高效液相色譜法測定輸液袋用聚碳酸酯組合蓋中雙酚a

高效液相色譜法測定輸液袋用聚碳酸酯組合蓋中雙酚a

聚碳酸酯（pc）是一種環(huán)保、耐酸、輕薄、突出的聚碳酸酯，因此被用于包裝和儲存，深受人們喜愛。聚碳酸酯生產(chǎn)的化工原料為雙酚A(bisphenolA),雙酚A是由兩分子苯酚和一分子丙酮在酸性條件下催化縮合而成的酚類物質(zhì),分子式為C15H16O2。由于安全性問題,近年來雙酚A引起了人們的高度關(guān)注。有研究證明雙酚A具有雌激素效應和慢性毒效應,對人特別是孕婦、新生兒和嬰兒以及環(huán)境有害,是近幾年新認定的“環(huán)境內(nèi)分泌干擾物”之一。目前,加拿大、美國、韓國、丹麥等多個國家和地區(qū)發(fā)布了關(guān)于食品包裝及食品接觸材料、容器及器皿中禁止使用雙酚A的法律法規(guī)。中國也出臺了GB/T23296.162009、SN/T22822009食品接觸材料中雙酚A檢測的新標準。輸液包裝作為一種高風險的包裝形式,其中的聚碳酸酯組合蓋中的雙酚A及向輸液袋中的遷移情況有待考察。本實驗采用高效液相色譜法(HPLC)-二極管陣列檢測器(DAD)測定輸液袋用聚碳酸酯組合蓋中的雙酚A含量,并模擬輸液袋滅菌條件,考察了雙酚A向輸液袋中遷移的情況。1儀器和試劑盒1.1儀器Agilent1260系列HPLC-DAD(美國Agilent公司);AE240天平(Mettler)。1.2“0-200-0”雙酚A對照品(Sigma-Aldrich公司,純度≥99%,批號:604-030-00-0);二氯甲烷(分析純,國藥集團化學試劑有限公司,批號:T20110106);0.5%氯化鈉注射用水;甲醇(色譜純,Merck公司);輸液袋用聚碳酸酯組合蓋(某制藥有限公司,批號:100701,100702,100703)。2方法和結(jié)果2.1檢測波長的確定雙酚A對照品溶液在DAD上200～400nm波長內(nèi)進行掃描,結(jié)果顯示雙酚A在227nm處有最大吸收,故選擇227nm為檢測波長。2.2流動相、色譜相Diamosil-C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm);流動相:甲醇-水=80∶20;檢測波長為227nm;柱溫:30℃;流速:1.0mL·min-1;進樣量:10μL;理論板數(shù)按雙酚A計為10000。色譜圖見圖1。2.3溶液的制備2.3.1儲備液以下簡稱“12ml-1取雙酚A對照品適量,精密稱定,置于50mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,儲存于冰箱中,作為儲備液(1.354mg·mL-1)。臨用時精密量取雙酚A儲備液1.0mL,置于200mL量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液(6.770μg·mL-1)。2.3.2氯甲烷溶液將聚碳酸酯組合蓋中的聚碳酸酯部分取下,剪成小塊。取樣品0.5g,精密稱定,置于50mL錐形瓶中,加入二氯甲烷10mL,密封,放置使溶解,必要時振搖。溶解完全后,加入甲醇適量,并置于冰箱中,冷藏30min,使沉淀析出完全,過濾,用甲醇清洗沉淀,濾液一并并入濾液中,水浴蒸干,加甲醇定容至10mL量瓶中,經(jīng)微孔濾膜過濾,濾液作為聚碳酸酯組合蓋中雙酚A含量測定用供試品液。2.3.3聚碳酸酯用量的測定取聚碳酸酯組合蓋中的聚碳酸酯部分6只,精密加入0.5%氯化鈉注射用水50.0mL,使聚碳酸酯部分完全浸沒,于121℃高壓滅菌1h,放冷,作為雙酚A遷移量測定用供試品溶液。2.4對照品溶液的制備精密量取對照品溶液適量,用甲醇定量稀釋成每1mL含雙酚A0.1354,0.2708,0.6770,1.354,2.031,2.708μg的對照品溶液。取上述溶液10μL注入液相色譜儀,以雙酚A進樣量(ng)為橫坐標(X),色譜峰面積為縱坐標(Y),計算得線性方程為:Y=4.5275X+0.6667,r=0.9999,表明雙酚A在1.354～27.08ng內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。2.5檢出限的確定精密量取雙酚A對照品溶液適量,用甲醇定量逐步稀釋。以信噪比(S/N)=3,計算雙酚A檢出限為0.01ng;以信噪比(S/N)=10,計算雙酚A定量限為0.03ng(n=6,RSD=2.1%)。2.6儀器準確度測試精密吸取雙酚A對照品溶液(0.6770μg·mL-1)10μL,重復進樣6次,結(jié)果RSD=1.1%,表明儀器精密度較好。2.7重復性試驗取輸液袋用聚碳酸酯組合蓋(批號:100701)6份,按“2.2.3”項下方法制備供試品溶液,分別測定每份中雙酚A的含量,結(jié)果RSD=0.7%,表明重復性良好。2.8加樣回收試驗取輸液袋用聚碳酸酯組合蓋(批號:100701),按“2.2.3”項下方法制備供試品溶液,分別在0,1,6,12,24h進樣10μL,計算雙酚A峰面積的RSD。RSD=0.9%,表明雙酚A對照品在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.9加樣回收率試驗取輸液袋用聚碳酸酯組合蓋(批號:100701)9份,剪碎,精密稱取適量,分別精密加入雙酚A對照品溶液適量,按照上述方法測定輸液袋用聚碳酸酯中雙酚A的含量,結(jié)果平均回收率為96.2%,RSD為1.0%,見表1。2.10加樣回收率和rsd取輸液袋用聚碳酸酯組合蓋(批號:100701)9份,精密稱定,分別精密加入雙酚A對照品溶液適量,按照上述方法測定水中雙酚A的含量,結(jié)果平均回收率為97.4%,RSD為1.3%,見表2。2.11樣品測定2.11.1.測定了聚碳酸酯組中雙酚a含量的結(jié)論分別取3批雙酚A單體殘留量測定用供試品溶液和對照品溶液各10μL注入液相色譜儀,以外標法計算含量。結(jié)果見表3。2.11.2.雙酚a位移試驗的結(jié)果分別取上述3批雙酚A遷移測定用供試品溶液和對照品溶液各10μL注入液相色譜儀,以外標法計算含量,結(jié)果見表3。3聚碳酸酯組合蓋中雙酚a的遷移入水溶液中的濃度本實驗采用HPLC-DAD測定輸液袋用聚碳酸酯組合蓋中的雙酚A含量,并模擬輸液袋滅菌條件,考察了雙酚A向輸液袋中遷移的情況,為保證輸液袋用聚碳酸酯組合蓋用于輸液包裝的安全性提供試驗參考依據(jù)。本研究測得3批輸液袋用聚碳酸酯組合蓋中的雙酚A含量均為15mg·kg-1,但在模擬輸液滅菌,即121℃滅菌60min(比一般滅菌30min更加嚴格)條件后,浸出液中未檢出雙酚A,說明聚碳酸酯組合蓋中雙酚A未遷移入輸液中。以雙酚A檢出限0.01ng計算,