào)：專業(yè)：生物科學(xué)年級(jí)班級(jí)：0000000課程名稱：動(dòng)物生理實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目：家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)類型：綜合實(shí)驗(yàn)時(shí)間:5月實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師：胡學(xué)軍老師實(shí)驗(yàn)評(píng)分:家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)一、目的規(guī)定1.學(xué)習(xí)直接測(cè)定家兔動(dòng)脈血壓的急性實(shí)驗(yàn)的辦法。2.觀察神經(jīng),體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的影響。二、基本原理在正常人體內(nèi),任何高等動(dòng)物的動(dòng)脈血壓時(shí)相對(duì)穩(wěn)定的.這種相對(duì)穩(wěn)定是通過(guò)神經(jīng)和體液調(diào)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)的,其中以靜動(dòng)脈竇-主動(dòng)脈弓壓力感受性反射最為重要.此反射即可使升高的血壓下降,又可使減少血壓升高,故有血壓緩沖反射之稱.家兔的主動(dòng)脈神經(jīng)在解剖上獨(dú)成一支,易于分離與觀察其作用。本實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用液導(dǎo)系統(tǒng)直接測(cè)定動(dòng)脈血壓,即由動(dòng)脈插管與壓力傳感器連通,其內(nèi)充滿抗凝液體,構(gòu)成液導(dǎo)系統(tǒng),將動(dòng)脈插管插入動(dòng)脈,動(dòng)脈內(nèi)的壓力及其變化,可通過(guò)封閉的液導(dǎo)系統(tǒng)傳導(dǎo)壓力感受器,由計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)下來(lái)。三、材料與器材家兔,手術(shù)臺(tái),慣用手術(shù)器械,止血鉗,眼科剪,支架,雙凹管,氣管插管,動(dòng)脈插管,三道管,動(dòng)脈夾,計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng),壓力傳感器,保護(hù)電極,照明燈,紗布,棉球,絲線,注射器(1ml,5ml,20ml),生理鹽水,4%檸檬酸鈉,20%-25%氨基甲酸已酯,肝素(200U/ml),腎上腺素(1:5000),已酰膽堿(1:10000)。四、辦法與環(huán)節(jié)1.實(shí)驗(yàn)儀器的準(zhǔn)備2.連通液導(dǎo)系統(tǒng)并制壓將壓力傳感器的下方支管，通過(guò)輸液管連接三通管，再連接動(dòng)脈插管。上側(cè)管供制壓時(shí)排除管內(nèi)空氣使用。先用裝有20ml4%檸檬酸鈉的注射器，通過(guò)三通管向連接動(dòng)脈插管的輸液管內(nèi)推注，使之充滿液體（不要使動(dòng)脈插管高過(guò)壓力傳感器的上方支管）后，再用止血鉗夾住動(dòng)脈插管端的輸液管。然后繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，直至充滿壓力傳感器的上方支管，并用塞子塞住。繼續(xù)向三通管內(nèi)推注，同時(shí)觀察顯示屏上壓力變化。當(dāng)加壓到120mmHg時(shí)既可關(guān)閉三通管。觀察壓力與否變化，如果壓力下降，則需要檢查液導(dǎo)系統(tǒng)的漏液因素，并重新制壓。調(diào)節(jié)血壓顯示屏的敏捷度，使30~130mmHg的變化都能在顯示屏上明顯的反映出來(lái)。將動(dòng)脈插管端的導(dǎo)管內(nèi)充滿肝素溶液。3.動(dòng)物的準(zhǔn)備（1）按照實(shí)驗(yàn)4-8辦法，麻醉家兔并進(jìn)行頸部手術(shù)，插入氣管插管、分離主動(dòng)脈神經(jīng)。同時(shí)分離迷走神經(jīng)并穿線備用。再將止血鉗從頸總動(dòng)脈下方穿過(guò)，輕輕張開止血鉗，分離出2~3cm長(zhǎng)的頸總動(dòng)脈。分離出的頸總動(dòng)脈外壁應(yīng)當(dāng)十分光潔，外面并無(wú)結(jié)締組織及脂肪等物。在動(dòng)脈上穿兩條備用棉線，分別打上活結(jié)。將兩線分別拉至分離出的動(dòng)脈兩端備用。同樣辦法分離另一側(cè)血管與神經(jīng)（一側(cè)動(dòng)脈用于插管側(cè)壓，另側(cè)動(dòng)脈實(shí)驗(yàn)用）。由于家兔的品種不同，個(gè)體之間也有差別，常發(fā)現(xiàn)3條神經(jīng)的解剖位置有些變異。主動(dòng)脈神經(jīng)的最后確認(rèn)，蓄意對(duì)血壓的影響為準(zhǔn)。（2）動(dòng)脈插管

首先用5ml注射器從耳緣靜脈注入肝素（200U/kg體重）以防凝血。然后在一側(cè)動(dòng)脈行動(dòng)脈插管術(shù)以統(tǒng)計(jì)血壓。其辦法以下：將動(dòng)脈頭端的備用線盡量靠頭端結(jié)扎（務(wù)必扎緊，以防滲血），然后在另一備用線的向心側(cè)（盡量近心端），用動(dòng)脈夾夾閉。輕輕提起動(dòng)脈頭端的結(jié)扎線，用銳利的眼科剪在靠近扎線的稍后方，沿向心方向斜向剪開動(dòng)脈上壁（注意：不可只剪開血管外膜，也切勿剪斷整個(gè)動(dòng)脈，剪口大小約為管徑的二分之一）。一手持彎頭眼科鑷，將其一種彎頭從剪口處插進(jìn)動(dòng)脈少量，輕輕挑起剪開的動(dòng)脈上壁，另一手將準(zhǔn)備好的動(dòng)脈插管由開口處插入動(dòng)脈管內(nèi)。如果插入較淺，可用一手輕輕捏住進(jìn)入插管的動(dòng)脈管壁，另一手拿住動(dòng)脈插管，順勢(shì)輕輕推動(dòng)至6~8mm左右并將余線系在插管的固定側(cè)支上，以免滑脫。注意：插管應(yīng)與動(dòng)脈血管的方向一致，以防插管尖端扎破動(dòng)脈管壁。輕輕取下向心端動(dòng)脈夾，可見動(dòng)脈血與插管內(nèi)液體混合。再取下通向壓力傳感器的止血鉗，此時(shí)顯示屏上出現(xiàn)血壓的波動(dòng)曲線。4.實(shí)驗(yàn)觀察（1）觀察正常血壓曲線：調(diào)節(jié)掃描速度與增益，能夠明顯地觀察到心室射血與主動(dòng)脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。有時(shí)能夠觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級(jí)波，呼吸波為二級(jí)波。然后將掃描速度調(diào)慢，觀察正常血壓曲線。（2）夾閉對(duì)側(cè)勁總動(dòng)脈：輕輕提起對(duì)側(cè)完好頸總動(dòng)脈上的備用線，用動(dòng)脈夾夾閉30s（于夾閉前統(tǒng)計(jì)動(dòng)脈暢通時(shí)的血壓曲線），觀察并統(tǒng)計(jì)血壓變化。出現(xiàn)變化后即取下動(dòng)脈夾，統(tǒng)計(jì)血壓的恢復(fù)過(guò)程。（3）按壓頸動(dòng)脈竇：統(tǒng)計(jì)對(duì)照血壓曲線后，用手指按壓頸動(dòng)脈竇（下頜下方內(nèi)側(cè)），觀察并統(tǒng)計(jì)血壓變化。當(dāng)血壓明顯下降時(shí)，則停止按壓，待血壓恢復(fù)（如果血壓反而升高，闡明按壓的是血管，需重新尋找按壓位置）。（4）刺激主動(dòng)脈神經(jīng)：使刺激輸出端連接保護(hù)電極，輕輕提起主動(dòng)脈神經(jīng)上的備用線，小心地將神經(jīng)置于保護(hù)電極之上。統(tǒng)計(jì)對(duì)照血壓曲線后，再用中檔強(qiáng)度的持續(xù)電脈沖信號(hào)，通過(guò)保護(hù)電極，刺激神經(jīng)10~20s。血壓出現(xiàn)明顯下降后即可停止刺激，并待血壓恢復(fù)。如果血壓并不下降，可調(diào)節(jié)刺激強(qiáng)度或刺激頻率再行刺激。任何刺激都無(wú)效時(shí)，則表達(dá)此神經(jīng)并非主動(dòng)脈神經(jīng)。需要重新識(shí)別神經(jīng)后再行實(shí)驗(yàn)。（5）分別刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端和外周端：雙結(jié)扎主動(dòng)脈神經(jīng)后（務(wù)必結(jié)扎），從兩扎線結(jié)之間剪斷神經(jīng)。統(tǒng)計(jì)對(duì)照血壓后，同法分別刺激神經(jīng)的中樞端和外周端，觀察并統(tǒng)計(jì)血壓變化。（6）刺激迷走神經(jīng)：統(tǒng)計(jì)對(duì)照血壓后，用同樣的辦法刺激迷走神經(jīng)，觀察血壓下降曲線與（4）有何不同（如果血壓下降很快、很低，應(yīng)立刻停止刺激）。（7）刺激迷走神經(jīng)外周端

分別刺激兩側(cè)迷走神經(jīng)外周端，觀察并統(tǒng)計(jì)血壓變化有何不同。（8）腎上腺素對(duì)血壓的影響：統(tǒng)計(jì)對(duì)照血壓曲線后，用1ml注射器，從耳緣靜脈注入0.1~0.3ml腎上腺素溶液，觀察并統(tǒng)計(jì)血壓變化及恢復(fù)曲線。（9）乙酰膽堿對(duì)血壓的影響：同法注入0.1~0.2ml乙酰膽堿溶液，觀察并統(tǒng)計(jì)注射前后血壓變化。（10）失血對(duì)血壓的影響：從另一側(cè)動(dòng)脈插管后慢慢放血，觀察放血量對(duì)血壓的影響。五、實(shí)驗(yàn)成果（1）觀察正常血壓曲線：圖1.家兔正常血壓曲線（2）夾閉對(duì)側(cè)勁總動(dòng)脈：圖2.夾閉家兔對(duì)側(cè)頸總動(dòng)脈時(shí)的血壓變化曲線（3）按壓頸動(dòng)脈竇：圖3.按壓家兔頸動(dòng)脈竇血壓變化曲線（4）刺激主動(dòng)脈神經(jīng)：圖4.刺激家兔主動(dòng)脈神經(jīng)血壓變化曲線（5）分別刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端和外周端：圖5.刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端端血壓變化曲線圖6.刺激主動(dòng)脈神經(jīng)外周端血壓變化曲線（6）刺激迷走神經(jīng)圖7.刺激迷走神經(jīng)血壓變化曲線（7）分別刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端和外周端：圖8.刺激主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端和外周端：（8）腎上腺素對(duì)血壓的影響：圖9.腎上腺素對(duì)血壓的影響曲線六、分與討論1.由圖1正常血壓曲線：能夠明顯地觀察到心室射血與主動(dòng)脈回縮形成的壓力變化與收縮壓、舒張壓的讀數(shù)。能夠觀察到血壓曲線隨呼吸變化，心搏為一級(jí)波，呼吸波為二級(jí)波。2.由圖2夾閉家兔對(duì)側(cè)頸總動(dòng)脈時(shí)的血壓變化曲線，.夾閉一側(cè)頸總動(dòng)脈后，時(shí)間4:45——5:00之間，能夠觀察到兔動(dòng)脈血壓升高的現(xiàn)象。這是由于頸動(dòng)脈竇管壁的外膜下分布有豐富的感覺神經(jīng)末梢，是動(dòng)脈張力感受器，位于兔頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端，頸內(nèi)動(dòng)脈與頸外動(dòng)脈的分叉交界處。夾閉頸動(dòng)脈后，遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓下降，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率減慢。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張削弱，心交感和心縮血管緊張加強(qiáng)，作用于心臟，使心率加緊，心輸出量增加，血管收縮，血管外周阻力增加。從而血壓恢復(fù)性升高。3.由圖3用手指按壓頸動(dòng)脈竇，血壓出現(xiàn)一定程度的下降，之后稍微上升并逐步恢復(fù)正常。這是由于頸動(dòng)脈竇管壁的外膜下是動(dòng)脈張力感受器，位于兔頸總動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端，手指按壓頸動(dòng)脈竇后，動(dòng)脈竇的容量變小，血流通過(guò)時(shí)產(chǎn)生較大的壓力，遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓升高，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率加緊。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張?jiān)鰪?qiáng)，心交感和心縮血管緊張削弱，作用于心臟，使心率減慢，心輸出量減少，血管舒張，血管外周阻力減小。從而血壓恢復(fù)性減少。之后遠(yuǎn)心端的頸動(dòng)脈竇張力感受器感受到血壓下降，傳出神經(jīng)沖動(dòng)的頻率減慢。信息沿竇神經(jīng)上傳至延髓孤束核心血管中樞。使心迷走緊張削弱，心交感和心縮血管緊張加強(qiáng)，作用于心臟，使心率加緊，心輸出量增加，血管收縮，血管外周阻力增加。從而血壓恢復(fù)性升高。4.由圖4刺激主動(dòng)脈神經(jīng)，血壓出現(xiàn)下降的現(xiàn)象。這是由于主動(dòng)脈神經(jīng)是單純的傳入神經(jīng)，含有穩(wěn)定動(dòng)脈血壓的作用。當(dāng)動(dòng)脈血壓升高或減少時(shí)，壓力感受器的傳入沖動(dòng)也隨之增多或減少，使減壓反射對(duì)應(yīng)地增加或削弱，以保持動(dòng)脈血壓相對(duì)穩(wěn)定。當(dāng)電刺激主動(dòng)脈神經(jīng)時(shí)：主動(dòng)脈神經(jīng)傳入沖動(dòng)增多，使心迷走中樞興奮、心交感中樞克制、縮血管中樞克制，使迷走神經(jīng)傳出沖動(dòng)增加，交感神經(jīng)傳出沖動(dòng)減少，而至心率減慢、心縮力削弱、小靜脈舒張回心血量減少，心輸出量減少；小動(dòng)脈舒張，外周阻力減少，最后造成血壓下降。5.由圖5和6刺激完整減壓神經(jīng)（主動(dòng)脈弓神經(jīng)）及其中樞端均可引發(fā)血壓下降，而刺激該神經(jīng)外周端基本不變。兔減壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)，其作用是將主動(dòng)脈弓感受器發(fā)出的沖動(dòng)傳入延髓心血管中樞，反射性引發(fā)血壓減少。因此，刺激完整的減壓神經(jīng)或其中樞端，使傳入中樞的沖動(dòng)增加，致血壓明顯下降，而刺激其外周端雖又沖動(dòng)傳向外周，但不會(huì)引發(fā)血壓變化。6.刺激迷走神經(jīng)后觀察到，刺激迷走神經(jīng)和迷走神經(jīng)外周端都能引發(fā)明顯的減壓反映，而刺激迷走中樞端則沒有減壓反映，只是稍有輕微抬升變化。

迷走神經(jīng)中含從延髓下行的傳出纖維，通向心臟。節(jié)前纖維末端釋放Ach,節(jié)后纖維末端釋放Ach,屬于副交感神經(jīng)纖維，能使cAMP濃度減少，心率減慢，心房收縮力削弱，傳導(dǎo)性削弱。從而使心輸出量變小，平均動(dòng)脈壓減少。另外，尚有主動(dòng)脈體化學(xué)感受器的上行纖維在迷走神經(jīng)中并行，化學(xué)感受器受刺激的效應(yīng)是血壓升高。因此，刺激迷走中樞不能引發(fā)減壓反映，卻能夠使血壓輕微抬高。另外，若切斷兩側(cè)迷走神經(jīng)，迷走緊張消失，迷走吸氣興奮反射通路也斷了，動(dòng)物的吸氣變深，周期變長(zhǎng)，二級(jí)曲線周期性變得不明顯。7.如圖8，用1ml注射器，從耳緣靜脈注入0.1~0.3ml腎上腺素溶液，血壓曲線出現(xiàn)下降，后恢復(fù)正常