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米粉液化法發(fā)酵黃酒的研究
本文主要研究了淀粉酶的增加、淀粉酶的作用時間和發(fā)酵技術對黃酒品質(zhì)的影響。1材料和方法1.1實驗材料1.2實驗方法1.2.1實驗室飲用水處理、8080530151.2.1.1液化法酒酒流程2.1最佳酶解條件的確定淀粉質(zhì)原料只有在糊化后才能被淀粉酶作用,大米的糊化溫度為59℃~63℃,但只有在較高的溫度才能破壞晶體,達到完全糊化,但在較高溫度下中溫淀粉酶易失活,在Ca2+的保護下,其液化溫度可達到90℃以上,表1為以溫度,加酶量,鈣離子濃度為因素設計的三因素三水平的正交實驗。如按L9(34)安排實驗,實驗結果如表2:從表2中可看出對酶解影響程度大小的因素依次為:溫度(A)>加酶量(B)>Ca2+濃度,溫度較高對反應速度有利,在一定范圍內(nèi)隨著溫度的升高反應速度加快,但太高,酶的失活速度也加快,反應速度反而降低,因此在90℃的條件下,由于酶活降低很快,其反應速度反而不及在80℃時的反應速度;加酶量也是影響酶解速度的一個重要因素,在一定范圍內(nèi)加酶量與反應速度成正比關系,但當加酶量增加到一定程度后反應速度便不再變化;鈣離子對淀粉酶酶活有一定的保護作用,但濃度太大反而抑制反應的進行。由表2的結果可得到最佳酶解條件為A2B2C2,即溫度為80℃,加酶量為0.2%,Ca2+濃度為0.005mol/L。由淀粉酶對米粉的作用情況可知80℃對酶活的影響并不大,從表3可看出雖然加鈣與不加鈣完全液化時間相差20min,但Ca2+濃度是黃酒中需要控制的指標之一,Ca2+對黃酒的質(zhì)量及口味有一定的影響,Ca2+量過多是造成黃酒苦澀味的原因之一,并且還會影響黃酒的穩(wěn)定性,再考慮到成本問題,所以在米粉的液化中選擇不加鈣,即其作用條件為溫度為80℃,加酶量為0.2%,液化時間選擇為80min。2.2加曲發(fā)酵所釀酒過程中酒精度的變化米粉的液化溫度80℃已經(jīng)超過了米中淀粉的糊化溫度,只要米粉糊化完全,其淀粉也可以被麥曲中的淀粉酶作用而達到淀粉分解的目的。表4為分別液化60、70、80、90min后加曲發(fā)酵所釀酒的比較。由表4可看出液化時間不同,所發(fā)酵的酒的酒精度也有所不同,液化時間從60min上升到70min,酒精度增加較大,增加了0.7°,而70℃、80℃、90℃之間酒精度的增幅只有0.2°,這說明液化70min后米粉中的淀粉已大部分被淀粉酶作用,隨著時間的延長,只是將一些大分子糊精分解為更易被糖化酶作用的小分子糊精,但這對酒精的影響并不是很大。我們還可看出液化時間的不同對酒中其它成分的影響并不大,但與揮發(fā)酯的產(chǎn)生有一定的聯(lián)系,液化時間越短揮發(fā)酯的量越大。2.3成品酒對樣品中氨基態(tài)氮的影響為了研究發(fā)酵過程中氨基態(tài)氮的變化情況,采用以下流程對氨基態(tài)氮進行分析,1為主酵后對發(fā)酵醪進行過濾再進入后酵,2為主酵后直接進入后酵,主酵時間為5d,后酵時間為15d。表5為分別在主酵前、主酵后和成品酒對樣品中的氨基態(tài)氮含量。1中氨態(tài)氮在后酵過程中氨基態(tài)氮的變化量為0.278g/L,2在后酵氨基態(tài)氮的變化為0.38g/L,這說明在15d的后酵時間內(nèi),氨基態(tài)氮的變化是由基質(zhì)的分解和酵母自溶共同產(chǎn)生的,由于在后酵期蛋白酶活力降低,基質(zhì)分解產(chǎn)生的氨基態(tài)氮較少,由于主酵結束后發(fā)酵醪中的營養(yǎng)物質(zhì)缺乏,酵母逐漸衰老和死亡,溶菌酶被激活,酵母自溶產(chǎn)生氨基酸,因此酵母自溶產(chǎn)生了較多的氨基酸。而在主酵期,氨基態(tài)氮的變化為0.124g/L和0.11g/L,較后酵所產(chǎn)生的氨基態(tài)氮少,這是由于在主酵期,酶解反應和酵母代謝產(chǎn)生的氨基態(tài)一部分要用于酵母的生長繁殖。2.4與傳統(tǒng)方法的生產(chǎn)黃酒的比較2.4.1兩種發(fā)酵方法在主酵期二氧化碳失重量的對比100g米分別蒸飯和粉碎,總加水量都為180mL,加曲量為15%,在同樣的發(fā)酵條件下米飯發(fā)酵與米粉液化發(fā)酵,其發(fā)酵速度、酒成分都有所不同,圖1為兩種發(fā)酵方法在主酵期二氧化碳失重量的比較。由圖1可看出米粉液化發(fā)酵的發(fā)酵速度比傳統(tǒng)發(fā)酵的發(fā)酵速度快,其第5d的二氧化碳失重為0.7g,在第4d其主酵期就已經(jīng)可以結束,也就是說米粉的液化發(fā)酵可以縮短發(fā)酵時間。并且為米粉液化發(fā)酵前4d的二氧化碳總失重為39.1g而傳統(tǒng)發(fā)酵5d的二氧化碳失重為37g,這說明米粉經(jīng)液化后再加曲接種發(fā)酵原料的利用率提高了。2.4.2液化法和清酒法工藝的比較發(fā)酵方法和發(fā)酵條件不同所發(fā)酵出的酒的成分與口味也不同。表6為液化法發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵法酒成分的比較從表6中可看出液化法所釀的酒酒精度較高,糖度較低,這說明液化法生產(chǎn)酒,淀粉的利用率較高,而且液化法所釀酒的氨基態(tài)氮也較高,但其揮發(fā)酸和雜醇油也較高,而總酯卻較低。米粉經(jīng)液化后,淀粉被分解,蛋白質(zhì)顆粒分散在發(fā)酵醪中,易被蛋白酶作用,因此其氨基態(tài)氮水平較高,而酒液中雜醇油水平是與氨基態(tài)氮是有一定關系的,尤其在主酵時期,氨基酸的含量是合成高級醇的首要因素,當發(fā)酵醪中氨基態(tài)氮水平很低時,酵母營養(yǎng)欠缺,致使酵母活性衰退,對α-酮酸的反饋抑制建立不起來,產(chǎn)生多量的酮酸,且無法轉變?yōu)榘被?從而轉化為高級醇,當發(fā)酵醪中氨基酸過多時,酵母將多數(shù)的氨基酸轉變?yōu)橥?再轉變?yōu)楦呒壌?。適量的高級醇對酒的品質(zhì)和風味有一定的促進作用,過多就影響酒質(zhì)和對人體產(chǎn)生危害,通過液化法發(fā)酵的黃酒中高級醇含量為0.212g/L,這比日本清酒雜醇油的平均含量0.5g/L要低,所以液化法生產(chǎn)的黃酒雖然其高級醇含量較高,但卻不是過高。通過口味品評,兩種總體上相差不大,傳統(tǒng)法所釀的酒麥曲味重,苦澀味較大,酒味較少,而液化法所釀的酒苦味和曲味都較少,但酒味較濃,有點偏向于清淡型黃酒。2.4.3液化法與傳統(tǒng)法所發(fā)酵的氨基酸的對比黃酒以氨基酸豐富著稱,它是黃酒中的營養(yǎng)物質(zhì),同時也是黃酒中的重要風味物質(zhì),表7所示的是液化法與傳統(tǒng)法所發(fā)酵的酒的氨基酸的不同。從表7中可看出兩種方法所釀的酒的氨基酸差別不大,液化法在總量上稍高于傳統(tǒng)法,氨基酸的產(chǎn)生與原料和微生物有關,而我們只是改變了部分工藝,所用的原料和酵母都相同,因此其最終所產(chǎn)生的氨基酸差別也不大。3后酵時間和液化時間3.1我們可以通過無蒸煮工藝,將米粉碎、加淀粉酶液化后進行發(fā)酵釀出黃酒,米粉完全液化的最適條件為:加酶量0.15%,液化溫度80℃,液化時間為80min。3.2發(fā)酵過程中酒中的氨基酸主要是原料中的蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生的,如果后酵時間不長,酵母自溶產(chǎn)生的氨基酸并不多。3.3液化時間不同所得到的酒的品質(zhì)也不同,液化時間太短淀粉利用率不高,并且酒味太淡,液化時間過長,酒的苦澀味太重,最適的液化時間為80min。3.4與傳統(tǒng)的發(fā)酵方法相比,
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