電針對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用

電針對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用

01摘要材料和方法引言參考內(nèi)容目錄030204摘要摘要目的：探討電針對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用。方法：通過復(fù)制局灶性腦缺血再灌注模型，觀察電針干預(yù)對(duì)大鼠神經(jīng)功能評(píng)分、腦梗死體積、血清中細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)的影響。摘要結(jié)果：與模型組比較，電針組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分降低(P<0.05)，腦梗死體積縮小(P<0.05)，血清中ICAM-1、腦組織中MDA、TNF-α、IL-1水平降低(P<0.05)，腦組織中SOD活性增強(qiáng)(P<0.05)。摘要結(jié)論：電針對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠具有神經(jīng)保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激有關(guān)。摘要關(guān)鍵詞：電針；局灶性腦缺血再灌注；神經(jīng)血管單元；保護(hù)作用；大鼠引言引言腦缺血再灌注損傷是臨床常見的病理過程，其發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，涉及多個(gè)因素，包括炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡等。近年來，神經(jīng)血管單元(neurovascularunit，NVU)在腦缺血再灌注損傷中的作用受到廣泛。神經(jīng)血管單元是由神經(jīng)元、血管內(nèi)皮細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞等組成的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，是腦組織能量代謝和信息傳遞的重要場所。引言在腦缺血再灌注過程中，神經(jīng)血管單元受損，導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)和功能紊亂，進(jìn)而引發(fā)神經(jīng)功能損傷和腦組織水腫。因此，保護(hù)神經(jīng)血管單元對(duì)于減輕腦缺血再灌注損傷具有重要意義。針灸是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的瑰寶，具有疏通經(jīng)絡(luò)、調(diào)和氣血等作用。近年來，越來越多的研究表明，針灸對(duì)腦缺血具有保護(hù)作用。本研究通過復(fù)制局灶性腦缺血再灌注模型，觀察電針對(duì)大鼠神經(jīng)血管單元的影響，旨在探討電針對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。材料和方法1、動(dòng)物1、動(dòng)物健康成年雄性SD大鼠72只，體重250～300g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供(許可證號(hào)：SCXK(京)2016-0017)。2、試劑和儀器2、試劑和儀器細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)試劑盒(批號(hào)：E03F01)、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒(批號(hào)：E02S02)、丙二醛(MDA)試劑盒(批號(hào)：E04G09)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)試劑盒(批號(hào)：E03T03)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)試劑盒(批號(hào)：E03C03)，均購自南京建成生物工程研究所；腦立體定位儀(型號(hào)：StoeltingCo，USA)、恒溫烙鐵(型號(hào)：MTM)、顯微鏡(型號(hào)：NikonCo.，Japan)、電熱恒溫干燥箱(型號(hào)：DHG-9070A)、全自動(dòng)酶標(biāo)儀(型號(hào)：MultiskanMK3)。3、造模3、造模大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表將其分為模型組和電針組，每組36只。參照文獻(xiàn)所述方法復(fù)制局灶性腦缺血再灌注模型：在大鼠腹腔注射10%水合氯醛(3mL/kg)進(jìn)行麻醉后，將其頭部固定于腦立體定位儀上，頭頂去毛，常規(guī)消毒，剝離顱骨骨膜并顯露右側(cè)大腦中動(dòng)脈起始段約1cm。用恒溫烙鐵加熱至45℃，持續(xù)30s后迅速移開烙鐵，形成局灶性腦缺血。3、造模缺血3h后恢復(fù)血供，即刻行為學(xué)表現(xiàn)為：對(duì)側(cè)前肢和對(duì)側(cè)后肢肌張力增高，提示神經(jīng)功能受損。蘇醒后，根據(jù)ZeaLonga神經(jīng)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分。排除死亡及評(píng)分不合格者，最終納入合格大鼠34只。4、干預(yù)4、干預(yù)電針組大鼠在蘇醒后立即進(jìn)行電針治療。參照文獻(xiàn)所述方法制備毫針：選用直徑為0.25mm、長為15mm的毫針，分別插入百會(huì)穴和足三里穴約5mm，與頭皮和腿部皮膚呈90°角刺入。參考內(nèi)容內(nèi)容摘要摘要：本研究旨在探討丁香酚對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其潛在機(jī)制。研究結(jié)果表明，丁香酚能顯著減輕大鼠腦缺血再灌注后的神經(jīng)損傷，減少腦組織中炎癥因子和氧化應(yīng)激反應(yīng)，具有良好的神經(jīng)保護(hù)作用。內(nèi)容摘要一、引言：腦缺血再灌注損傷是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，可導(dǎo)致腦組織損傷和功能障礙。炎癥和氧化應(yīng)激是腦缺血再灌注損傷發(fā)展的重要機(jī)制。丁香酚具有抗炎和抗氧化作用，但其在腦缺血再灌注損傷中的保護(hù)作用尚不清楚。本研究通過建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，探討丁香酚的神經(jīng)保護(hù)作用。內(nèi)容摘要二、材料與方法：1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組：成年健康雄性大鼠，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和丁香酚組。內(nèi)容摘要2、模型建立：大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，采用線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈，缺血2小時(shí)后恢復(fù)血流再灌注。內(nèi)容摘要3、藥物干預(yù)：丁香酚組在再灌注前30分鐘給予丁香酚腹腔注射（50mg/kg）。4、神經(jīng)功能評(píng)估：采用Longa評(píng)分評(píng)估大鼠神經(jīng)功能。4、神經(jīng)功能評(píng)估：采用Longa評(píng)分評(píng)估大鼠神經(jīng)功能。5、腦組織取樣：各組大鼠在再灌注24小時(shí)后斷頭取腦，制備腦組織勻漿，測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。4、神經(jīng)功能評(píng)估：采用Longa評(píng)分評(píng)估大鼠神經(jīng)功能。6、指標(biāo)檢測(cè)：采用ELISA法檢測(cè)腦組織中炎癥因子（TNF-α、IL-1β），比色法檢測(cè)氧化應(yīng)激指標(biāo)（ROS、MDA）。4、神經(jīng)功能評(píng)估：采用Longa評(píng)分評(píng)估大鼠神經(jīng)功能。7、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行處理，多組間比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)系數(shù)。4、神經(jīng)功能評(píng)估：采用Longa評(píng)分評(píng)估大鼠神經(jīng)功能。三、結(jié)果：1、神經(jīng)功能評(píng)估：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠Longa評(píng)分顯著升高；與模型組相比，丁香酚組評(píng)分降低（P<0.01）。表1：各組大鼠Longa評(píng)分比較（x±s）表1：各組大鼠Longa評(píng)分比較（x±s）2、炎癥因子與氧化應(yīng)激指標(biāo)：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠腦組織中TNF-α、IL-1β、ROS和MDA水平顯著升高；與模型組相比，丁香酚組上述指標(biāo)降低（P<0.01）。表2：各組大鼠炎癥因子與氧化應(yīng)激指標(biāo)比較（x±s）小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)保護(hù)作用的研究小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)保護(hù)作用的研究摘要：本次演示研究了小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠恢復(fù)早期的神經(jīng)保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。方法：采用改良的Longa線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、小續(xù)命湯組和陽性對(duì)照組。術(shù)后第3、7天進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，測(cè)定腦組織含水量和髓鞘堿性蛋白（MBP）小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)保護(hù)作用的研究含量；TUNEL法檢測(cè)凋亡細(xì)胞數(shù)；ELISA法測(cè)定血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）含量。結(jié)果：與模型組比較，小續(xù)命湯組大鼠在術(shù)后第3、7天的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分明顯升高（P<0.05），腦組織含水量和MBP含量明顯降低（P<0.05），凋亡細(xì)胞數(shù)減少（P<0.05），血清TNF-α和IL-1β含量降低（P<0.05）。結(jié)論：小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠具有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與抑制炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡有關(guān)。小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)保護(hù)作用的研究關(guān)鍵詞：小續(xù)命湯；局灶性腦缺血再灌注；神經(jīng)保護(hù)；細(xì)胞凋亡；炎癥反應(yīng)腦缺血再灌注損傷是腦缺血發(fā)生后恢復(fù)血流灌注所引起的一系列病理生理改變，其本質(zhì)是炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡。研究表明，炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡在腦缺血再灌注損傷中發(fā)揮重要作用。小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)保護(hù)作用的研究因此，尋找有效的藥物干預(yù)措施以減輕腦缺血再灌注損傷已成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。小續(xù)命湯是一種傳統(tǒng)中藥方劑，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)的功效，已被廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療。本實(shí)驗(yàn)通過觀察小續(xù)命湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）含量的影響，探討其神經(jīng)保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)制。材料和方法一、實(shí)驗(yàn)材料一、實(shí)驗(yàn)材料健康雄性SD大鼠90只，體重250～300g，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。制備方法：采用改良的Longa線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型。將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、小續(xù)命湯組和陽性對(duì)照組，每組20只。一、實(shí)驗(yàn)材料假手術(shù)組僅分離暴露頸外動(dòng)脈，不插線栓；模型組按Longa法插線栓，術(shù)后4h拔除線栓；小續(xù)命湯組和陽性對(duì)照組術(shù)后4h拔除線栓后分別給予小續(xù)命湯和尼莫地平灌胃。各組大鼠于術(shù)后第3、7天進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分后處死，取左側(cè)大腦半球測(cè)定腦組織含水量和髓鞘堿性蛋白（MBP）含量，取右側(cè)股靜脈采血測(cè)定血清TNF-α和IL-1β含量。二、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理二、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。結(jié)果以表示，采用單因素方差分析（ANOVA）進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。結(jié)果一、小續(xù)命湯對(duì)大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分的影響一、小續(xù)命湯對(duì)大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分的影響與模型組比較，小續(xù)命湯組大鼠在術(shù)后第3、7天的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分明顯升高（P<0.05），而陽性對(duì)照組與模型組相比無明顯差異（P>0.05）。結(jié)果見表1。二、小續(xù)命湯對(duì)大鼠腦組織含水量和MBP含量的影響二、小續(xù)命湯對(duì)大鼠腦組織含水量和MBP含量的影響與模型組比較，小續(xù)命湯組大鼠術(shù)后第3、7天的腦組織含水量明顯降低（P<0.05），MBP含量也較模型組顯著增高（P<0.05）。結(jié)果見表2。三、小續(xù)命湯對(duì)大鼠血清TNF-α和IL-1β含量的影響三、小續(xù)命湯對(duì)大鼠血清TNF-α和IL-1β含