中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究進(jìn)展

中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究進(jìn)展

標(biāo)準(zhǔn)藥物是藥物檢測(cè)（定性和定量分析）中使用的物質(zhì)的物理對(duì)照，用于確定藥物的真實(shí)性，評(píng)估藥物質(zhì)量的優(yōu)缺點(diǎn)，在控制藥物生產(chǎn)、提高和保證藥物質(zhì)量方面發(fā)揮著重要作用。按照《藥品管理法》、《藥品注冊(cè)管理辦法》的規(guī)定,中國(guó)藥品生物制品檢定所(以下簡(jiǎn)稱中檢所)承擔(dān)著對(duì)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行標(biāo)定和管理的職責(zé),負(fù)責(zé)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)原材料的選擇、制備方法、標(biāo)定方法、標(biāo)定結(jié)果、定值準(zhǔn)確性、量值溯源、穩(wěn)定性及分裝與包裝條件等環(huán)節(jié)進(jìn)行全面技術(shù)審核和批準(zhǔn)。中檢所的藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)從1956年僅有3個(gè)品種,至2010年7月已達(dá)到2400多種(主要包括化學(xué)對(duì)照品1600余種,對(duì)照藥材600余種,生物制品標(biāo)準(zhǔn)品120種)。其中中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)為1086種,包括中藥化學(xué)對(duì)照品與對(duì)照藥材兩大類,目前中藥化學(xué)對(duì)照品為430種,中藥對(duì)照藥材已達(dá)到656種。中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)主要用于鑒別、含量測(cè)定及檢查用。中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)從建立至發(fā)展,中檢所經(jīng)過(guò)二十多年的努力,目前已建立了較完備的國(guó)家級(jí)天然產(chǎn)物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)庫(kù),不僅保證了國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施,基本滿足了中藥科研與新藥研制需求,同時(shí)也得到了WHO及有關(guān)國(guó)家的極大關(guān)注,對(duì)促進(jìn)我國(guó)中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、檢測(cè)水平的迅速提高,促進(jìn)傳統(tǒng)中藥的規(guī)范化生產(chǎn)以及中藥產(chǎn)業(yè)化、現(xiàn)代化的進(jìn)程做出了重要的貢獻(xiàn)。本文就中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的發(fā)展過(guò)程、現(xiàn)狀及今后面臨的問(wèn)題進(jìn)行分析,并提出發(fā)展思路,為中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的進(jìn)一步科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化提供參考。1中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)供給的總量中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的建立與發(fā)展與《中國(guó)藥典》的發(fā)展息息相關(guān),1985年版《中國(guó)藥典》首次在標(biāo)準(zhǔn)中收載了中藥化學(xué)對(duì)照品及對(duì)照藥材共76種,此后迅速增加(見(jiàn)表1)。同時(shí)衛(wèi)生部、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品標(biāo)準(zhǔn)(中藥成方制劑標(biāo)準(zhǔn)、新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)、中藥保健藥品轉(zhuǎn)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)升國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)等)收載使用中藥對(duì)照物質(zhì)的數(shù)量也顯著增加。中檢所為保障藥品標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行,自1988年供應(yīng)中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)76種,至2009年已達(dá)1086種(見(jiàn)表2),取得了顯著的社會(huì)效益。隨著2010年版《中國(guó)藥典》的執(zhí)行,預(yù)計(jì)2010～2011年中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)將會(huì)有更加突破性的發(fā)展。2中藥代動(dòng)力學(xué)技術(shù)的要求2.1鑒別用藥及檢驗(yàn)中藥化學(xué)對(duì)照品自1988年64個(gè)品種至2010年7月已有430種,因無(wú)相應(yīng)的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行量值溯源及輔佐證明,中檢所在研制中藥化學(xué)對(duì)照品過(guò)程中不斷累積經(jīng)驗(yàn),結(jié)合中藥藥品標(biāo)準(zhǔn)的要求,同時(shí)借鑒WHO關(guān)于化學(xué)對(duì)照品的指導(dǎo)原則,以保證量值的準(zhǔn)確與有效。目前中藥化學(xué)對(duì)照品根據(jù)用途主要分為3類:①鑒別用中藥化學(xué)對(duì)照品,主要用于中藥材、中藥飲片、中藥提取物及中成藥的薄層色譜、氣相色譜等色譜法鑒別項(xiàng)目,純度應(yīng)達(dá)到95%以上,未標(biāo)識(shí)量值;②含量測(cè)定用中藥化學(xué)對(duì)照品,用于中藥材、中藥飲片、中藥提取物及中成藥的紫外分光光度法、比色法、薄層掃描法、液相色譜法、氣相色譜法等測(cè)定用,標(biāo)示量值及使用前的處理方法。③雜質(zhì)檢查用中藥化學(xué)對(duì)照品,用于中藥材、中藥飲片、中藥提取物及中成藥等色譜法檢查雜質(zhì)、區(qū)分藥材品種或毒性成分的限量檢查等。中藥化學(xué)對(duì)照品定值過(guò)程中采用的標(biāo)定方法及測(cè)定項(xiàng)主要包括:①純度分析(TLC與HPLC同時(shí)測(cè)定);②結(jié)構(gòu)鑒定(包括紫外光譜、紅外光譜、質(zhì)譜、氫譜、碳譜);③理化分析(包括熔點(diǎn)、比旋度、熱分析、引濕性、熾灼殘?jiān)?、干燥失重與水分等項(xiàng));④定值項(xiàng)(質(zhì)量平衡法、外標(biāo)法、容量分析法、差示掃描量熱法等)。對(duì)于首次研制的品種上述測(cè)定項(xiàng)均為必做項(xiàng),為了保證其結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確,結(jié)構(gòu)鑒定中的光譜、質(zhì)譜及核磁項(xiàng)尤為重要。中藥化學(xué)對(duì)照品的定值主要采用質(zhì)量平衡法,即一個(gè)化學(xué)對(duì)照品的主成分、水分、有機(jī)溶劑、無(wú)機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)雜質(zhì)含量的總和應(yīng)為100.0%,其定值公式為:含量(%)=(100.0-水分-有機(jī)溶劑-無(wú)機(jī)雜質(zhì))×色譜純度×100%。為保證量值的準(zhǔn)確性,同時(shí)采用“④定值項(xiàng)”中的其他方法對(duì)質(zhì)量平衡法的量值進(jìn)行輔佐證明,并應(yīng)廣泛開(kāi)展協(xié)作標(biāo)定工作。2.2中藥對(duì)照藥材的標(biāo)定項(xiàng)目中藥對(duì)照藥材為已確認(rèn)品種的原生藥材粉末,是我國(guó)藥品檢驗(yàn)工作中按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定供薄層鑒別使用的另一類對(duì)照物質(zhì),主要用于中藥材、中藥飲片、中藥提取物、中成藥的薄層鑒別。對(duì)照藥材作為國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),對(duì)中藥材和中成藥檢驗(yàn)的規(guī)范化、專屬性與重現(xiàn)性,具有其他物質(zhì)不可替代的重要作用。自1988年16個(gè)品種至今已有656種,對(duì)照藥材品種增長(zhǎng)迅猛、使用廣泛。中藥對(duì)照藥材的標(biāo)定項(xiàng)目主要包括:①品種的確定:中藥對(duì)照藥材品種是依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中薄層鑒別項(xiàng)下規(guī)定使用的藥材品種而確定的,各品種均必須按規(guī)定鑒定植物種,以植物種確定發(fā)放的品種;②原料的采集與收集:對(duì)照藥材原料一般采用主流商品的道地藥材,符合GAP規(guī)范要求栽培的優(yōu)質(zhì)中藥材;③生藥學(xué)鑒定:對(duì)藥材進(jìn)行性狀、組織及粉末顯微鑒定,確定藥材的基原,須符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。④檢查項(xiàng):按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,除去雜質(zhì);⑤薄層測(cè)定項(xiàng):首先選擇標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的試驗(yàn)方法,其次再根據(jù)藥材的成分以不同于標(biāo)準(zhǔn)的提取方法或展開(kāi)條件進(jìn)行試驗(yàn)。被檢藥材必須檢出與對(duì)照藥材或標(biāo)本具有一致的色譜行為,主要化學(xué)成分若有已知的化學(xué)對(duì)照品,則應(yīng)與化學(xué)對(duì)照品具一致的色譜斑點(diǎn)。⑥含量測(cè)定項(xiàng):按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進(jìn)行含量測(cè)定,應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。通常首批建立的品種,一般以基原準(zhǔn)確、可靠的藥材標(biāo)本,或采集的植物標(biāo)本作對(duì)照,已知藥材所含的化學(xué)成分時(shí),盡可能同時(shí)以單體中藥化學(xué)對(duì)照品作對(duì)照,換批原料標(biāo)定,須以首批對(duì)照藥材作對(duì)照,薄層色譜結(jié)果必須與首批色譜一致,以保持對(duì)照藥材的延續(xù)性。2.3提取物制備工藝中藥對(duì)照提取物是一類非單體成分對(duì)照物,包括藥材提取對(duì)照物和揮發(fā)油對(duì)照物,用于薄層色譜法或其他色譜鑒別用。目前中檢所已發(fā)放了20種,品種有:銀杏葉對(duì)照提取物、穿龍薯蕷皂苷提取物、三七總皂苷、三七莖葉皂苷、人參莖葉皂苷、黃山藥皂苷提取物、金龍膽草提取物、荊芥油、生姜油、莪術(shù)油、八角茴香油、魚腥草油、牡荊油、小茴香油、紫蘇油、肉桂油、薄荷素油、烈香杜鵑油、月見(jiàn)草油、薏苡仁油。對(duì)照提取物的標(biāo)定要求:①原料的來(lái)源、提取部位及制備工藝應(yīng)明確;②主成分比例及含量相對(duì)固定(TLC、HPLC、GC);③理化特征換批間應(yīng)一致(溶解度、相對(duì)密度、折光率、旋光度等)。因目前對(duì)照提取物的品種數(shù)量少,尚未制定具體的技術(shù)細(xì)則。3目前，中國(guó)藥物的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)存在一些問(wèn)題3.1批量生產(chǎn)規(guī)模小我國(guó)現(xiàn)行國(guó)家藥典、部頒及局頒藥品標(biāo)準(zhǔn)收載了大量應(yīng)用中藥化學(xué)對(duì)照品及對(duì)照藥材的檢驗(yàn)項(xiàng)目。由于中藥品種繁多,成分復(fù)雜,從含量很低的藥材中提取、分離、制備標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),對(duì)分離、制備技術(shù)及成本要求很高,因此不能工業(yè)化批量生產(chǎn),每個(gè)批次制備規(guī)模小,可供應(yīng)的數(shù)量有限,存在供應(yīng)不足的問(wèn)題。另外,由于目前中檢所主要研制與供應(yīng)各類國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)涉及的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),對(duì)于產(chǎn)業(yè)研究、發(fā)展用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)并未涉及,因此在保障藥品檢驗(yàn)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究與提高等工作的前提下,中藥化學(xué)對(duì)照品的品種和數(shù)量不能滿足科研、新藥研制等諸多方面的要求。3.2級(jí)供應(yīng)為輔的模式國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的供應(yīng)多年來(lái)是采用中檢所(一級(jí)供應(yīng))為主,省、市藥品檢驗(yàn)所(二級(jí)供應(yīng))為輔的模式。近十年來(lái),藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)供應(yīng)的信息主要以電話咨詢?yōu)橹?工作量繁重,卻效率不高。由于部分中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)品種緊缺,受市場(chǎng)供求關(guān)系的驅(qū)動(dòng),存在一些單位或個(gè)人囤積、盲目提價(jià)的現(xiàn)象,給中檢所標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)供應(yīng)工作帶來(lái)了不良的社會(huì)影響。3.3中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量為保證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值準(zhǔn)確可靠,同時(shí)保證量值的有效傳遞,中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量(量值準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和均勻性)是中藥化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)工作者仍需深入研究和提高的內(nèi)容。4中藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的開(kāi)發(fā)4.1新增標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制和測(cè)定是提升我國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)在制定、審批的過(guò)程中,對(duì)于新增標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的建立應(yīng)評(píng)估其必要性,且應(yīng)遵循標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)適用性、代表性與易獲得性的原則,避免藥品標(biāo)準(zhǔn)獲得批準(zhǔn)后,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備困難、原料難以獲得、或原料成分過(guò)于昂貴,影響藥品標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行。新藥研制中新增標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)因《藥品注冊(cè)管理辦法》的要求,目前執(zhí)行良好?！端幤纷?cè)管理辦法》第五十六條明確規(guī)定:“申請(qǐng)人完成藥物臨床試驗(yàn)后,應(yīng)當(dāng)向所在地省、自治區(qū)、直轄市藥品監(jiān)督管理部門報(bào)送申請(qǐng)生產(chǎn)的申報(bào)資料,并同時(shí)向中國(guó)藥品生物制品檢定所報(bào)送制備標(biāo)準(zhǔn)品的原材料及有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研究資料”。然而近年來(lái),藥典修訂及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高行動(dòng)中對(duì)新增標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)則未制定相應(yīng)的建立原則,部分新增標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)存在研制困難的情況。今后需從標(biāo)準(zhǔn)制定時(shí)入手,對(duì)于含量很低,與療效、質(zhì)量相關(guān)性不高且不易獲得的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),建議國(guó)家藥典委員會(huì)評(píng)估其必要性,進(jìn)一步保證藥品標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行。4.2多指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)模型的建立中藥多成分的復(fù)雜性決定了單一成分或指標(biāo)難以客觀評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量,然而多指標(biāo)的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式,卻受到中藥化學(xué)對(duì)照品分離難度大、單體不穩(wěn)定或供應(yīng)價(jià)格高等因素的制約。2010年版《中國(guó)藥典》增加了指紋圖譜的質(zhì)量控制模式,指紋圖譜對(duì)于評(píng)價(jià)中藥原料藥材、半成品和成品質(zhì)量的均一性和穩(wěn)定性具有重要的意義,但是其屬性卻是“整體性”和“模糊性”。近年來(lái)多名學(xué)者提出了“一測(cè)多評(píng)”及“替代對(duì)照品”模式,即通過(guò)中藥有效成分間存在的內(nèi)在函數(shù)關(guān)系和比例關(guān)系,僅測(cè)定1～2個(gè)成分(對(duì)照品可以得到者),來(lái)實(shí)現(xiàn)多個(gè)成分(沒(méi)有對(duì)照品)的同步監(jiān)控。具體思路為:在多指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)時(shí),以藥材中某一典型組分(有對(duì)照品供應(yīng)者)為內(nèi)標(biāo),建立該組分與其他組分之間的相對(duì)校正因子,通過(guò)校正因子計(jì)算其他組分的含量。這種測(cè)定1個(gè)成分,實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)成分定量的方法,稱為“一測(cè)多評(píng)”。目前該方法的技術(shù)適用性和應(yīng)用的可行性仍需要進(jìn)行探索和科學(xué)的評(píng)價(jià)。4.3多個(gè)單體成分含量的對(duì)照提取物為盡量減少單體中藥化學(xué)對(duì)照品的使用,降低成本,今后應(yīng)開(kāi)發(fā)標(biāo)示多個(gè)單體成分含量的對(duì)照提取物,特別是對(duì)于不穩(wěn)定的單體成分和多個(gè)組分明確的對(duì)照提取物,如銀杏葉對(duì)照提取物等。在對(duì)照提取物標(biāo)定定值過(guò)程中大力開(kāi)展協(xié)作標(biāo)定,穩(wěn)定性核查,保證量值的準(zhǔn)確性。4.4組分提取物及藥材提取物目前中藥材標(biāo)準(zhǔn)中采用對(duì)照藥材與對(duì)照品進(jìn)行鑒別項(xiàng)測(cè)定,中成藥標(biāo)準(zhǔn)中采用多個(gè)品種對(duì)照藥材與對(duì)照品進(jìn)行鑒別項(xiàng)測(cè)定,提取過(guò)程繁瑣。在保證檢驗(yàn)質(zhì)量,簡(jiǎn)化工作量的前提下,應(yīng)開(kāi)發(fā)提取工藝、制備過(guò)程明確的組分提取物,以及藥材提取物,減少檢驗(yàn)過(guò)程