實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)完整版

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化（質(zhì)量控制）遺傳質(zhì)量控制環(huán)境質(zhì)量控制微生物質(zhì)量控制營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量控制各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物特性及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法人類(lèi)疾病動(dòng)物模型免疫缺陷動(dòng)物動(dòng)物胚胎工程轉(zhuǎn)基因動(dòng)物及其他基因工程動(dòng)物一動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本概念三動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則四實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則五動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容二動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素提綱六動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)七影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素及其控制

生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究可分為整體水平、器官水平、細(xì)胞水平、亞細(xì)胞水平、分子水平等層次研究，一個(gè)課題可以?xún)H在一個(gè)水平層次進(jìn)行研究，但更多的是多個(gè)水平層次的綜合研究。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究是以整體水平層次為主的研究。一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本概念指研究者根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?，運(yùn)用有關(guān)科學(xué)知識(shí)和原理，結(jié)合統(tǒng)計(jì)分析及倫理學(xué)的要求而制定的在動(dòng)物身上進(jìn)行試驗(yàn)的實(shí)施計(jì)劃和方案，并用文字記錄或流程圖表述的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)路線(xiàn)。1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的定義動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果能否取得預(yù)期效果、達(dá)到研究目的很大程度上取決于研究者動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否科學(xué)、嚴(yán)密。一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本概念一些測(cè)試、檢驗(yàn)等的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法已經(jīng)被大家公認(rèn)成為常規(guī)，不需要進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。絕大部分研究課題需要研究者進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果能否取得預(yù)期效果、達(dá)到研究目的很大程度上取決于研究者動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否科學(xué)、嚴(yán)密。一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本概念處理因素受試對(duì)象實(shí)驗(yàn)效應(yīng)二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本要素

處理因素是實(shí)驗(yàn)中需進(jìn)行重點(diǎn)考察的內(nèi)容，處理因素不同，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也不同。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中處理因素應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)。在一次實(shí)驗(yàn)中處理因素不宜過(guò)多，也不應(yīng)過(guò)少。過(guò)多增加分析的難度，過(guò)少則實(shí)驗(yàn)結(jié)果蘊(yùn)藏的信息量不足。（1）處理因素二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，受試對(duì)象是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。根據(jù)研究課題不同，選擇適合本課題研究的動(dòng)物的種屬、品種品系、年齡、性別（體重）等，確定分組情況、每組的樣本量和受試對(duì)象總數(shù)。在一般情況下，應(yīng)優(yōu)先使用標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量。（2）受試對(duì)象二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素

實(shí)驗(yàn)效應(yīng)是指處理因素作用于受試對(duì)象后所起的作用，它通過(guò)觀(guān)察指標(biāo)來(lái)實(shí)現(xiàn)。觀(guān)察指標(biāo)分為主觀(guān)指標(biāo)和客觀(guān)指標(biāo)。為保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性和可比性，在選擇指標(biāo)時(shí)應(yīng)盡可能選擇客觀(guān)指標(biāo)，或盡可能將主觀(guān)指標(biāo)轉(zhuǎn)化成客觀(guān)指標(biāo)，并要求有一定的靈敏度和精確性。（3）實(shí)驗(yàn)效應(yīng)二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本要素對(duì)照性原則隨機(jī)性原則重復(fù)性原則一致性原則客觀(guān)性原則二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本原則包括：（1）對(duì)照性原則對(duì)照性原則是要求在實(shí)驗(yàn)中設(shè)立可與實(shí)驗(yàn)組比較，用以消除各種無(wú)關(guān)因素影響的對(duì)照組。對(duì)照應(yīng)有可比性：同時(shí)同地同條件二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則①

陰性對(duì)照組

陰性對(duì)照組包括空白對(duì)照組、正常對(duì)照組和假手術(shù)組，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體情況設(shè)置

（1）對(duì)照性原則例如：測(cè)定一種藥品對(duì)小鼠的作用，實(shí)驗(yàn)組小鼠的飼料中加了這種藥物，那就得在相同的實(shí)驗(yàn)條件下飼養(yǎng)一組不加藥品的小鼠作為陰性對(duì)照，這樣，如果出現(xiàn)了明顯的不同，說(shuō)明就是這種藥物導(dǎo)致的。陰性對(duì)照是用來(lái)排除其他實(shí)驗(yàn)因素對(duì)結(jié)果的影響。三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則②

陽(yáng)性對(duì)照組

陽(yáng)性對(duì)照組是用已知的能達(dá)到預(yù)期陽(yáng)性試驗(yàn)結(jié)果的處理因素作用于動(dòng)物，其余非處理因素應(yīng)與其它組一致。

（1）對(duì)照性原則陽(yáng)性對(duì)照組作用：一是檢驗(yàn)試驗(yàn)體系是否正確，如果陽(yáng)性對(duì)照未出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，就應(yīng)該檢查試驗(yàn)體系的哪個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題；二是以陽(yáng)性對(duì)照作為參照物，比較和評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)組的陽(yáng)性結(jié)果是高于還是低于陽(yáng)性對(duì)照。三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則（1）對(duì)照性原則③

實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（模型對(duì)照組）

實(shí)驗(yàn)對(duì)照組是指在研究過(guò)程中，給對(duì)照組施加部分處理因素，但不是被研究的處理因素。例如：為了研究某種藥物對(duì)某一病種或證型的治療作用，常常采用一定的動(dòng)物模型。對(duì)動(dòng)物模型的處理方法實(shí)驗(yàn)治療組和實(shí)驗(yàn)對(duì)照組完全相同，但是治療組給予藥物，而實(shí)驗(yàn)對(duì)照組不給藥物。三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則實(shí)驗(yàn)對(duì)照（1）對(duì)照性原則④

標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照組在以動(dòng)物為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組時(shí)，常設(shè)立一個(gè)不造模處理的正常對(duì)照組，即標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照組，在與實(shí)驗(yàn)組和治療組同樣的條件和環(huán)境中完全按常規(guī)飼養(yǎng)。例如：在老年病研究中，除了設(shè)立老年對(duì)照組外，還需設(shè)立一個(gè)青年對(duì)照組。青年對(duì)照組的動(dòng)物種類(lèi)、性別與老年對(duì)照組和治療組相同，只是月齡?。ǔ赡辏?。青年對(duì)照組相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照組，其實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)于老年對(duì)照組（模型對(duì)照組）而言，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)值或正常值。三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照有的實(shí)驗(yàn)還可設(shè)自身對(duì)照。自體對(duì)照可有效減少個(gè)體差異對(duì)試驗(yàn)處理反應(yīng)的影響。凡可進(jìn)行自身對(duì)照設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)應(yīng)盡量加以采用。同一個(gè)體身上觀(guān)察實(shí)驗(yàn)處理前后某種指標(biāo)的變化。同一動(dòng)物在施加實(shí)驗(yàn)因素的一側(cè)與不施加實(shí)驗(yàn)因素的另一側(cè)作左右的對(duì)照。在藥理學(xué)和毒理學(xué)試驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組還進(jìn)一步分成多個(gè)劑量組，以此觀(guān)察不同劑量的量效關(guān)系。不同劑量組也可互視為劑量對(duì)照組。（1）對(duì)照性原則三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則

隨機(jī)性原則就是按照機(jī)遇均等的原則來(lái)進(jìn)行分組。其目的是使一切干擾因素造成的實(shí)驗(yàn)誤差盡量減少，而不受實(shí)驗(yàn)者主觀(guān)因素或其他偏性誤差的影響。隨機(jī)化的手段可采用編號(hào)卡片抽簽法，隨機(jī)數(shù)字表或采用計(jì)算器的隨機(jī)數(shù)字鍵。（2）隨機(jī)性原則三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則重復(fù)性原則是指同一處理要設(shè)置多個(gè)樣本數(shù)。

重復(fù)的主要作用是估計(jì)試驗(yàn)誤差、降低試驗(yàn)誤差和增強(qiáng)代表性，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精確度，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果能在同一個(gè)體或不同個(gè)體中穩(wěn)定地重復(fù)出來(lái)。（3）重復(fù)性原則三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則一致性原則是指在實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組除了處理因素不同外，非處理因素基本保證均衡一致。均衡一致是處理因素具有可比性的基礎(chǔ)。（4）一致性原則非處理因素包括：實(shí)驗(yàn)對(duì)象：動(dòng)物種類(lèi)、品系、性別、年齡、體重等；實(shí)驗(yàn)條件：飼料種類(lèi)和飼養(yǎng)方式等；實(shí)驗(yàn)環(huán)境：實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度、氣壓、照度等；藥品：藥物廠(chǎng)商、批號(hào)、純度、劑型、劑量、給藥途徑、順序等；儀器、設(shè)備：儀器種類(lèi)、型號(hào)、靈敏度、精確度、電壓穩(wěn)定性等；操作人員：操作步驟熟練程度等。三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中要力戒主觀(guān)偏性干擾，選擇觀(guān)察指標(biāo)時(shí)，不用或盡量少用帶主觀(guān)成分的指標(biāo)。結(jié)果判斷要客觀(guān)，更不能以主觀(guān)的意愿對(duì)結(jié)果或數(shù)據(jù)作任意的改動(dòng)和取舍。（5）客觀(guān)性原則三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)基本原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則相似性原則特殊性原則標(biāo)準(zhǔn)化原則規(guī)格化原則經(jīng)濟(jì)化原則實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則包括：組織結(jié)構(gòu)：豬的皮膚系統(tǒng)機(jī)能：犬的血液循環(huán)和神經(jīng)系統(tǒng)生理特性：心率、呼吸頻率、體溫繁殖特性：性成熟、妊娠期、壽命體液成分：血液、尿液解剖特性：骨骼、臟器構(gòu)成與形態(tài)疾病特點(diǎn)：自發(fā)疾病四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則（1）相似性原則選用與人的機(jī)能、代謝、機(jī)構(gòu)和疾病特點(diǎn)相似的動(dòng)物。利用不同種系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體存在的特殊構(gòu)造或某些特殊反應(yīng)選擇解剖、生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵蟮膭?dòng)物。（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則1.恰當(dāng)?shù)厥褂镁哂心承┙馄蕦W(xué)特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物甲狀旁腺：（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則犬的甲狀旁腺位于甲狀腺的表面，位置比較固定，大多數(shù)在兩個(gè)甲狀腺相對(duì)應(yīng)的兩端下。家兔的甲狀旁腺分布得比較散，位置不固定，除甲狀腺周?chē)?，有的甚至分布到主?dòng)脈弓附近。

因此作甲狀旁腺摘除實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選用家犬而不能選用兔，但作甲狀腺摘除實(shí)驗(yàn)，為使摘除甲腺之后，還保留甲狀腺的功能，則應(yīng)選用兔而不能選用家犬。1.恰當(dāng)?shù)厥褂镁哂心承┙馄蕦W(xué)特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物減壓神經(jīng)：（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則家兔頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)和主動(dòng)脈減壓神經(jīng)是分別存在，獨(dú)立行走的。馬、牛、豬、狗、貓、蛙等其他動(dòng)物的減壓神經(jīng)并不單獨(dú)行走，而是行走于迷走、交感干或迷走神經(jīng)中。因此，如要觀(guān)察減壓神經(jīng)對(duì)心臟等作用時(shí)，就必須選用家兔。1.恰當(dāng)?shù)厥褂镁哂心承┙馄蕦W(xué)特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物膽囊：（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則一般實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均有膽囊，大鼠無(wú)膽囊，就不能用它來(lái)作膽囊功能的研究，而適合作膽管插管收集膽汁，進(jìn)行消化功能的研究。2.恰當(dāng)?shù)厥褂镁哂心承┥韺W(xué)特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠：垂體－腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達(dá)、踝關(guān)節(jié)對(duì)炎癥反應(yīng)敏感豚鼠：過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)研究、體內(nèi)不能合成Vc家兔：體溫變化十分靈敏鴿子、家犬、猴和貓：嘔吐反應(yīng)敏感，適作嘔吐實(shí)驗(yàn)（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則3.同種藥物或化合物，在不同種系動(dòng)物上引起的反應(yīng)是存在很大差異的雌激素：終止大鼠和小鼠的早期妊娠嗎啡：犬、兔、猴和人中樞抑制

小鼠和貓中樞興奮（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則4.不同品系動(dòng)物對(duì)同一刺激的反應(yīng)差異很大噪音刺激：DBA小鼠對(duì)噪音非常敏感，發(fā)作性痙攣，死亡；

C57BL小鼠卻根本不會(huì)出現(xiàn)這種反應(yīng)致癌因素：A、C3H、津白Ⅱ等品系小鼠易致癌C57、C58、津白Ⅰ等品系不易致癌AKR小鼠白血病自發(fā)率可達(dá)65％

C3H雌鼠乳腺癌自發(fā)率可達(dá)90％（2）特殊性原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中選擇和使用與研究?jī)?nèi)容相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。（3）標(biāo)準(zhǔn)化原則

遺傳質(zhì)量控制微生物質(zhì)量控制環(huán)境質(zhì)量控制營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量控制四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則選擇與實(shí)驗(yàn)要求一致的動(dòng)物規(guī)格。年齡犬齡2m6m1y2y3y4y5y10y15y人類(lèi)1y5y14y24y30y36y41y65y87y（4）規(guī)格化原則性別生理及健康狀態(tài)四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則盡量選用容易獲得、價(jià)格便宜和飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)的動(dòng)物。（5）經(jīng)濟(jì)化原則四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇的基本原則1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前應(yīng)考慮的問(wèn)題五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容(1)動(dòng)物福利和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理問(wèn)題

在進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前，實(shí)驗(yàn)者必須思考：①這個(gè)實(shí)驗(yàn)是否一定要用動(dòng)物才能達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?？是否可用其它試?yàn)方法來(lái)代替？②如果實(shí)驗(yàn)必須要在動(dòng)物身上進(jìn)行，那么應(yīng)該如何善待動(dòng)物，在實(shí)驗(yàn)中減輕動(dòng)物的痛苦和不安？1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前應(yīng)考慮的問(wèn)題五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容(1)動(dòng)物福利和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理問(wèn)題

實(shí)驗(yàn)者必須提出令人信服的理由證明這個(gè)實(shí)驗(yàn)必須要用動(dòng)物做，而且在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中采取了善待動(dòng)物和減輕動(dòng)物痛苦的具體措施，并承諾本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法和目的符合人類(lèi)的道德倫理標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)際慣例，在動(dòng)物試驗(yàn)期間遵守有關(guān)的法規(guī)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理福利原則和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度。

1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前應(yīng)考慮的問(wèn)題五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容(2)實(shí)驗(yàn)條件問(wèn)題

實(shí)驗(yàn)者必須了解進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)的所有條件是否均已具備，如相應(yīng)的動(dòng)物設(shè)施、動(dòng)物來(lái)源、儀器設(shè)備、試劑、人員、技術(shù)熟練程度等，這些實(shí)驗(yàn)條件的描述將充分體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)方案中。1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)前應(yīng)考慮的問(wèn)題五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容(3)經(jīng)費(fèi)預(yù)算問(wèn)題

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是需要經(jīng)費(fèi)支持的，一般來(lái)說(shuō)，同一課題經(jīng)費(fèi)不同，所選擇的實(shí)驗(yàn)條件會(huì)不同，研究的層次也會(huì)不同。本著節(jié)約經(jīng)費(fèi)的原則，有多少經(jīng)費(fèi)做多少事情，量入為出。特別注意的是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)發(fā)生很多不可預(yù)見(jiàn)的意外，增加額外的經(jīng)費(fèi)。充分估計(jì)到各種情況就能保證實(shí)驗(yàn)方案的順利實(shí)施。2.實(shí)驗(yàn)方案的制定五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容一個(gè)完整的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案應(yīng)包括以下內(nèi)容：(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬、品種品系、性別、年齡（體重）的選擇；(2)實(shí)驗(yàn)組數(shù)的確定；(3)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組設(shè)計(jì)的基本類(lèi)型；(單組比較設(shè)計(jì)、完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)、隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)、配對(duì)設(shè)計(jì)）(4)每組樣本量的確定；(5)實(shí)驗(yàn)處理方法的選定；(6)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的選定；(7)實(shí)驗(yàn)周期的確定。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定每組的樣本量反映了同一處理的重復(fù)個(gè)數(shù)。樣本量過(guò)小，抽樣誤差大，不易發(fā)現(xiàn)實(shí)際存在的差異，得不出統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的結(jié)論；樣本量過(guò)大，不符合動(dòng)物福利的原則，也浪費(fèi)人力、物力和財(cái)力。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定一般情況下嚙齒類(lèi)大小鼠實(shí)驗(yàn)分組每組10-20只，雌雄各半即可滿(mǎn)足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的要求；大動(dòng)物如兔、犬和豬的實(shí)驗(yàn)一般每組6-10只。

在實(shí)際工作中，因一批動(dòng)物中個(gè)別不均一性而剔出、實(shí)驗(yàn)人員操作技術(shù)不熟練或技術(shù)復(fù)雜、毒性實(shí)驗(yàn)中致動(dòng)物死亡等的情況屢有發(fā)生，因而實(shí)際使用的動(dòng)物數(shù)量應(yīng)比理論計(jì)算的樣本量要適當(dāng)增加。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定實(shí)驗(yàn)處理包括處理因素、處理時(shí)間、次數(shù)、強(qiáng)度（劑量）、途徑等，這些都要在實(shí)驗(yàn)方案中確定下來(lái)。實(shí)驗(yàn)處理方法選定

由于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)幾乎涉及到基礎(chǔ)和臨床各個(gè)學(xué)科，不同的研究有不同的目的和要求，所用的試驗(yàn)方法、儀器設(shè)備和指標(biāo)也各不相同，但無(wú)論選擇何種實(shí)驗(yàn)方法，均應(yīng)力求做到以下幾點(diǎn)：(1)可靠性：即方法切實(shí)可行、指標(biāo)穩(wěn)定可靠，是受大家公認(rèn)的方法，也稱(chēng)經(jīng)典方法。(2)客觀(guān)性：盡量選用儀器設(shè)備檢測(cè)，避免主觀(guān)描述；能定量的就不要選用定性指標(biāo)。(3)先進(jìn)性：當(dāng)今重大科研成果的出現(xiàn)幾乎都利用了先進(jìn)的儀器設(shè)備、技術(shù)和檢測(cè)指標(biāo)，將整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與細(xì)胞水平、分子水平檢測(cè)指標(biāo)結(jié)合起來(lái)進(jìn)行綜合分析。因此充分利用本單位或其它單位的先進(jìn)儀器設(shè)備為自己的課題服務(wù)對(duì)于提升課題的級(jí)別，提高試驗(yàn)質(zhì)量有著重要意義。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定實(shí)驗(yàn)處理包括處理因素、處理時(shí)間、次數(shù)、強(qiáng)度（劑量）、途徑等，這些都要在實(shí)驗(yàn)方案中確定下來(lái)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指標(biāo)一般包括兩部分：試驗(yàn)期間活體觀(guān)察指標(biāo)和處死觀(guān)察指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的選定五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定（1）實(shí)驗(yàn)期間活體觀(guān)察指標(biāo)：一般觀(guān)察指標(biāo)：動(dòng)物的精神、行為、營(yíng)養(yǎng)、被毛、攝食情況、大小便及口鼻耳陰部分泌物等,一般無(wú)需驚動(dòng)動(dòng)物；無(wú)創(chuàng)傷性測(cè)定指標(biāo)：心電圖、血壓、呼吸、自主活動(dòng)等測(cè)試，有的需要無(wú)線(xiàn)遙控設(shè)備。無(wú)線(xiàn)遙控?zé)o創(chuàng)傷觀(guān)察測(cè)試可避免干擾動(dòng)物，減少動(dòng)物應(yīng)激，因而測(cè)試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、可靠；創(chuàng)傷性測(cè)定指標(biāo)：手術(shù)、取血取材等，對(duì)動(dòng)物長(zhǎng)期觀(guān)察忽多忽少產(chǎn)生影響。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要考慮研究團(tuán)隊(duì)有無(wú)技術(shù)基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)條件，以及評(píng)估創(chuàng)傷性試驗(yàn)對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的選定五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定（2）處死觀(guān)察指標(biāo)：測(cè)試涉及到麻醉、取全血/血漿/血清、臟器稱(chēng)重、病理組織取材及固定等一系列步驟，可依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)指標(biāo)選擇部分或全部進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)處理方法和指標(biāo)的選定五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容2.實(shí)驗(yàn)方案的制定實(shí)驗(yàn)周期的確定

一個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)周期要持續(xù)多長(zhǎng)時(shí)間取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮褪欠衲軓膭?dòng)物實(shí)驗(yàn)中得到所需要的試驗(yàn)結(jié)果。例如，用兔制作動(dòng)脈粥樣硬化模型，飼喂高脂、高膽固醇飼料后一個(gè)半月，兔的主動(dòng)脈上可產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)粥樣斑塊，表明造模成功。如果此時(shí)用藥物干預(yù)治療，還需要再增加4周以上治療時(shí)間，總的實(shí)驗(yàn)周期在3個(gè)月左右。在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中需參照文獻(xiàn)報(bào)道或根據(jù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)，或通過(guò)預(yù)試驗(yàn)摸索。3.藥物劑量的設(shè)計(jì)和換算準(zhǔn)確的劑量設(shè)計(jì)對(duì)試驗(yàn)的成功起著重要的作用。如果研究的是一種新藥，沒(méi)有臨床資料和動(dòng)物試驗(yàn)資料，那么只能通過(guò)設(shè)置多個(gè)劑量進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)摸索。如果有人的臨床用藥劑量或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)參考劑量，那么可轉(zhuǎn)換成不同動(dòng)物的等效劑量。研究證明藥物的等效劑量不是與動(dòng)物的體重成正比的，而是與單位體重體表面積成正比的，因此小動(dòng)物的等效劑量往往是人的數(shù)倍。五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容種屬小鼠b（0.02）大鼠b(0.150)地鼠b(0.080)豚鼠b(0.4)兔b(1.8)比格犬b(10.0)獼猴b(3.0)成人b(60.0)小鼠a1.000.500.600.3750.250.1500.250.081大鼠a2.001.001.200.750.500.300.500.162地鼠a1.671.201.000.6250.4170.250.4170.135豚鼠a2.671.331.601.000.6670.400.6670.216兔a4.002.002.401.501.000.601.000.324比格犬a(chǎn)6.673.334.002.501.671.001.670.541獼猴a4.002.002.401.501.000.601.000.324人a12.336.177.404.633.081.853.081.00注：引自黃繼漢等,藥理試驗(yàn)中動(dòng)物間和動(dòng)物與人間的等效劑量換算.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué).2004,9(9):1069-1072。括號(hào)中數(shù)值單位為kg。標(biāo)準(zhǔn)體重動(dòng)物由動(dòng)物a到動(dòng)物b的mg/kg換算系數(shù)五、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要內(nèi)容六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)1.知識(shí)和技術(shù)的準(zhǔn)備1.

掌握有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面的基礎(chǔ)知識(shí)2.掌握有關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)方面的基本技術(shù)。2.實(shí)驗(yàn)條件的準(zhǔn)備準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)儀器、藥品、試劑和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等，盡可能使實(shí)驗(yàn)手段和實(shí)驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)化。六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)了解和熟悉進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的各項(xiàng)規(guī)章制度，并嚴(yán)格遵守這些規(guī)章制度。3.應(yīng)注意以下幾個(gè)方面問(wèn)題：六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行咨詢(xún)和預(yù)約登記，如實(shí)申報(bào)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的名稱(chēng)、課題來(lái)源、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的起止日期、所用動(dòng)物的品種品系、等級(jí)、數(shù)量、年齡、性別等，并說(shuō)明供試品是否有毒、有害、有感染性或放射性等、實(shí)驗(yàn)的特殊條件和要求，以求得與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室進(jìn)行溝通，落實(shí)動(dòng)物到達(dá)時(shí)間，安排飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所。3.應(yīng)注意以下幾個(gè)方面問(wèn)題：六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)對(duì)于有毒、有害、有感染性或放射性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在相應(yīng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施設(shè)備內(nèi)進(jìn)行，并執(zhí)行有關(guān)的規(guī)章制度。3.應(yīng)注意以下幾個(gè)方面問(wèn)題：六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)由于屏障系統(tǒng)管理嚴(yán)格，為防止病原微生物的帶入，從屏障系統(tǒng)內(nèi)拿出的動(dòng)物不允許再進(jìn)入屏障系統(tǒng)，因此動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中所需的儀器設(shè)備需在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室的指導(dǎo)下經(jīng)消毒后方可帶入屏障系統(tǒng)。3.應(yīng)注意以下幾個(gè)方面問(wèn)題：4.預(yù)實(shí)驗(yàn)預(yù)實(shí)驗(yàn)是實(shí)驗(yàn)者在正式實(shí)驗(yàn)前對(duì)實(shí)驗(yàn)方法和條件以及實(shí)驗(yàn)對(duì)象磨合為一個(gè)整體的過(guò)程，是正式實(shí)驗(yàn)前的模擬或者演習(xí)。預(yù)備實(shí)驗(yàn)可使用少量動(dòng)物進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)方法和觀(guān)測(cè)指標(biāo)應(yīng)和正式試驗(yàn)一樣。但是，預(yù)備實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不能歸入正式試驗(yàn)的最后結(jié)果中一同分析。六、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與預(yù)實(shí)驗(yàn)R=(A+B+C)×D+E。其中：R：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng)；A：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種的共同反應(yīng)；B：動(dòng)物品種及品系特有的反應(yīng)；C：動(dòng)物個(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）；D：環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理）；E：實(shí)驗(yàn)誤差遺傳營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境、微生物等R=遺傳影響因素×環(huán)境影響因素+實(shí)驗(yàn)誤差七、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素及其控制七、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素及其控制1.動(dòng)物因素(1)動(dòng)物品種、品系的選擇對(duì)藥物的反應(yīng)：不同種屬動(dòng)物對(duì)藥物的反應(yīng)有差異藥物名反應(yīng)催吐藥大鼠、小鼠、豚鼠和兔不產(chǎn)生嘔吐；貓、犬和人則容易產(chǎn)生嗎啡對(duì)狗、兔、猴、大鼠和人主要作用是中樞抑制；對(duì)小鼠和貓主要作用是興奮安妥明（降血脂藥）可使犬下肢癱瘓；對(duì)猴及其它動(dòng)物不引起副作用鶴草酚（驅(qū)絳蟲(chóng)及血吸蟲(chóng)）可損害狗的視神經(jīng)并引起失明；對(duì)猴沒(méi)有這些副作用醋酸棉酚（男用避孕藥）小鼠不敏感；大鼠、地鼠敏感氯苯氧異丁酸乙酯（降膽固醇藥）對(duì)犬的毒性較大；對(duì)大鼠、猴和人的毒性不大碘吸收大鼠吸收較快；兔和豚鼠較慢排泄過(guò)程巴比妥：大鼠3d排泄90%；雞7d排泄33%。對(duì)雞毒性大作用時(shí)間氯霉素：在大鼠體內(nèi)主要隨膽汁排泄，存在腸循環(huán)現(xiàn)象，半衰期較短，藥物作用時(shí)間的長(zhǎng)短就有差異代謝過(guò)程磺胺類(lèi)藥：犬不乙?；?，以原型從尿排出；兔和豚鼠乙?；ニ幮?，毒性增加；在人體內(nèi)部分乙?；蟛糠峙c葡萄糖醛酸結(jié)合，隨尿排出組織胺豚鼠支氣管痙攣窒息死亡；兔收縮血管右心衰竭死亡代謝率小鼠＞鴿＞豚鼠＞大鼠＞豬、牛七、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素及其控制1.動(dòng)物因素(1)動(dòng)物品種、品系的選擇藥物代謝動(dòng)力學(xué)七、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素及其控制1.動(dòng)物因素(1)動(dòng)物品種、品系的選擇藥物代謝動(dòng)力學(xué)動(dòng)物樣本數(shù)與人相似度很相似相似有些相似猴3138.7%(12/31)48.4%(15/31)12.9%(4/31)犬3218.7%(6/32)37.5%(12/32)43.8%(14/32)大鼠313.2%(1/31)41.9%(13/31)54.8%(17/31)猴、犬、大鼠與人在藥物代謝方面的相似性藥物代謝與人相似度：猴>犬>大鼠苯兔白細(xì)胞減少，造血器官損害；犬白細(xì)胞增多，脾、淋巴結(jié)增生苯胺及其衍生物犬、貓和豚鼠能引起與人相似的病理變化，產(chǎn)生