《臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)》

臨床檢驗(yàn)根底1編輯課件第一章血液一般檢驗(yàn)皖北衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院王玲玲2編輯課件第一節(jié)血液標(biāo)本采集與處理一血液標(biāo)本類型

二血液標(biāo)本抗凝劑與添加劑

三血液標(biāo)本采集

四血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理

3編輯課件1．全血2．血漿主要用于化學(xué)和凝血工程檢測(cè)等。3．血清主要用于化學(xué)和免疫學(xué)等工程檢測(cè)。血清與血漿比較，主要是前者缺乏纖維蛋白原及某些凝血因子。4．血細(xì)胞靜脈全血?jiǎng)用}全血末梢全血一、血液標(biāo)本類型靜脈全血?jiǎng)用}全血末梢全血4編輯課件血液標(biāo)本添加劑抗凝劑別離膠促凝劑二、血液標(biāo)本抗凝劑與添加劑5編輯課件我是血漿，還是血清呢？抗凝：采用物理或化學(xué)的方法去除或抑制某種凝血因子的活性，以阻止血液凝固的方法稱為抗凝?？鼓齽耗軌蜃柚寡耗痰幕瘜W(xué)物質(zhì)稱為抗凝劑〔anticoagulant〕或抗凝物質(zhì)。〔一〕抗凝劑血細(xì)胞6編輯課件〔一〕抗凝劑常用抗凝劑7編輯課件〔二〕添加劑其它常用添加劑8編輯課件

血液標(biāo)本采集靜脈采血法皮膚采血法動(dòng)脈采血法三、血液標(biāo)本采集9編輯課件〔一〕皮膚采血法皮膚采血法，又稱毛細(xì)血管采血法，主要用于需要微量血液檢驗(yàn)工程和嬰幼兒血常規(guī)檢驗(yàn)。1、采血針皮膚采血法〔1〕主要器材：一次性采血針、微量吸管、消毒用品等。一次性采血針10編輯課件〔一〕皮膚采血法〔2〕采血部位：一般采用手指指端或耳垂，嬰幼兒可選擇??趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣。世界衛(wèi)生組織〔WHO〕推薦采血部位為左手中指或無(wú)名指指端內(nèi)側(cè)。選擇皮膚完好處采血。11編輯課件〔一〕皮膚采血法材料準(zhǔn)備（3）簡(jiǎn)要操作

選擇采血部位按摩消毒針刺吸血止血（3）簡(jiǎn)要操作

12編輯課件〔一〕皮膚采血法〔4〕本卷須知：①采血時(shí)必須注意嚴(yán)格消毒和生物平安防范。②采血針應(yīng)為一次性使用的“專用采血針〞，針刺深度以2～3mm為宜。③取血時(shí)可稍加擠壓，但切忌用力過(guò)大，以免使過(guò)多組織液混入血液中。④采血要迅速，防止流出的血液發(fā)生凝固。⑤手工法血液標(biāo)本采集順序?yàn)椋貉“逵?jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、血型鑒定等。其他，激光皮膚采血法13編輯課件〔二〕靜脈采血法靜脈采血法臨床應(yīng)用廣泛，所采集的靜脈血能準(zhǔn)確反映全身血液的真實(shí)情況，因其不易受氣溫和末梢循環(huán)變化的影響，更具有代表性。普通采血法負(fù)壓采血法1、普通采血法即傳統(tǒng)的靜脈采血方法。〔1〕主要器材：注射器、試管、消毒用品等。普通采血法負(fù)壓采血法14編輯課件〔二〕靜脈采血法〔2〕采血部位：通常采用肘部靜脈。當(dāng)肘部靜脈不明顯時(shí)，可采用手背部、手腕部和外踝部靜脈。幼兒可采用頸外靜脈采血，其它：股靜脈、大隱靜脈及鎖骨下靜脈等。肘部靜脈15編輯課件〔二〕靜脈采血法材料準(zhǔn)備〔3〕簡(jiǎn)要操作選擇靜脈扎壓脈帶消毒穿刺抽血止血放血與混勻16編輯課件〔二〕靜脈采血法〔4〕本卷須知：①根據(jù)檢驗(yàn)工程判斷所需采血量，選擇注射器。②嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。③采血時(shí)切忌將針?biāo)ㄍ赝?，以免注射器中的空氣進(jìn)入血循環(huán)形成氣栓。④為防止溶血，注射器和容器必須枯燥，抽血時(shí)應(yīng)防止產(chǎn)生大量氣泡，抽血完畢后應(yīng)先拔下針頭，然后將血液沿管壁徐徐注入容器，需要抗凝時(shí)應(yīng)與抗凝劑輕輕混勻，切忌用力振蕩試管。⑤進(jìn)行血小板功能試驗(yàn)，為了防止血小板激活，須使用塑料注射器或經(jīng)硅化處理后的玻璃試管或塑料試管。⑥采血一般取坐位或臥位，不能立位采血，因?yàn)轶w位影響水分在血管內(nèi)外的分布，影響被測(cè)血液成分的濃度。⑦壓脈帶捆扎時(shí)間不應(yīng)超過(guò)1分鐘，否那么會(huì)使血液成分濃度發(fā)生改變。17編輯課件〔二〕靜脈采血法2、負(fù)壓采血法又稱為真空采血法?！?〕主要器材：負(fù)壓采血系統(tǒng)雙向采血針真空采血管

套管式一次性采血針頭皮靜脈式一次性采血針〔2〕采血部位：同普通采血法。18編輯課件〔二〕靜脈采血法材料準(zhǔn)備〔3〕簡(jiǎn)要操作選擇靜脈扎壓脈帶消毒穿刺針端穿刺混勻或不混勻血液退出刺塞針端針頭刺塞針端刺入采血管止血退出穿刺針端針頭19編輯課件〔二〕靜脈采血法〔4〕本卷須知：①使用前切勿松動(dòng)或拔除采血管的膠塞頭蓋。②刺塞針端的乳膠套能防止拔除采血試管后繼續(xù)流血污染周圍環(huán)境，到達(dá)封閉采血防止污染環(huán)境的作用，因此不可取下乳膠套。③采血完畢后，先拔下刺塞針端的采血試管，后拔穿刺針端。④一次采血，使用玻璃采血管多管采集血液標(biāo)本的分配順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)管、無(wú)抗凝劑血清管、枸櫞酸鈉抗凝管、其他抗凝劑管；使用塑料采血管分配順序：血培養(yǎng)管〔黃色〕、枸櫞酸鈉抗凝管〔藍(lán)色〕、加或未加促凝劑或別離膠的血清管、加或未加別離膠的肝素管〔綠色〕、EDTA抗凝管〔紫色〕、加葡萄糖分解抑制劑管〔灰色〕。20編輯課件〔三〕動(dòng)脈采血法1．主要器材：2ml或5ml注射器〔準(zhǔn)備l000U/ml無(wú)菌肝素生理鹽水溶液，以濕潤(rùn)注射器內(nèi)腔、橡皮塞〕，或一次性動(dòng)脈采血針、消毒用品等。2．采血部位多項(xiàng)選擇用橈動(dòng)脈〔最方便〕股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈。3．簡(jiǎn)要操作橈動(dòng)脈采血21編輯課件〔三〕動(dòng)脈采血法4.本卷須知：①隔絕空氣：用于血?dú)夥治龅臉?biāo)本，采集后先立即封閉針頭斜面，再混勻標(biāo)本。②立即送檢：標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，否那么應(yīng)將標(biāo)本置于2～6℃保存，但保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)2小時(shí)。③防止血腫：采血完畢，拔出針頭后，用消毒干棉簽用力按壓采血處止血，以防形成血腫。22編輯課件血液標(biāo)本預(yù)處理與保存檢驗(yàn)后保存與處理運(yùn)送接受與拒收四、血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理23編輯課件（一）血液標(biāo)本運(yùn)送生物平安原那么唯一標(biāo)識(shí)原那么及時(shí)運(yùn)送原那么四、血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理24編輯課件抗凝標(biāo)本凝固〔二〕血液標(biāo)本拒收采集容器不當(dāng)

標(biāo)本污染、容器破損

申請(qǐng)單和標(biāo)本標(biāo)識(shí)不一致

采血量缺乏或錯(cuò)誤溶血轉(zhuǎn)運(yùn)條件不當(dāng)

抗凝劑使用錯(cuò)誤

四、血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理25編輯課件預(yù)處理：血常規(guī)檢測(cè)：室溫存放血漿：可通過(guò)離心抗凝血獲得血漿；血清：對(duì)未含促凝劑或別離膠采血管的血液標(biāo)本置于37℃孵育，待血液完全凝固后離心別離血清；含促凝劑或別離膠采血管的血液標(biāo)本可直接離心別離血清；對(duì)于需要特定細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)根據(jù)要求采用不同的細(xì)胞別離液或別離技術(shù)別離細(xì)胞，同時(shí)盡量防止混入其他細(xì)胞。四、血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理〔三〕血液標(biāo)本預(yù)處理與保存26編輯課件保存：1．別離后標(biāo)本①不能及時(shí)檢驗(yàn)或需保存標(biāo)本，一般應(yīng)將標(biāo)本置于4℃冰箱內(nèi)保存。②標(biāo)本需保存至少1個(gè)月時(shí)，放置于-20℃冰箱內(nèi)保存。③標(biāo)本需保存至少3個(gè)月時(shí)，別離后置于-70℃冰箱保存。④標(biāo)本存放時(shí)需要密封，以免水分揮發(fā)而使標(biāo)本濃縮。⑤標(biāo)本應(yīng)防止反復(fù)凍融。2．立即送檢標(biāo)本如血氨〔密封送檢〕、紅細(xì)胞沉降率、血?dú)夥治觥裁芊馑蜋z〕、酸性磷酸酶、乳酸等標(biāo)本。四、血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理27編輯課件四、血液標(biāo)本運(yùn)送、保存與處理〔四〕血液標(biāo)本檢驗(yàn)后保存與處理血液一般分析標(biāo)本：室溫24小時(shí)后處理，一般生化檢驗(yàn)工程：4℃存放7天后處理，特殊檢驗(yàn)工程：吸出血清或血漿-20℃冰箱內(nèi)保存1個(gè)月以上。保存檢驗(yàn)標(biāo)本時(shí)應(yīng)包括標(biāo)本信息的保存，且與別離的血漿或血清標(biāo)本相對(duì)應(yīng)。保存原那么是在有效的保存期內(nèi)確保被檢測(cè)物質(zhì)不會(huì)發(fā)生明顯改變。檢驗(yàn)后廢棄的血液標(biāo)本處理嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)?實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求?〔GB19489-2004〕，由專人負(fù)責(zé)處理，根據(jù)?醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例?規(guī)定使用專用的容器或袋子包裝，由專人送到指定的地點(diǎn)集中處理。檢驗(yàn)后廢棄的血液標(biāo)本一般由專門機(jī)構(gòu)采用燃燒的方法處理。處理保存28編輯課件〔一〕檢驗(yàn)申請(qǐng)〔二〕患者準(zhǔn)備五、血液標(biāo)本采集、運(yùn)送與保存質(zhì)量保證〔三〕標(biāo)本采集〔四〕標(biāo)本運(yùn)送29編輯課件第二節(jié)血涂片的制備與染色一血涂片制備二血涂片染色30編輯課件第二節(jié)血涂片的制備與染色推片載玻片血液將推片勻速向前，勿停頓。涂片的厚薄取決于速度和角度：快、大(厚)。慢、小〔薄〕一張滿意的血涂片應(yīng)厚薄均勻頭體尾鮮明涂片枯燥后用鉛筆在血涂片的頭部寫上姓名和編號(hào)李四B12331編輯課件第二節(jié)血涂片的制備與染色良好血液涂片標(biāo)準(zhǔn)厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細(xì)胞分布要均勻，血膜邊緣要整齊，并留有一定的空隙。32編輯課件引起血涂片分布不均的主要原因：推片邊緣不整齊用力不均勻載片不清潔第二節(jié)血涂片的制備與染色33編輯課件二、血涂片染色(一)瑞氏染色法(Wright'sstain)1.瑞氏染料〔復(fù)合染料〕酸性染料伊紅(E-)堿性染料亞甲藍(lán)(M+，又名美藍(lán))美藍(lán)容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級(jí)染料(即天青)，甲醇的作用：①溶解美藍(lán)和伊紅，解離為M+和E-；②脫水作用，固定細(xì)胞形態(tài)，增強(qiáng)染色效果第二節(jié)血涂片的制備與染色34編輯課件第二節(jié)血涂片的制備與染色2．染色原理

是染料透入被染物并存留其內(nèi)部的一種過(guò)程。①物理的吸附作用②化學(xué)的親和作用嗜酸性顆?！獕A性——與酸性染料——粉紅色；細(xì)胞核蛋白——酸性——與堿性染料——紫藍(lán)色或藍(lán)色；中性顆粒——等電狀態(tài)——與伊紅和美藍(lán)——染淡紫紅色。35編輯課件第二節(jié)血涂片的制備與染色勿沖洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后將Ⅰ液和Ⅱ液充分混勻靜置10分鐘直接流水沖洗3-5分鐘〔切勿先倒掉染液〕涂片經(jīng)水洗枯燥后用油鏡分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞李四123涂片枯燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴覆蓋整個(gè)血膜1分鐘36編輯課件3.pH值的影響細(xì)胞各種成分均屬蛋白質(zhì)〔兩性電解質(zhì)〕第二節(jié)血涂片的制備與染色37編輯課件第二節(jié)血涂片的制備與染色

染色所用玻片必須清潔，無(wú)酸堿污染。配制瑞氏染液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇。稀釋染液必須用緩沖液。沖洗用水應(yīng)近中性。新鮮配制的染料偏堿，須在室溫貯存一定時(shí)間，貯存時(shí)間愈久，染色效果愈好。DeamGilliland等采用吸光度比值作為瑞氏染液的質(zhì)量規(guī)格。38編輯課件第三節(jié)白細(xì)胞顯微鏡檢查一白細(xì)胞計(jì)數(shù)

二白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)

三白細(xì)胞形態(tài)檢查

四嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)五紅斑狼瘡細(xì)胞檢查39編輯課件血液血漿血細(xì)胞紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞第三節(jié)白細(xì)胞顯微鏡檢查40編輯課件白細(xì)胞計(jì)數(shù)〔whitebloodcellcount〕是指測(cè)定單位體積外周血中各種白細(xì)胞的總數(shù)。白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果僅反映循環(huán)池中的細(xì)胞數(shù)量。一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)1．原理白細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)法是將全血用稀酸溶液稀釋一定倍數(shù)，使紅細(xì)胞破壞后，充入改進(jìn)牛鮑〔Neubauer〕計(jì)數(shù)板內(nèi)，在普通光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)。2．白細(xì)胞稀釋液冰乙酸破壞紅細(xì)胞，且使白細(xì)胞核固定清晰亞甲藍(lán)或結(jié)晶紫使白細(xì)胞核略著色，便于識(shí)別蒸餾水〔一〕方法41編輯課件3．器材〔1〕改進(jìn)牛鮑計(jì)數(shù)板〔2〕改進(jìn)牛鮑計(jì)數(shù)板專用蓋玻片〔血蓋片〕〔3〕微量吸管〔4〕顯微鏡一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)42編輯課件Neubauer計(jì)數(shù)盤〔牛鮑氏計(jì)數(shù)盤〕蓋玻片血細(xì)胞計(jì)數(shù)板側(cè)面觀液面高度為0.1mm一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)43編輯課件大方格中方格小方格每個(gè)大方格體積=1X1x0.1=0.1mm3=0.1μL44編輯課件0.38ml稀釋液混勻

20ul血液充池、靜置鏡下計(jì)數(shù)、計(jì)算

4.簡(jiǎn)要操作

一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)45編輯課件計(jì)數(shù)：用低倍鏡計(jì)數(shù)四個(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)〔N〕。計(jì)算：WBC/L=N/4×10×106×20=N/20X109/L0.1μL—

1μL—

1L稀釋倍數(shù)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)46編輯課件1．采血時(shí)間的影響2．計(jì)數(shù)誤差〔1〕技術(shù)誤差〔technicalerrors〕①器材誤差②采血與取血不當(dāng)③稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)④充池不當(dāng)⑤白細(xì)胞計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確〔2〕固有誤差〔inherenterrors〕又叫計(jì)數(shù)域誤差有核紅細(xì)胞的影響校正公式：〔二〕質(zhì)量保證x：校正前白細(xì)胞數(shù)y：在白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)計(jì)數(shù)到的有核紅細(xì)胞數(shù)。一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)47編輯課件

例：校正前白細(xì)胞數(shù)為12×109/L，在作白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)時(shí)計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)數(shù)得的有核紅細(xì)胞數(shù)為40個(gè)，那么校正后白細(xì)胞數(shù)／L=12×109/L×=8.6×109/L

例：校正前白細(xì)胞數(shù)為12×109/L，在作白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)時(shí)計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)數(shù)得的有核紅細(xì)胞數(shù)為40個(gè)，則校正后白細(xì)胞數(shù)／L=12×109/L×=8.6×109/L一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)48編輯課件4．經(jīng)驗(yàn)控制以血涂片中所見(jiàn)白細(xì)胞的多少粗略核對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果有無(wú)大的誤差。表血涂片白細(xì)胞密度與白細(xì)胞總數(shù)的關(guān)系一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)49編輯課件〔三〕方法學(xué)評(píng)價(jià)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)50編輯課件白細(xì)胞總數(shù)高于參考區(qū)間的上限稱白細(xì)胞增多，低于參考區(qū)間的下限稱白細(xì)胞減少。白細(xì)胞總數(shù)增多或減少主要受中性粒細(xì)胞數(shù)量的影響，其臨床意義見(jiàn)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。〔五〕臨床意義〔四〕參考區(qū)間成人：〔3.5～9.5〕×109/L；兒童：〔5～12〕×109/L；6個(gè)月～2歲：〔11～12〕×109/L；新生兒：〔15～20〕×109/L一、白細(xì)胞計(jì)數(shù)51編輯課件二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)對(duì)各種白細(xì)胞分別計(jì)數(shù)，即白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)〔differentialcount，DC〕。白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的方法有顯微鏡分類計(jì)數(shù)法血細(xì)胞分析儀分類計(jì)數(shù)法〔一〕方法顯微鏡分類計(jì)數(shù)主要是將染色好的血涂片在油鏡下根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征逐個(gè)分別計(jì)數(shù)〔一般計(jì)數(shù)100～200個(gè)白細(xì)胞〕，得出各種白細(xì)胞的相比照值或百分率，并注意觀察其形態(tài)的變化。52編輯課件1．簡(jiǎn)要操作

血涂片制備染色低倍鏡下檢查油鏡下分類計(jì)數(shù)采血高倍鏡下檢查二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)53編輯課件最正確觀察部位：

體尾交界處頭體尾體尾交界54編輯課件2．報(bào)告方式〔1〕白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)結(jié)果：以各種白細(xì)胞所占的比值或百分率表示，或者根據(jù)白細(xì)胞總數(shù)計(jì)算出各種白細(xì)胞的絕對(duì)值報(bào)告?！?〕幼稚或異常白細(xì)胞：發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細(xì)胞，應(yīng)計(jì)算在白細(xì)胞分類比值或百分率中?！?〕有核紅細(xì)胞：血涂片中如見(jiàn)到有核紅細(xì)胞，應(yīng)逐個(gè)計(jì)數(shù)，但不列入白細(xì)胞總數(shù)之內(nèi)，而是報(bào)告分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)見(jiàn)到的有核紅細(xì)胞個(gè)數(shù)?！?〕寄生蟲(chóng)：如發(fā)現(xiàn)瘧原蟲(chóng)等應(yīng)報(bào)告?！?〕紅細(xì)胞、血小板的形態(tài)：如有異常改變應(yīng)報(bào)告。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)55編輯課件〔二〕方法學(xué)評(píng)價(jià)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方法學(xué)評(píng)價(jià)二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)56編輯課件〔三〕參考區(qū)間白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)參考區(qū)間〔成人〕注：本參考區(qū)間適用于靜脈血的儀器檢測(cè)方法。此參考區(qū)間來(lái)源于中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T405-2021。二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)57編輯課件〔四〕臨床意義二者的臨床意義根本一致。〔1〕中性粒細(xì)胞生理性增多：①一天之內(nèi)一般下午較上午高。②劇烈運(yùn)動(dòng)、情緒沖動(dòng)、嚴(yán)寒、暴熱。③新生兒。④妊娠5個(gè)月以上及分娩時(shí)。以上常為一過(guò)性增多⑤吸煙者平均白細(xì)胞總數(shù)比不吸煙者高。1.白細(xì)胞總數(shù)與中性粒細(xì)胞二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)58編輯課件中性粒細(xì)胞病理性增高嚴(yán)重的組織損傷大量血細(xì)胞破壞

急性感染

急性大出血

惡性腫瘤

急性中毒

白血病

〔2〕中性粒細(xì)胞病理性增高二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)59編輯課件中性粒細(xì)胞病理性減少某些血液病：如再生障礙性貧血

某些感染：傷寒、副傷寒沙門菌

慢性理化損傷

自身免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡

脾功能亢進(jìn)

〔3〕中性粒細(xì)胞病理性減少二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)60編輯課件1．生理變化白天較低，夜間較高，上午波動(dòng)大，下午較恒定。2．病理變化〔1〕嗜酸性粒細(xì)胞增多：①超敏反響性疾?。喝缰夤芟?、蕁麻疹、過(guò)敏等。②寄生蟲(chóng)?。喝缁紫x(chóng)、鉤蟲(chóng)等。③某些皮膚病：如銀屑病、濕疹等。④某些血液?。喝缏粤＜?xì)胞白血病。⑤某些惡性腫瘤，如霍奇金病。⑥某些傳染?。喝缧杉t熱。⑦某些內(nèi)分泌疾病，如腦垂體功能低下。2.嗜酸性粒細(xì)胞二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)61編輯課件2.病理變化〔2〕嗜酸性粒細(xì)胞減少：①傷寒、副傷寒、大手術(shù)后。②長(zhǎng)期使用腎上腺皮質(zhì)激素。3．嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的其它應(yīng)用〔1〕觀察急性傳染病的預(yù)后。〔2〕觀察大手術(shù)和燒傷病人的預(yù)后。〔3〕腎上腺皮質(zhì)功能測(cè)定。2.嗜酸性粒細(xì)胞二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)62編輯課件〔1〕嗜堿性粒細(xì)胞增多①慢性粒細(xì)胞性白血?。撼０槭葔A性粒細(xì)胞增多，可達(dá)10%或更多。②嗜堿性粒細(xì)胞性白血?。菏葔A性粒細(xì)胞異常增多，可達(dá)20%以上，多為幼稚型。③過(guò)敏性疾?。簼冃越Y(jié)腸炎、超敏反響等。④骨髓纖維化和某些轉(zhuǎn)移癌?！?〕嗜堿性粒細(xì)胞減少多無(wú)臨床意義。3.嗜堿性粒細(xì)胞二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)63編輯課件〔1〕淋巴細(xì)胞病理性增多①絕對(duì)增多：某些病毒或細(xì)菌所致的傳染病，如風(fēng)疹、流行性腮腺炎、傳單等；某些慢性感染，如結(jié)核病恢復(fù)期也可見(jiàn)淋巴細(xì)胞增多，但白細(xì)胞總數(shù)多正常；急、慢性淋巴細(xì)胞性白血病淋巴細(xì)胞增多明顯，且可導(dǎo)致白細(xì)胞總數(shù)增高。②相對(duì)增多：再生障礙性貧血、粒細(xì)胞缺乏癥等淋巴細(xì)胞百分率相對(duì)增高。〔2〕淋巴細(xì)胞減少主要見(jiàn)于長(zhǎng)期接觸放射線或應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素之后，在急性化膿性感染時(shí)由于中性粒細(xì)胞明顯增高可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞相對(duì)減少。4．淋巴細(xì)胞二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)64編輯課件〔1〕單核細(xì)胞增多正常兒童單核細(xì)胞較成人稍高病理性增多見(jiàn)于：①某些感染：如亞急性感染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、急性感染的恢復(fù)期、活動(dòng)性肺結(jié)核等。②某些血液?。?jiǎn)魏思?xì)胞性白血病、粒缺恢復(fù)期、惡性組織細(xì)胞病、淋巴瘤及骨髓增生異常綜合征〔MDS〕等?！?〕單核細(xì)胞減少意義不大。5．單核細(xì)胞二、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)65編輯課件

⑴胞體：10～15μm，圓形。

⑵胞核：分2～5葉，以3葉核為主。

⑶核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。⑷胞漿：粉紅色，顆粒量多、細(xì)小、均勻、紫紅色。三、白細(xì)胞形態(tài)檢查〔一〕外周血正常白細(xì)胞形態(tài)1.中性分葉核粒細(xì)胞66編輯課件

⑴胞體：10～15μm，圓形。

⑵胞核：彎曲呈桿狀、帶狀、臘腸樣。

⑶核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。⑷胞漿：粉紅色，顆粒量多、細(xì)小、均勻、紫紅色。2.中性桿狀核粒細(xì)胞三、白細(xì)胞形態(tài)檢查〔一〕外周血正常白細(xì)胞形態(tài)67編輯課件三、白細(xì)胞形態(tài)檢查

〔一〕外周血正常白細(xì)胞形態(tài)

中性粒細(xì)胞68編輯課件(1)胞體：13～15μm，圓形。(2)胞核：多分為兩葉。(3)核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。(4)胞漿：著色不清，橘黃色顆粒、粗大、整齊排列、均勻充滿胞質(zhì)。3.嗜酸性粒細(xì)胞三、白細(xì)胞形態(tài)檢查69編輯課件中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞三、白細(xì)胞形態(tài)檢查70編輯課件(1)胞體：10～12μm，圓形。(2)胞核：因顆粒遮蓋而胞核不清晰。(3)核染色質(zhì)：粗糙，深紫紅色。(4)胞漿：著色不清，紫黑色顆粒、量少、大小不均、排列雜亂、可蓋于核上。4.嗜堿性粒細(xì)胞三、白細(xì)胞形態(tài)檢查71編輯課件⑴胞體：6～15μm，圓形或橢圓形。⑵胞核：圓形、橢圓形、腎形。⑶核染色質(zhì)：深紫紅色，粗糙成塊，核外緣光滑。⑷胞漿：透明、淡藍(lán)色、多無(wú)顆粒，大淋巴細(xì)胞可有少量粗大、不均勻紫紅色顆粒。5.淋巴細(xì)胞大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞三、白細(xì)胞形態(tài)檢查72編輯課件都是什么細(xì)胞？三、白細(xì)胞形態(tài)檢查73編輯課件6.單核細(xì)胞⑴胞體：12～20μm，圓形、橢圓形或不規(guī)那么形。⑵胞核：腎形、山字形、馬蹄形、扭曲折疊不規(guī)那么形。⑶核染色質(zhì)：疏松網(wǎng)狀，淡紫紅色，有膨脹和立體起伏感。⑷胞漿：半透明、灰藍(lán)色或灰紅色。顆粒細(xì)小、塵土樣紫紅色。三、白細(xì)胞形態(tài)檢查74編輯課件三、白細(xì)胞形態(tài)檢查〔二〕外周血異常白細(xì)胞形態(tài)1.中性粒細(xì)胞的毒性變化在嚴(yán)重傳染病、各種化膿性感染、敗血癥、惡性腫瘤、中毒、大面積燒傷等病理情況下，中性粒細(xì)胞可發(fā)生以下形態(tài)改變大小不均中毒顆?？张荻爬阵w

核變性

75編輯課件即中性粒細(xì)胞體積大小懸殊?？赡苁窃趦?nèi)毒素等因素作用下骨髓內(nèi)幼稚中性粒細(xì)胞發(fā)生不規(guī)那么分裂的結(jié)果。常見(jiàn)于一些病程較長(zhǎng)的化膿性感染?！?〕大小不均三、白細(xì)胞形態(tài)檢查76編輯課件中性粒細(xì)胞胞質(zhì)中出現(xiàn)的粗大、大小不等、分布不均勻的紫黑色或深紫褐色顆粒，稱中毒顆粒?？赡芤蛱厥忸w粒生成受阻或發(fā)生顆粒變性所致。常見(jiàn)于嚴(yán)重化膿性感染及大面積燒傷等?！?〕中毒顆粒三、白細(xì)胞形態(tài)檢查77編輯課件

中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)一個(gè)或數(shù)個(gè)空泡。一般認(rèn)為空泡是細(xì)胞受損后胞質(zhì)發(fā)生脂肪變性或顆粒缺失的結(jié)果。最常見(jiàn)于嚴(yán)重感染，特別是敗血癥時(shí)。

〔3〕空泡變性空泡

三、白細(xì)胞形態(tài)檢查78編輯課件是中性粒細(xì)胞胞質(zhì)毒性變化而保存的局部嗜堿性區(qū)域。呈圓形、梨形或云霧狀，天藍(lán)色或灰藍(lán)色，直徑1～2μm，是胞質(zhì)局部不成熟的表現(xiàn)?！?〕杜勒體杜勒體三、白細(xì)胞形態(tài)檢查79編輯課件〔5〕核變性核腫脹核變性核碎裂常見(jiàn)于細(xì)胞衰老后，嚴(yán)重感染時(shí)該類細(xì)胞增多。三、白細(xì)胞形態(tài)檢查80編輯課件2.中性粒細(xì)胞的核象變化中性粒細(xì)胞的核形標(biāo)志著它的發(fā)育階段。正常以2～3葉為主。病理情況下，中性粒細(xì)胞的核象可發(fā)生變化，即出現(xiàn)核左移或核右移。

三、白細(xì)胞形態(tài)檢查81編輯課件外周血中桿狀核粒細(xì)胞增多并出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒細(xì)胞時(shí)稱為核左移.核左移常伴中毒顆粒、空泡、核變性等毒性變化。最常見(jiàn)于急性化膿性感染，急性中毒、急性溶血。

再生性核左移伴白細(xì)胞增高退行性核左移白細(xì)胞總數(shù)不增高或減低

輕度核左移：僅見(jiàn)桿狀核粒細(xì)胞＞6%。中度核左移：桿狀核粒細(xì)胞＞10%并有少數(shù)晚幼粒、中幼粒細(xì)胞。重度核左移〔類白血病反響〕：桿狀核粒細(xì)胞＞25%，出現(xiàn)更幼稚的粒細(xì)胞〔1〕核左移三、白細(xì)胞形態(tài)檢查82編輯課件〔2〕核右移外周血中5葉核及5葉核以上的中性粒細(xì)胞＞3%時(shí)稱為核右移。核右移常伴有白細(xì)胞總數(shù)的減少，屬造血功能衰退的表現(xiàn)。主要見(jiàn)于營(yíng)養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血及惡性貧血、炎癥的恢復(fù)期。如疾病進(jìn)展期突然出現(xiàn)核右移那么是預(yù)后不良的表現(xiàn)。巨多分葉核中性粒細(xì)胞三、白細(xì)胞形態(tài)檢查83編輯課件在病毒或過(guò)敏原等因素刺激下，外周血淋巴細(xì)胞增生并發(fā)生形態(tài)上的改變，稱異型淋巴細(xì)胞。

3．淋巴細(xì)胞的形態(tài)異常Ⅰ型〔空泡型〕Ⅱ型〔不規(guī)那么型〕Ⅲ型〔幼稚型〕〔1〕異型淋巴細(xì)胞84編輯課件

異淋正常人血片中可偶見(jiàn)此種細(xì)胞。一般病毒感染異型淋巴細(xì)胞＜5%，而傳染性單核細(xì)胞增多癥時(shí)異型淋巴細(xì)胞常＞10%。三、白細(xì)胞形態(tài)檢查85編輯課件即在淋巴細(xì)胞的主核旁邊另有一個(gè)游離的小核。常見(jiàn)于接受較大劑量的電離輻射之后或其他理化因子、抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞造成損傷時(shí)，常作為致畸、致突變的客觀指標(biāo)之一。〔2〕衛(wèi)星核淋巴細(xì)胞衛(wèi)星核三、白細(xì)胞形態(tài)檢查86編輯課件4．其他異常白細(xì)胞Pelger-Hüet畸形

棒狀小體

Chediak-Higashi畸形

三、白細(xì)胞形態(tài)檢查87編輯課件四、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯微鏡計(jì)數(shù)原理用適當(dāng)?shù)南♂屢簩⒀合♂屢欢ū稊?shù)，破壞大局部紅細(xì)胞和其它白細(xì)胞，并使嗜酸性粒細(xì)胞染色，混勻后充入計(jì)數(shù)池內(nèi)，計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)，即可算出每升血液中嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量。簡(jiǎn)要操作加稀釋液0.38ml采血→取血20μl，混勻稀釋→充上、下兩個(gè)計(jì)數(shù)池→靜置→低倍鏡下計(jì)數(shù)四角和中央共10個(gè)大方格內(nèi)的嗜酸性粒細(xì)胞→計(jì)算。88編輯課件五、紅斑狼瘡細(xì)胞檢查〔一〕方法系統(tǒng)性紅斑狼瘡〔SLE〕是一種原因不明，累及多個(gè)系統(tǒng)和器官的自身免疫性疾病。90％的病例為女性，尤其是育齡期婦女。1．原理系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的血清中，存在一種紅斑狼瘡因子〔LE因子〕。它屬于一種IgG型自身抗體〔抗核抗體〕，在體外可使白細(xì)胞退化，導(dǎo)致細(xì)胞核染色質(zhì)失去正常結(jié)構(gòu)，變成游離腫脹的圓形或橢圓形煙霧狀的均勻性物質(zhì)，稱為“游離均勻體〞；均勻體可吸引吞噬細(xì)胞〔常為中性粒細(xì)胞〕在其周圍形成“花形細(xì)胞簇〞；最后被其中一個(gè)吞噬細(xì)胞吞噬形成LE細(xì)胞。89編輯課件2．簡(jiǎn)要操作采集靜脈血3ml，待其凝固攪碎血凝塊，去除剩余凝塊離心，使白細(xì)胞聚集在同一層面孵育，去除白細(xì)胞層，離心涂片、瑞-吉染色油鏡下找LE細(xì)胞LE細(xì)胞五、紅斑狼瘡細(xì)胞檢查90編輯課件〔二〕參考區(qū)間陰性。〔三〕臨床意義系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人，在疾病的活動(dòng)期，LE細(xì)胞陽(yáng)性率一般為70%～90%，緩解期或激素治療后不易找到。除系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)?，其它的自身免疫性疾病，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、活動(dòng)性肝炎等亦可呈陽(yáng)性反響。發(fā)現(xiàn)LE細(xì)胞，必須結(jié)合臨床表現(xiàn)；未找到LE細(xì)胞，并不能完全否認(rèn)紅斑性狼瘡的診斷，應(yīng)進(jìn)一步作其它有關(guān)的免疫學(xué)指標(biāo)檢查。五、紅斑狼瘡細(xì)胞檢查91編輯課件第四節(jié)

紅細(xì)胞檢查一紅細(xì)胞計(jì)數(shù)二血紅蛋白測(cè)定三紅細(xì)胞形態(tài)檢查四血細(xì)胞比容測(cè)定五紅細(xì)胞平均值六網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)七嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)八紅細(xì)胞沉降率測(cè)定主要內(nèi)容92編輯課件概述紅細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程造血干細(xì)胞紅系祖細(xì)胞原始紅細(xì)胞早幼紅細(xì)胞中幼紅細(xì)胞

晚幼紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟48小時(shí)，紅細(xì)胞存活月120天第四節(jié)

紅細(xì)胞檢查93編輯課件紅細(xì)胞計(jì)數(shù)〔redbloodcellcount，RBC〕即測(cè)定單位體積外周血液中紅細(xì)胞的數(shù)量，是診斷貧血等疾病最常用的檢查工程之一。臨床可通過(guò)各項(xiàng)紅細(xì)胞參數(shù)檢驗(yàn)和紅細(xì)胞的形態(tài)觀察對(duì)貧血和某些疾病進(jìn)行診斷和鑒別診斷。一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)94編輯課件〔一〕顯微鏡計(jì)數(shù)法〔1〕Hayem稀釋液：由NaCl、Na2SO4、HgCl2和蒸餾水組成。其中NaCl和Na2SO4調(diào)節(jié)滲透壓，后者還可提高比重防止細(xì)胞粘連，HgCl2為防腐劑。該稀釋液的主要缺點(diǎn)是遇高球蛋白血癥患者，由于蛋白質(zhì)沉淀而使紅細(xì)胞易凝集?！?〕枸櫞酸鈉甲醛鹽水稀釋液：由NaCl、枸櫞酸鈉、甲醛及蒸餾水組成。其中NaCl和枸櫞酸鈉調(diào)節(jié)滲透壓，后者還有抗凝作用，甲醛為防腐劑。該稀釋液配制簡(jiǎn)單，可使紅細(xì)胞在稀釋后較長(zhǎng)時(shí)間形態(tài)不發(fā)生改變并且不凝集，故應(yīng)用較廣?！?〕生理鹽水或1%甲醛生理鹽水：急診時(shí)如無(wú)紅細(xì)胞稀釋液可用此液代替。

1、試劑一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)95編輯課件一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)用紅細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后，充入改進(jìn)牛鮑計(jì)數(shù)板中，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算求出每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)量。取稀釋液2.0ml→參加全血10μl，混勻→充池→靜置→高倍鏡計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)→計(jì)算。2．原理

3．簡(jiǎn)要操作

96編輯課件〔二〕質(zhì)量保證一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)1．紅細(xì)胞在室溫和4～8℃可穩(wěn)定3天，37℃可穩(wěn)定36小時(shí)，以后逐漸減少。2．血液參加稀釋液后和充池前需充分混勻；計(jì)數(shù)時(shí)光線不能太強(qiáng)。3．當(dāng)白細(xì)胞＞100×109/L時(shí)，可對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果產(chǎn)生影響。處理方法是將計(jì)數(shù)所得的紅細(xì)胞數(shù)減去計(jì)數(shù)所得的白細(xì)胞數(shù)；或者在高倍鏡下注意識(shí)別，計(jì)數(shù)時(shí)勿將白細(xì)胞計(jì)入。在高倍鏡下，白細(xì)胞體積通常比紅細(xì)胞體積略大，中央無(wú)凹陷，細(xì)胞核隱約可見(jiàn)，無(wú)黃綠色折光。4.技術(shù)誤差和固有誤差見(jiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)。97編輯課件〔三〕方法學(xué)評(píng)價(jià)一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)98編輯課件〔四〕參考區(qū)間1．成年：男性〔4.3～5.8〕×1012/L，女性〔3.8～5.1〕×1012/L；新生兒：〔6.0～7.0〕×1012/L。2．紅細(xì)胞計(jì)數(shù)醫(yī)學(xué)決定水平高于6.8×1012/L，應(yīng)采取相應(yīng)的治療措施；低于3.5×1012/L，可診斷為貧血；低于1.5×1012/L，可考慮輸血。〔五〕臨床意義見(jiàn)血紅蛋白測(cè)定。一、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)99編輯課件血紅蛋白的分子結(jié)構(gòu)二、血紅蛋白測(cè)定卟啉環(huán)包著一個(gè)亞鐵離子組成一個(gè)亞鐵血紅素，每條多肽鏈含一個(gè)亞鐵血紅素，每個(gè)血紅蛋白分子有四個(gè)珠蛋白肽鏈血紅蛋白〔hemoglobin，Hb或HGB〕是紅細(xì)胞的主要成分，由珠蛋白和亞鐵血紅素組成，每個(gè)Hb分子有4條珠蛋白肽鏈，分子量為64458。100編輯課件二、血紅蛋白測(cè)定Hb有多種形式及衍生物HbO2HbredHbMHb〔Hi〕HbCOSHb101編輯課件二、血紅蛋白測(cè)定102編輯課件正常人Hb種類及含量二、血紅蛋白測(cè)定103編輯課件1.原理〔一〕HiCN測(cè)定法RBCHbHiHiCN

OD值Hb〔g/L〕=KAλ=540nm溶血氧化結(jié)合計(jì)算104編輯課件直接計(jì)算結(jié)果此處K值為理論值，在實(shí)際應(yīng)用中更多采用標(biāo)準(zhǔn)品參照，測(cè)定未知樣品血紅蛋白濃度〔一〕HiCN測(cè)定法105編輯課件HiCN法測(cè)定血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線制作標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣品Hb濃度？A:0.332，Hb=？106編輯課件〔二〕其他測(cè)定方法十二烷基硫酸鈉法〔sodiumdodecylsulfatehemoglobin，SDS-Hb〕堿羥血紅蛋白法〔alkalinehaematindetergent，AHD575〕疊氮高鐵血紅蛋白法〔HiN3〕溴代十六烷基三甲胺法〔cetyltrimethylammonynmbromide，CTAB〕目前，自動(dòng)血液分析儀已多使用不含氰化鉀的血紅蛋白測(cè)定方法107編輯課件〔三〕質(zhì)量保證1．合格的標(biāo)本2．主要器材

分光光度計(jì)的波長(zhǎng)、光柵、比色杯3．HiCN轉(zhuǎn)化液

的質(zhì)量要求4．HiCN參考液定標(biāo)

5．開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控108編輯課件〔四〕方法學(xué)評(píng)價(jià)血紅蛋白測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)109編輯課件成年男性：130～175g/L

成年女性：115～150g/L

新

生

兒：170～200g/L?！参濉硡⒖紖^(qū)間110編輯課件〔六〕臨床意義306090110120Hb〔g/L〕女性

男性貧血的程度與臨床表現(xiàn)并不一定一致111編輯課件RBC+Hb的變化〔六〕臨床意義112編輯課件三、紅細(xì)胞形態(tài)檢查

大小異常紅細(xì)胞異常形態(tài)

染色異常

結(jié)構(gòu)異常

形態(tài)異常正常形態(tài)紅細(xì)胞113編輯課件三、紅細(xì)胞形態(tài)檢查〔一〕正常紅細(xì)胞形態(tài)正常的紅細(xì)胞呈雙凹圓盤形，細(xì)胞大小均一，平均直徑約7.2μm，瑞氏染色后為淡粉紅色，血紅蛋白充盈良好，呈正常色素性、向心性淺染，中央有生理性淡染區(qū)胞質(zhì)內(nèi)無(wú)異常結(jié)構(gòu)。除健康人外，局部再生障礙性貧血、急性失血性貧血和白血病等患者的紅細(xì)胞亦呈正常形態(tài)。114編輯課件1.大小異常大紅細(xì)胞大小不等小紅細(xì)胞巨紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)直徑小于6μm直徑大于10μm直徑大于15μm指同一血涂片中紅細(xì)胞大小懸殊，直徑相差在1倍以上115編輯課件小紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)116編輯課件大紅細(xì)胞和巨紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)117編輯課件紅細(xì)胞大小不等〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)118編輯課件2.形態(tài)異常橢圓形紅細(xì)胞靶形紅細(xì)胞球形紅細(xì)胞口形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)棘形紅細(xì)胞緡錢狀排列裂片紅細(xì)胞紅細(xì)胞形態(tài)不整鐮刀形紅細(xì)胞淚滴形紅細(xì)胞119編輯課件球形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)120編輯課件口形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)121編輯課件橢圓形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)122編輯課件靶形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)123編輯課件鐮刀形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)124編輯課件裂片紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)125編輯課件棘形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)126編輯課件紅細(xì)胞形態(tài)不整〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)127編輯課件淚滴形紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)128編輯課件緡錢狀紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)129編輯課件〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)130編輯課件高色素性紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)131編輯課件低色素性紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)132編輯課件嗜多色性紅細(xì)胞〔二〕異常紅細(xì)胞形態(tài)133編輯課件4．結(jié)構(gòu)異?！捕钞惓＜t細(xì)胞形態(tài)134編輯課件染色質(zhì)小體染色質(zhì)小體〔Howell-Jollybody〕：又稱豪-焦小體，位于成熟或幼稚紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)的紫紅色小體，直徑1～2μm，1至數(shù)個(gè)不等，為核碎裂或溶解后的剩余物。最常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血，也見(jiàn)于溶血性貧血及脾切除術(shù)后?！捕钞惓＜t細(xì)胞形態(tài)135編輯課件卡波氏環(huán)卡-波環(huán)〔Cabotring〕：存在于成熟或幼稚紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，呈紫紅色線圈狀或“8〞字形結(jié)構(gòu)，可能是紡錘體的剩余物或脂蛋白變性所致。常與染色質(zhì)小體并存，見(jiàn)于溶貧、巨幼貧、白血病及鉛中毒等?！捕钞惓＜t細(xì)胞形態(tài)136編輯課件嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞〔basophilicstipplingcell〕：指在瑞氏染色涂片中，紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)大小不一、數(shù)量不等的灰藍(lán)色點(diǎn)狀物。在鉛、鉍、鋅、汞等重金屬中毒時(shí)增多，為鉛中毒診斷的篩查指標(biāo)。重癥巨幼細(xì)胞性貧血和骨髓纖維化等亦可見(jiàn)增多?！捕钞惓＜t細(xì)胞形態(tài)137編輯課件有核紅細(xì)胞有核紅細(xì)胞〔nucleatederythrocyte，NRBC〕：即幼稚紅細(xì)胞。存在于骨髓中，1周內(nèi)新生兒外周血涂片可見(jiàn)少量，成人外周血中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞屬病理現(xiàn)象，常見(jiàn)于各種溶血性貧血、白血病、紅白血病等?！捕钞惓＜t細(xì)胞形態(tài)138編輯課件都來(lái)認(rèn)一認(rèn)，分別屬于哪一種？139編輯課件血細(xì)胞比容的概述〔概念〕血細(xì)胞比容測(cè)定方法血細(xì)胞比容質(zhì)量控制血細(xì)胞比容方法學(xué)評(píng)價(jià)血細(xì)胞比容參考區(qū)間血細(xì)胞比容臨床意義四、血細(xì)胞比容測(cè)定內(nèi)容140編輯課件血細(xì)胞比容概念血細(xì)胞比容〔hemotocrit，HCT；packedcellvolume，PCV〕，是指一定體積〔1L〕的全血中〔抗凝血〕紅細(xì)胞所占容積的相比照例〔小數(shù)或百分?jǐn)?shù)〕HCT的上下主要與紅細(xì)胞數(shù)量、大小有關(guān)，主要用于貧血和紅細(xì)胞增多的診斷，反響血液稀釋和血液濃縮變化還可根據(jù)RBC、Hb、Hct計(jì)算紅細(xì)胞平均值HCT測(cè)定可采用直接離心法〔包括溫氏法和微量法〕，或間接血液分析儀法四、血細(xì)胞比容測(cè)定141編輯課件溫氏法微量法

折射儀法黏度法比重測(cè)定法放射性核素法等

四、血細(xì)胞比容測(cè)定血細(xì)胞比容測(cè)定方法其中微量法為推薦方法，放射性核素法為參考方法142編輯課件〔一〕溫氏法1．原理溫氏〔Wintrobe〕法是利用血液中不同的有形成分比重的差異，將定量的抗凝血以一定的速度和時(shí)間離心后，血液中有形成分沉淀，讀取壓實(shí)紅細(xì)胞層在全血中所占體積的百分比四、血細(xì)胞比容測(cè)定1.Wintrobe管2.paustrue管143編輯課件〔一〕溫氏法2．簡(jiǎn)要操作抗凝血注入Wintrobe管→以2264g離心力離心30分鐘→讀數(shù)→再離心10分鐘→判讀結(jié)果四、血細(xì)胞比容測(cè)定144編輯課件〔二〕微量法微量法是采用一次性使用的毛細(xì)玻璃管將抗凝靜脈血注入其中，或先將毛細(xì)玻璃管肝素化并枯燥后直接采集毛細(xì)血管血，然后以相對(duì)離心力12500g離心5分鐘，取出毛細(xì)玻璃管，測(cè)量其中紅細(xì)胞柱、全細(xì)胞柱和血漿柱的長(zhǎng)度，判讀結(jié)果四、血細(xì)胞比容測(cè)定145編輯課件〔三〕質(zhì)量保證1．抗凝劑目前多項(xiàng)選擇用肝素或EDTA-K2用于HCT測(cè)定，對(duì)紅細(xì)胞影響小2．選用合格的器材溫氏管、微量管、高速離心機(jī)等3．離心RCF直接影響到HCT，ICSH建議溫氏法RCF2264g。RCF與RPM可相互轉(zhuǎn)換4．標(biāo)準(zhǔn)化操作，防止操作誤差5．結(jié)果判讀與分析離心后血漿與血細(xì)胞的分界面應(yīng)為平面，目光平視，讀數(shù)時(shí)讀取自復(fù)原紅細(xì)胞層以下的紅細(xì)胞的高度四、血細(xì)胞比容測(cè)定146編輯課件〔四〕方法學(xué)評(píng)價(jià)四、血細(xì)胞比容測(cè)定HCT測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)147編輯課件〔五〕參考區(qū)間四、血細(xì)胞比容測(cè)定148編輯課件〔六〕臨床意義1．增高：①各種原因引起的血液濃縮；②原發(fā)性或繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥；③新生兒。2．降低：①各種原因引起的血液稀釋；②各種原因引起的貧血3．臨床補(bǔ)液量的參考各種原因?qū)е旅撍畷r(shí)，HCT都會(huì)增高4．真性紅細(xì)胞增多癥診斷指標(biāo)當(dāng)HCT大于0.7，RBC為〔7～10〕×109/L，Hb大于180g/L，即可診斷5．計(jì)算紅細(xì)胞平均指數(shù)，對(duì)貧血的形態(tài)學(xué)分類有幫助。6．血液流變學(xué)指標(biāo)自發(fā)性凝血時(shí)，HCT可＞0.6四、血細(xì)胞比容測(cè)定149編輯課件概述計(jì)算方法參考區(qū)間臨床意義五、紅細(xì)胞平均指數(shù)內(nèi)容150編輯課件〔一〕概述紅細(xì)胞平均指數(shù)包括：紅細(xì)胞平均體積〔MCV〕紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量〔MCH〕紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度〔MCHC〕為貧血的形態(tài)學(xué)分類和鑒別診斷提供重要線索五、紅細(xì)胞平均指數(shù)151編輯課件〔二〕計(jì)算方法儀器法與手工法根本相似，但不完全相同手工法費(fèi)時(shí)費(fèi)力儀器法自動(dòng)計(jì)算，報(bào)告準(zhǔn)確而且儀器法還有其他多種參數(shù)可以參考，如紅細(xì)胞直方圖五、紅細(xì)胞平均指數(shù)152編輯課件手工法：紅細(xì)胞平均指數(shù)的計(jì)算

如果RBC=4.01012/L,Hb=124g/L,Hct=0,42，那么MCV=?MCH=?MCHC=?〔二〕計(jì)算方法153編輯課件MCV由血液分析儀直接測(cè)定細(xì)胞信號(hào)獲得MCH=Hb/RBCMCHC=Hb/〔RBC×MCV〕HCT=RBC×MCV儀器法：紅細(xì)胞平均指數(shù)的計(jì)算

如果MCH=30pg,MCV=120fl，那么MCHC=?〔二〕計(jì)算方法154編輯課件〔三〕參考區(qū)間五、紅細(xì)胞平均指數(shù)MCV、MCH、MCHC參考區(qū)間155編輯課件〔四〕臨床意義五、紅細(xì)胞平均指數(shù)貧血形態(tài)學(xué)分類及臨床意義156編輯課件網(wǎng)織紅細(xì)胞定義網(wǎng)織紅細(xì)胞形態(tài)網(wǎng)織紅細(xì)胞染色方法網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)參考區(qū)間網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)157編輯課件六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞〔reticulocyte，Ret〕是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過(guò)渡階段細(xì)胞，其胞質(zhì)中尚殘留局部嗜堿性物質(zhì)〔核糖體和核糖核酸〕，可被某些染料活體染色后呈藍(lán)色或紫色的網(wǎng)狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)，故名為網(wǎng)織紅細(xì)胞。Ret體積略大于成熟紅細(xì)胞〔直徑8.0～9.5μm〕，仍具有合成血紅蛋白的能力，約1～2天后，過(guò)渡為成熟紅細(xì)胞。ICSH將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成I～I(xiàn)V型。定義I型〔絲球型〕Ⅱ型〔網(wǎng)型〕III型〔破網(wǎng)型〕Ⅳ型〔點(diǎn)粒型〕158編輯課件網(wǎng)織紅細(xì)胞類型及特征六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)159編輯課件〔一〕試管法1．原理網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)帶負(fù)電荷的RNA磷酸基，與新亞甲藍(lán)、燦爛甲酚蘭等堿性染料帶正電荷的有色反響基團(tuán)結(jié)合，使RNA膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮，形成藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，顯微鏡下計(jì)數(shù)可得網(wǎng)織紅細(xì)胞的相對(duì)值〔%〕和絕對(duì)值〔×109/L〕〔Ret#=RBC×Ret%〕。2．試劑10g/L煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)染液。3．簡(jiǎn)要操作染液與待檢血液1︰1混合→室溫放置10～15分鐘→制備血涂片→低倍鏡下觀察→油鏡計(jì)數(shù)→計(jì)算。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)160編輯課件〔二〕玻片法1．原理同試管法2．試劑

10g/L煌焦油藍(lán)乙醇溶液。3．簡(jiǎn)要操作

滴加染液于玻片上→待干→加同體積待檢血液→充分混勻，染色→制備血涂片低倍鏡下觀察→油鏡計(jì)數(shù)→計(jì)算。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)161編輯課件網(wǎng)織紅細(xì)胞示意圖六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)162編輯課件黃焦油蘭染色的網(wǎng)織紅細(xì)胞六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)163編輯課件黃焦油蘭染色的網(wǎng)織紅細(xì)胞六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)164編輯課件〔三〕Miller窺盤法BAMiller窺盤為圓形玻片，玻片上刻有兩個(gè)正方形格子，計(jì)數(shù)時(shí)用小方格A計(jì)數(shù)紅細(xì)胞，用大方格B〔包含A〕計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞，大方格B〔包含A〕面積為小方格A的9倍。ICSH及我國(guó)衛(wèi)計(jì)委臨床檢驗(yàn)中心推薦使用Miller窺盤進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)165編輯課件B格2個(gè)Ret，A格5個(gè)RBC六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)166編輯課件5110×9Ret%==0.5%

Ret#=RBC×Ret%六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)167編輯課件〔四〕儀器法帶網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)參數(shù)的血液分析儀、流式細(xì)胞儀〔FCM〕和網(wǎng)織紅細(xì)胞專用計(jì)數(shù)儀均可，網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA經(jīng)特殊熒光染料染色可進(jìn)行RNA定量，能精確計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)〔Ret%〕。網(wǎng)織紅細(xì)胞可分為低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞〔LFR〕、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞〔MFR〕以及高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞〔HFR〕。還可計(jì)算未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞〔IMR〕和網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)〔RMI〕。IMR=HFR+MFR六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)168編輯課件方法分類試管法和玻片法原理、試劑根本相同，均可使用米勒窺盤，方便計(jì)數(shù)提高效率六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)169編輯課件〔五〕質(zhì)量保證1．及時(shí)檢測(cè)陳舊標(biāo)本檢查結(jié)果將降低。2．選擇適宜的染料3．染色過(guò)程染色時(shí)間不能過(guò)短，室溫低時(shí)，可放置37℃溫箱或適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。染液與血液的比例以1︰1為宜。嚴(yán)重貧血時(shí)，可適量增加血液的比例，制片時(shí)血膜應(yīng)厚薄適宜，防止網(wǎng)織紅細(xì)胞分布不勻。4．計(jì)數(shù)選擇紅細(xì)胞分布均勻、網(wǎng)織紅細(xì)胞著色好的部位計(jì)數(shù)。外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型，凡含有2個(gè)或2個(gè)以上顆粒、且顆粒遠(yuǎn)離細(xì)胞邊緣的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)170編輯課件〔六〕方法學(xué)評(píng)價(jià)六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)171編輯課件〔七〕參考區(qū)間六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)172編輯課件〔八〕臨床意義1．反映骨髓的造血功能2．作為貧血治療效果的觀察指標(biāo)3．作為觀察病情的指標(biāo)六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)173編輯課件1．反映骨髓的造血功能〔1〕網(wǎng)織紅細(xì)胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，見(jiàn)于各種增生性貧血，溶血性貧血尤為顯著。溶血性貧血時(shí)由于大量網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)入血循環(huán)，網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)可增至6%～8%或更多。急性溶血時(shí)可高達(dá)20%，嚴(yán)重者甚至可達(dá)40%～50%以上；急性失血性貧血時(shí)網(wǎng)織紅細(xì)胞可明顯增高；缺鐵性貧血和巨幼紅細(xì)胞性貧血時(shí)，網(wǎng)織紅細(xì)胞正?；蜉p度增高?！?〕網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：表示骨髓造血功能低下，多見(jiàn)于再生障礙性貧血。網(wǎng)織紅細(xì)胞低于15×109/L為診斷急性再生障礙性貧血的標(biāo)準(zhǔn)之一。急性白血病時(shí)，由于骨髓中異常細(xì)胞大量浸潤(rùn)，使紅細(xì)胞生成受到抑制，可造成網(wǎng)織紅細(xì)胞減少。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)174編輯課件〔3〕網(wǎng)織紅細(xì)胞生成指數(shù)

〔reticulocyteproductionindex，RPI〕反映骨髓造血功能指標(biāo)，代表網(wǎng)織紅細(xì)胞的生成相當(dāng)于健康人多少倍。其計(jì)算公式為：網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟時(shí)間：①健康人RPI為1。②RPI＞3：提示為溶血性貧血或急性失血性貧血。③RPI＜1：提示為骨髓增生低下或紅系成熟障礙所致貧血。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)175編輯課件2．作為貧血治療效果的觀察指標(biāo)缺鐵性貧血和巨幼紅細(xì)胞性貧血患者在治療前，外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞僅輕度增高〔也可正?；蜉p度減少〕，有效治療后2～3天網(wǎng)織紅細(xì)胞便開(kāi)始上升，7～10天到達(dá)頂峰〔可達(dá)10%以上〕。治療2周左右網(wǎng)織紅細(xì)胞逐漸下降，之后紅細(xì)胞及血紅蛋白才逐漸升高。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)176編輯課件貧血治療有效時(shí)網(wǎng)織紅細(xì)胞的變化Ret#(×109/L)Days六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)177編輯課件3．作為觀察病情的指標(biāo)

溶血和失血性貧血患者在治療過(guò)程中，連續(xù)進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，可以作為判斷病情變化的參考指標(biāo)。如治療后網(wǎng)織紅細(xì)胞逐漸降低，表示溶血或出血已得到控制；如網(wǎng)織紅細(xì)胞持續(xù)不減低，甚至更見(jiàn)增高者，表示病情未得到控制，甚至還在加重。六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)178編輯課件七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)定義測(cè)定方法質(zhì)量保證參考區(qū)間臨床意義內(nèi)容179編輯課件七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞〔basophilicstipplingcell〕是尚未完全成熟的紅細(xì)胞，胞質(zhì)中殘存的核酸〔RNA〕變性、聚集形成顆粒，經(jīng)堿性染料〔如美藍(lán)〕染色后，細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)深染的顆粒；假設(shè)經(jīng)瑞氏染色，可見(jiàn)紅細(xì)胞的粉紅色胞質(zhì)中有粗細(xì)不等的藍(lán)黑色顆粒，故稱嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞。定義180編輯課件basophilicstipplingcell181編輯課件〔一〕顯微鏡計(jì)數(shù)法常規(guī)制備血涂片以甲醇固定和堿性亞甲藍(lán)染色后，按網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中所見(jiàn)到的嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)，計(jì)算百分比。由于嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞較少且分布不均勻，必要時(shí)可擴(kuò)大紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的數(shù)量。七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)182編輯課件〔二〕質(zhì)量保證常規(guī)制備血涂片以甲醇固定和堿性亞甲藍(lán)染色后，按網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中所見(jiàn)到的嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)，計(jì)算百分比。由于嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞較少且分布不均勻，必要時(shí)可擴(kuò)大紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的數(shù)量。1．試劑應(yīng)定期配制，以免變質(zhì)沉淀。配制好的堿性亞甲藍(lán)染液在室溫下可保存2～3周，如有沉淀那么需重新配制。2．可適當(dāng)放慢血涂片的枯燥速度，使之形成較大的點(diǎn)彩顆粒。3．計(jì)數(shù)時(shí)需選擇紅細(xì)胞分布均勻、無(wú)重疊的區(qū)域，必要時(shí)采用擴(kuò)大計(jì)數(shù)域的方法計(jì)數(shù)。七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)183編輯課件〔三〕參考區(qū)間＜0.03%。〔四〕臨床意義嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞增多常見(jiàn)于鉛、汞、鉍、硝基苯、苯胺等中毒的患者，在職業(yè)病防治中常用于判斷鉛、汞等重金屬中毒情況。此外在溶血性貧血、惡性貧血、白血病、惡性腫瘤、瘧疾等也可見(jiàn)增多。七、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)184編輯課件概念測(cè)定方法質(zhì)量保證方法學(xué)評(píng)價(jià)參考區(qū)間臨床意義八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定內(nèi)容185編輯課件紅細(xì)胞沉降率〔ESR〕簡(jiǎn)稱血沉，是指紅細(xì)胞在一定條件下自然下沉的速率通常是枸櫞酸鹽抗凝劑，1:4比例，時(shí)間是1小時(shí)ESR測(cè)定的常用方法有魏氏〔Westergrem〕法和自動(dòng)血沉儀法八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定概念186編輯課件1．原理血沉架放置按要求裝血的血沉管1小時(shí)，讀取上層血漿高度的毫米數(shù)值，即為紅細(xì)胞沉降率2．器材Westergren血沉管、血沉架3．簡(jiǎn)要操作取抗凝劑0.4ml→加靜脈血1.6ml，混勻→抗凝血注入血沉管→血沉管直立于血沉架1小時(shí)→判讀結(jié)果八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定〔一〕魏氏法187編輯課件〔一〕魏氏法4．血沉影響因素八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定188編輯課件1．一次性真空血沉管〔Vacuette移液管〕法2．自動(dòng)血沉儀法八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定〔二〕其他測(cè)定方法■準(zhǔn)確■快速

■方便■實(shí)用189編輯課件190編輯課件1．魏氏〔Westergrem〕法〔1〕檢驗(yàn)前必須控制飲食，防止脂血〔2〕枸櫞酸鈉〔AR級(jí)〕濃度應(yīng)準(zhǔn)確，抗凝劑與血液之比應(yīng)為1︰4?！?〕血沉管必須潔凈、枯燥，符合ICSH規(guī)定。血沉架必須穩(wěn)固，放置要垂直〔4〕標(biāo)本不凝血、不溶血；及時(shí)測(cè)定，測(cè)定前要充分混勻。吸血時(shí)防止產(chǎn)生氣泡〔5〕測(cè)定溫度18～25℃，防止陽(yáng)光直接照射。試驗(yàn)臺(tái)必須穩(wěn)固，防止振動(dòng)〔6〕測(cè)定溫度過(guò)高時(shí)血沉加快，應(yīng)對(duì)照血沉溫度校正表進(jìn)行溫度校正后報(bào)告結(jié)果〔7〕測(cè)定時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制在〔60±1〕分鐘。紅細(xì)胞沉降率在1小時(shí)沉降過(guò)程中并不是均衡等速度的沉降，因此絕不可以只觀察30分鐘沉降率，將結(jié)果乘以2作為1小時(shí)沉血結(jié)果2．血沉儀法與魏氏法的要求一致。檢測(cè)標(biāo)本全過(guò)程應(yīng)封閉，防止污染八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定〔三〕質(zhì)量保證191編輯課件魏氏血沉法的影響因素八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定192編輯課件〔四〕方法學(xué)評(píng)價(jià)八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定血沉測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)193編輯課件〔五〕參考區(qū)間魏氏法成年男性0～15mm/h成年女性0～20mm/h老年人增高，應(yīng)單獨(dú)設(shè)定參考區(qū)間八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定194編輯課件主要是血沉加快有一定的臨床意義，血沉減慢意義不大血沉加快見(jiàn)于：①疾病組織損傷及壞死；②惡性腫瘤??；③炎癥疾??；④自身免疫病；⑤高球蛋白血癥；⑥高膽固醇血癥；⑦貧血；⑧其他〔六〕臨床意義八、紅細(xì)胞沉降率測(cè)定195編輯課件第五節(jié)血小板檢查一概述二血小板計(jì)數(shù)三血小板形態(tài)檢查196編輯課件血小板功能纖溶功能黏附功能凝血止血功能釋放功能聚集促凝功能一、概述123456197編輯課件198一、概述198編輯課件199血管壁受損，血小板參與止血凝血示意圖一、概述199編輯課件一、概述血小板檢查內(nèi)容200編輯課件一、概述

血小板形態(tài)

血小板計(jì)數(shù)201編輯課件血小板計(jì)數(shù)〔plateletcount，PLT〕是測(cè)定單位容積〔通常為1L〕的血液中血小板的數(shù)量〔單位109/L〕。二、血小板計(jì)數(shù)202編輯課件203手工計(jì)數(shù)自動(dòng)計(jì)數(shù)顯微鏡血細(xì)胞儀血小板計(jì)數(shù)方法203編輯課件血液經(jīng)稀釋液稀釋和破壞紅細(xì)胞后，混勻、充池、在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的血小板數(shù)量，經(jīng)過(guò)換算求出每升血液中血小板的數(shù)量。顯微鏡法血小板計(jì)數(shù)原理204編輯課件205血小板計(jì)數(shù)試劑

草酸銨稀釋液：由草酸銨、EDTA-Na２、和H2O組成。其中草酸銨作用是破壞紅細(xì)胞，EDTA-Na２抗凝復(fù)方尿素稀釋液〔許汝和液〕：由尿素、EDTA-Na２、甲醛和H2O組成。其中尿素作用是破壞紅細(xì)胞，EDTA-Na２抗凝，甲醛固定血小板205編輯課件206取稀釋液0.38ml參加1小試管中取血20μl，混勻充池靜置10-15min鏡檢高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格的四角和中央共5個(gè)中方格內(nèi)血小板數(shù)量計(jì)算Nx5x10x20x106/L=Nx109/L血小板計(jì)數(shù)操作步驟206編輯課件

血小板計(jì)數(shù)的方法學(xué)評(píng)價(jià)血小板計(jì)數(shù)方法學(xué)評(píng)價(jià)

207編輯課件參考區(qū)間〔125～350〕×109/L。危急值下限20×109/L〔兒童≤30×109/L〕上限≥1000×109/L。血小板計(jì)數(shù)參考區(qū)間及危急值危險(xiǎn)！208編輯課件209血小板數(shù)量隨時(shí)間和生理狀態(tài)的不同而略有變化，午后略高于早晨；春季較冬季低；平原居民較高原居民低；月經(jīng)前減低，月經(jīng)后增高；妊娠中晚期增高，分娩后減低；運(yùn)動(dòng)、飽餐后增高，休息后恢復(fù)；靜脈血血小板計(jì)數(shù)比毛細(xì)血管血高10%。血小板減少是引起出血的常見(jiàn)原因。當(dāng)血小板數(shù)在〔20～50〕×109/L時(shí)，可有輕度出血或手術(shù)后出血；低于20×109/L，可有較明顯的出血傾向；低于5×109/L時(shí)，可導(dǎo)致嚴(yán)重出血。血小板計(jì)數(shù)超過(guò)400×109/L為血小板增多。血小板計(jì)數(shù)臨床意義209編輯課件

病理性血小板減少和增多的原因及臨床意義血小板計(jì)數(shù)臨床意義血小板增多血小板減少210編輯課件211三、血小板形態(tài)檢查血小板的數(shù)量和功能對(duì)于止血、凝血的實(shí)現(xiàn)至關(guān)重要，血小板的形態(tài)檢查對(duì)于疾病的診斷具有一定的參考價(jià)值211編輯課件212操作步驟〔同白細(xì)胞紅細(xì)胞形態(tài)檢查〕

采集血液

瑞氏染色

顯微鏡觀察

推制血涂片212編輯課件觀察要點(diǎn)①血小板的大小是否一致，有無(wú)巨大或小型血小板出現(xiàn)②血小板的形態(tài)有無(wú)改變，胞質(zhì)的染色、顆粒的有無(wú)、多少、粗細(xì)、分布情況，有無(wú)空泡等，且應(yīng)估計(jì)正常和異常血小板的數(shù)量③血小板的分布情況，如過(guò)度聚集或過(guò)度分散213編輯課件〔一〕正常血小板形態(tài)呈兩面微凸的圓盤狀，直徑約1.5～3μm，新生血小板體積大，成熟者體積小。在血涂片上往往散在或成簇分布，其形態(tài)多數(shù)為圓形、橢圓形或略欠規(guī)那么；胞質(zhì)呈淡藍(lán)或淡紅色，中心部位有細(xì)小、分布均勻而相聚或分散于胞質(zhì)中的紫紅色顆粒，也稱嗜天青顆粒。214編輯課件正常血涂片的血小板形態(tài)和分布215編輯課件〔二〕異常血小板形態(tài)216編輯課件大血小板〔giantplatelet〕直徑4～7μm，巨型血小板直徑大于7μm，圖中箭頭所指的大血小板超過(guò)了紅細(xì)胞大小，同時(shí)見(jiàn)數(shù)量減少。217編輯課件小血小板〔smallplatelet〕小血小板直徑小于1.5μm，圖中血小板與正常紅細(xì)胞比較非常小，且數(shù)量較多，過(guò)于分散。218編輯課件血小板衛(wèi)星現(xiàn)象〔plateletsatellitism〕血小板黏附、圍繞于中性粒細(xì)胞〔或偶爾黏附于單核細(xì)胞〕的現(xiàn)象，有時(shí)可見(jiàn)血小板吞噬現(xiàn)象219編輯課件血小板片狀聚集血小板大片聚集220編輯課件血小板減少全片未見(jiàn)血小板221編輯課件血小板功能異常血小板不聚集血小板過(guò)度聚集222編輯課件第六節(jié)血栓與止血一般檢驗(yàn)內(nèi)容概述一、出血時(shí)間測(cè)定二、凝血酶原時(shí)間測(cè)定三、血漿活化局部凝血活酶時(shí)間四、血漿凝血酶時(shí)間五、血漿纖維蛋白原測(cè)定六、血漿纖維蛋白〔原〕降解產(chǎn)物測(cè)定七、血漿D-二聚體測(cè)定八、出凝血檢查的臨床應(yīng)用223編輯課件概述凝血機(jī)制224編輯課件225概述凝血與纖溶的關(guān)系225編輯課件概述出凝血障礙的因素226編輯課件定義出血時(shí)間〔bleedingtime，BT〕是指在特定條件下，皮膚小血管被刺破后，血液自行流出到自然停止的時(shí)間稱為出血時(shí)間。一、出血時(shí)間測(cè)定227編輯課件〔一〕TBT法1．TBT〔templatebleedingtime〕原理使用出血時(shí)間測(cè)定器在受檢者前臂皮膚上造成一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)切口，記錄血液自行流出到自然停止所需要的時(shí)間，即為出血時(shí)間〔BT〕。2．主要器材血壓計(jì)、出血時(shí)間測(cè)定器、秒表。3．簡(jiǎn)要操作加壓→消毒皮膚→造成切口→計(jì)時(shí)。一、出血時(shí)間測(cè)定228編輯課件〔二〕質(zhì)量保證1．減少藥物的影響檢測(cè)前1周內(nèi)不能服用抗血小板藥物〔如阿司匹林等〕，以免影響結(jié)果。2．選擇適宜的測(cè)定器不同年齡應(yīng)該選擇不同類型的出血時(shí)間測(cè)定器。①新生兒型：切口為0.5mm×2.5mm。②兒童型：切口為1.0mm×3.5mm。③成人型：切口為1.0mm×5.0mm。一、出血時(shí)間測(cè)定229編輯課件〔二〕質(zhì)量保證3．注意溫度的影響應(yīng)在25℃左右的室內(nèi)進(jìn)行，以保證穿刺部位溫度恒定。4．選擇正確穿刺部位穿刺時(shí)應(yīng)避開(kāi)淺表靜脈、疤痕、水腫和潰瘍等處皮膚。5．防止接觸和擠壓傷口血液應(yīng)自行流出，采用濾紙吸去流出的血液時(shí)，應(yīng)防止與傷口接觸，更不能擠壓傷口。一、出血時(shí)間測(cè)定230編輯課件〔三〕方法學(xué)評(píng)價(jià)一、出血時(shí)間測(cè)定BT測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)231編輯課件232參考區(qū)間及臨床意義〔四〕參考區(qū)間TBT：〔6.9±2.1〕分鐘。〔五〕臨床意義1．BT延長(zhǎng)主要涉及血小板和血管壁的一期止血缺陷。見(jiàn)于：①血小板數(shù)量異常，如血小板減少癥、原發(fā)性血小板增多癥。②血小板功能缺陷，如血小板無(wú)力癥、巨大血小板綜合征。③某些凝血因子缺乏，如血管性血友病〔vWD〕、低〔無(wú)〕纖維蛋白原血癥和DIC。2．BT縮短主要見(jiàn)于某些嚴(yán)重的血栓性疾病。一、出血時(shí)間測(cè)定232編輯課件定義凝血酶原時(shí)間〔prothrombintime，PT〕是在體外模擬體內(nèi)外源性凝血的全部條件，從參加組織因子開(kāi)始到血漿凝固所需要的時(shí)間測(cè)。PT是常用的外源性凝血途徑和共同凝血途徑的篩檢指標(biāo)之一。二、血漿凝血酶原時(shí)間233編輯課件PT原理凝血酶纖維蛋白原纖維蛋白XaX凝血酶原VVaXIIIXIIIa交聯(lián)的纖維蛋白凝血共同途徑XIIXIaXIIXIXaVIIIVIIIaXIIa內(nèi)源性凝血途徑活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)234編輯課件〔一〕手工法1．原理采用Quick一步凝固法。37℃條件下，在待檢血漿中參加足量的組織凝血活酶〔含組織因子、磷脂〕和適量的鈣離子，通過(guò)激活因子Ⅶ而啟動(dòng)外源性凝血途徑，使乏血小板血漿凝固。從加鈣離子到血漿開(kāi)始凝固所需的時(shí)間即為凝血酶原時(shí)間。2．簡(jiǎn)要操作采血并別離血漿→加血漿與凝血活酶試劑〔1︰2〕→混勻并立即計(jì)時(shí)→傾斜試管，觀察結(jié)果。二、血漿凝血酶原時(shí)間235編輯課件〔二〕質(zhì)量保證1．病人準(zhǔn)備停用影響止凝血功能的藥物至少1周。2．采血要求使用真空采血管、硅化玻璃管或塑料管采血，止血帶使用時(shí)間不超過(guò)1分鐘，采血要順利，加血液至抗凝管后，應(yīng)立即輕輕地顛倒混勻5～8次，防止標(biāo)本溶血和凝固。創(chuàng)傷性或留置導(dǎo)管的血標(biāo)本、溶血或凝塊形成的標(biāo)本、輸液時(shí)同側(cè)采集的標(biāo)本均不宜做PT等止凝血試驗(yàn)。3．標(biāo)本運(yùn)送及時(shí)送檢，因?yàn)檠弘x體后，凝血因子逐漸消耗，隨著標(biāo)本存放時(shí)間延長(zhǎng)，消耗加快。4．標(biāo)本離心按規(guī)定離心力與離心時(shí)間要求，及時(shí)別離標(biāo)本，獲得乏血小板血漿。二、血漿凝血酶原時(shí)間236編輯課件〔二〕質(zhì)量保證5．組織凝血活酶〔thromboplastin〕的質(zhì)量必須使用標(biāo)有國(guó)際敏感指數(shù)〔internationalsensitivityindex，ISI〕的PT試劑。6．ISI和國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值〔internationalnormalizationratio，INR〕ISI值越接近1.0，表示靈敏度越高。ISI為組織凝血活酶參考品與每批組織凝血活酶PT校正曲線的斜率，即在雙對(duì)數(shù)的坐標(biāo)紙上，縱坐標(biāo)為用參考品測(cè)定的PT對(duì)數(shù)值，橫坐標(biāo)為用待標(biāo)定的組織凝血活酶測(cè)定的相同標(biāo)本PT對(duì)數(shù)值INR計(jì)算公式為：INR＝〔病人PT值/正常人平均PT值〕ISIWHO等國(guó)際權(quán)威機(jī)構(gòu)要求，每次〔每批〕PT測(cè)定的正常對(duì)照值，必須用至少來(lái)自20名以上男女各半的正常人混合血漿所測(cè)定的結(jié)果。二、血漿凝血酶原時(shí)間237編輯課件〔二〕質(zhì)量保證7．測(cè)定試劑、標(biāo)本溫浴時(shí)間應(yīng)控制在3～10分鐘內(nèi)，測(cè)定溫度應(yīng)控制在〔37±1〕℃，準(zhǔn)確判斷血漿凝固終點(diǎn)〔纖維