規(guī)模場豬偽狂犬病凈化技術(shù)規(guī)范

規(guī)模場豬偽狂犬病凈化技術(shù)規(guī)范范圍本文件規(guī)定了規(guī)模場豬偽狂犬病凈化中的術(shù)語與定義、凈化的凈化條件、凈化標準等。本文件適用于規(guī)模場開展豬偽狂犬病的凈化。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T18641偽狂犬病診斷技術(shù)術(shù)語和定義豬偽狂犬病豬偽狂犬病是由屬皰診病毒科、皰疹病毒甲亞科（α皰癥病毒）、暫定水痘病毒屬的豬偽狂犬病毒（porcinePseudorabiesvirus，PRV）引起的豬的急性傳染病。豬感染PRV具有年齡差異性，仔豬更容易感染，突然死亡，并出現(xiàn)特征性的神經(jīng)癥狀，如共濟失調(diào)、抽搐等；成年豬主要出現(xiàn)呼吸窘迫或亞臨床癥狀；在懷孕母豬可導致胎兒吸收、木乃伊胎或者流產(chǎn)。豬偽狂犬病凈化豬偽狂犬病凈化是指通過監(jiān)測、檢驗檢疫、隔離、撲殺等一系列綜合措施，在特定區(qū)域或場所消滅和清除豬偽狂犬病毒，從而達到并且維持在該范圍內(nèi)豬只個體不發(fā)病和無感染的狀態(tài)。從狹義上來說，豬偽狂犬病凈化是指在一個豬場，通過制定監(jiān)測方案，檢測出患?。ǜ腥荆┴i只，通過淘汰根除豬偽狂犬病的過程，主要是針對種豬場或規(guī)模豬場進行凈化；從廣義上來說，是通過監(jiān)測、檢驗檢疫、隔離、淘汰、培育健康豬群、強化區(qū)域性生物安全等綜合措施，在特定區(qū)域消滅豬偽狂犬病的過程。豬偽狂犬病毒gB抗體PRV囊膜蛋白gB誘導機體產(chǎn)生的中和抗體。囊膜蛋白gB是豬偽狂犬病毒中一種保守蛋白，并且是病毒感染過程中的必需成分，主要參與病毒與宿主細胞膜的融合過程。豬偽狂犬病毒gE抗體囊膜蛋白gE誘導機體產(chǎn)生中和抗體。囊膜蛋白gE是豬偽狂犬病毒中的一個非必需糖蛋白，gE缺失后不會影響病毒在宿主細胞上的增殖。豬偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗疫苗的毒株是利用基因工程等手段敲除PRVgE基因的突變株。豬免疫了gE缺失疫苗后不能產(chǎn)生抗gE糖蛋白的抗體。以gE抗體為標靶進行血清學檢測，可以區(qū)分免疫抗體和野毒感染抗體。豬偽狂犬病穩(wěn)定場豬群中有感染野毒的豬，但在體內(nèi)免疫抗體和場內(nèi)其他綜合防控措施的共同作用下，感染野毒的豬不表現(xiàn)或只有部分表現(xiàn)輕微的臨床癥狀時，即判定該豬場為豬偽狂犬病穩(wěn)定場。豬偽狂犬病發(fā)病場豬群中有感染野毒的豬，并表現(xiàn)出高燒，繼而出現(xiàn)厭食、精神萎靡、消化不良、口水增多、嘔吐、戰(zhàn)栗、最終出現(xiàn)共濟失調(diào)，尤其是后腿癥狀最明顯，呼吸道癥狀主要有咳嗽、打噴嚏、呼吸困難；初產(chǎn)母豬和母豬出現(xiàn)胚胎死亡、吸收胎、木乃伊胎、流產(chǎn)或死胎等臨床癥狀時，即判定該豬場為豬偽狂犬病發(fā)病場。豬偽狂犬病受威脅場已轉(zhuǎn)為豬偽狂犬病穩(wěn)定的豬場，其周邊5公里以內(nèi)的其他豬場暴發(fā)偽狂犬病時；在非免疫狀態(tài)下達到豬偽狂犬病凈化狀態(tài)的豬場，由于各種原因?qū)е碌牟≡M入場區(qū)時，即判定該豬場為豬偽狂犬病受威脅場。凈化條件凈化的準備工作使用豬偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗和gE-ELISA抗體檢測試劑盒，對豬群采血進行g(shù)E抗體監(jiān)測，掌握豬群中豬偽狂犬病毒野毒的感染情況。人財物意識支持，只有具備廣泛凈化共識，在人力、財力、物力等方面進行協(xié)調(diào)和支持，才能有效促進凈化工作的開展。區(qū)域化凈化部署，偽狂犬病具有傳播迅速特點，適合區(qū)域化凈化模式，制定相應的凈化路線，采取“檢測、消毒、撲殺、無害化處理、疫病凈化”的綜合性防控措施，以期取得確實的凈化效果。凈化的四個階段凈化前期準備階段本底調(diào)查按豬群規(guī)模的5%-10%進行采樣，進行病原和抗體檢測，檢測方法：按照GB/T18641中章5的規(guī)定，用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測gE和gB抗體，按照GB/T18641中章7的規(guī)定，用聚合酶鏈式反應檢測PRV核酸，確定豬群的野毒感染情況和免疫抗體水平。規(guī)范免疫程序所用滅活苗或活疫苗均為豬偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗豬偽狂犬病穩(wěn)定場：0-3日齡：活疫苗滴鼻免疫，45日齡免疫，70-75日齡，若生產(chǎn)周期在6-7個月的豬群在120日齡再免疫一次。后備豬：配種前8周免一次，配種前4周加強免疫。種豬：一年普免4次。豬偽狂犬病發(fā)病場或豬偽狂犬病受威脅場：種公豬和種母豬：緊急接種滅活疫苗，免疫兩次，兩次間隔4-6周，此外，在配種前（配種前20天左右）免疫一次，在產(chǎn)前1個月加強免疫一次。發(fā)病豬群：緊急接種活疫苗兩次，每次間隔4周。免疫控制階段加強生物安全措施引種要求：引入種豬應取得《種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營許可證》和《動物防疫條件合格證》，且豬偽狂犬病陰性的種豬場引種（包括精液），確定為PRVgE抗體陰性后方可引進。隔離檢疫：種豬入場后，需隔離飼養(yǎng)2個月，經(jīng)gE抗體檢測陰性再與本場豬混群，混群后每年3次檢測，平均每4個月檢測一次gE和gB抗體。養(yǎng)殖模式：采用自繁自養(yǎng)、全進全出、早期斷奶、多點式和獨立飼養(yǎng)等進行生產(chǎn)。人員和車輛管理：加強豬場門口來往人員、車輛的控制與消毒；根據(jù)養(yǎng)殖規(guī)模、生產(chǎn)條件和方式以及場區(qū)布局，合理規(guī)范飼養(yǎng)員、技術(shù)人員、管理人員的活動，嚴格執(zhí)行從業(yè)人員健康年檢和進場消毒；場外人員不得進入生產(chǎn)區(qū)。其他動物控制：豬場內(nèi)不得飼養(yǎng)其他動物。防止流浪犬貓等動物竄入場內(nèi)，采取嚴格的滅鼠措施，并定期開展滅蟲、滅蚊、滅蒼蠅工作。消毒：按照DB31/T432要求，選用優(yōu)質(zhì)低毒低殘留的消毒劑，對豬舍、欄圈、內(nèi)外環(huán)境、用具、運輸工具以及其它一切可能被污染的場所和設(shè)施、設(shè)備進行嚴格消毒，并將消毒工作規(guī)范化、制度化。異常豬處理：隔離病豬，淘汰無治療價值的病豬。對死亡豬只、死胎及相關(guān)物品等，進行無害化處理。飼料：按各生產(chǎn)階段豬的營養(yǎng)需要，提供均衡、適宜的飼料。在飼料生產(chǎn)、儲存、運輸和使用過程中，防止飼料的發(fā)霉、變質(zhì)和受污染。免疫與監(jiān)測使用含gE缺失的滅活疫苗對豬群進行免疫，并每半年按豬群總量的5%-8%進行抽樣，采血進行g(shù)E和gB抗體檢測。當豬群的gE抗體陽性率下降到20%左右后分群，gE抗體陽性豬與陰性豬分開飼養(yǎng)。將gE抗體陽性的種豬轉(zhuǎn)為商品豬，有計劃地逐步淘汰野毒感染豬只。強化gE抗體陰性群的隔離和監(jiān)測，最后建立起完全健康的gE抗體陰性豬群。免疫凈化階段對全場豬逐頭進行g(shù)E抗體檢測，淘汰（轉(zhuǎn)為商品豬）全部gE抗體陽性豬只；淘汰陽性豬后建立的陰性豬群，在逐一檢測后的一個月，按豬只總數(shù)的10%抽樣，復查gE抗體；步驟中若無gE抗體陽性豬，則三個月后再次按豬只總數(shù)10%的比例抽樣，再次進行g(shù)E抗體復查；步驟中連續(xù)的兩次復查為陰性，則每半年對豬群抽樣進行g(shù)E和gB抗體檢測，對豬群中免疫抗體水平和野毒感染情況進行監(jiān)視；步驟4.1.3.2-4.1.3.4中任意一個步驟的復查中出現(xiàn)了gE抗體陽性：若陽性率在1%-5%，則重新對全群逐一進行g(shù)E抗體檢測，剔除全部陽性豬只；若陽性率低于1%，則按步驟4.1.3.2-4.1.3.5，以建立的陰性豬群監(jiān)測方式進行。凈化維持階段常規(guī)監(jiān)測方案見附錄A。設(shè)立哨兵動物：在種豬舍放置豬偽狂犬gB抗體陰性仔豬，觀察是否感染和發(fā)病，檢測gE抗體情況，判斷是否感染野毒。加強引種監(jiān)測，禁止引入gE病XX性帶毒種豬進一步完善和鞏固生物安全措施規(guī)模場豬偽狂犬病的凈化標準免疫無疫標準同時滿足下列要求，視為達到免疫無疫標準生產(chǎn)母豬和后備種豬抽檢（抽檢要求見附錄B），豬偽狂犬病病毒gB抗體陽性率大于90%；種公豬、生產(chǎn)母豬和后備種豬抽檢（抽檢要求見附錄B），豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測均為陰性；連續(xù)兩年以上無臨床病例。凈化標準同時滿足以下要求，視為達到凈化標準種公豬、生產(chǎn)母豬和后備種豬抽檢（抽檢要求見附錄C），豬偽狂犬病病毒gE和gB抗體檢測均為陰性；停止免疫兩年以上，無臨床病例發(fā)生。

（規(guī)范性附錄）

規(guī)模場豬偽狂犬病常規(guī)監(jiān)測方案表A.1為本文件中規(guī)模場豬偽狂犬病凈化維持階段的常規(guī)監(jiān)測方案。規(guī)模場豬偽狂犬病常規(guī)監(jiān)測方案豬的類別抽樣比例監(jiān)測頻率監(jiān)測項目監(jiān)測結(jié)果用途公豬全群逐一檢測每年3次檢測，平均每4個月檢測一次偽狂犬gE和gB抗體檢測1）gE抗體陽性的建議轉(zhuǎn)商品豬淘汰2）gB抗體不合格的，加強免疫，連續(xù)兩次加強免疫不合格的，直接轉(zhuǎn)商品豬淘汰后備（公豬/母豬）全群逐一檢測1）4月齡（引種）2）8月齡（配種前20天）懷孕母豬和產(chǎn)房母豬全群的15-20%抽樣每年3次檢測，平均每4個月檢測一次1）gE抗體結(jié)果用于分析豬群是否感染野毒2）gB抗體結(jié)果用于本場免疫方案的調(diào)整（免疫前檢測就是抗體水平監(jiān)測，免疫后檢測就是免疫效果評估）仔豬20-30頭/次，每次隨機抽10窩，每窩隨機抽2-3頭仔豬35日齡、49日齡、63日齡分別檢測一次偽狂犬gB抗體檢測監(jiān)測仔豬體內(nèi)豬偽狂犬病毒的母源抗體水平的消長規(guī)律，用于判斷仔豬群的最佳免疫時間育肥豬30頭/次，每次隨機抽10欄，每欄隨機抽3頭77日齡、90日齡、120日齡分別檢測一次偽狂犬gE和gB抗體檢測1）gE抗體結(jié)果用于分析豬群是否感染野毒2）gB抗體結(jié)果用于免疫效果評估

（規(guī)范性附錄）

規(guī)模場豬偽狂犬病免疫無疫標準抽檢要求表B.1為本文件中規(guī)模場豬偽狂犬病凈化達到免疫無疫標準的抽檢要求。規(guī)模場豬偽狂犬病免疫無疫標準抽檢要求檢測項目檢測方法抽樣種群抽樣數(shù)量樣本類型抗體檢測gE-ELISA種公豬生產(chǎn)公豬存欄50頭以下，100%采樣；生產(chǎn)公豬存欄50頭以上，按照證明無疫的公式計算（置信區(qū)間：95%，預期流行率：3%）血清生產(chǎn)母豬后備種豬按照證明無疫的公式計算（置信區(qū)間：95%，預期流行率：3%）；隨機抽樣，覆蓋不同豬群血清抗體檢測gB-ELISA生產(chǎn)母豬按照預估流行率的公式計算（置信區(qū)間：95%，預期流行率：90%可接受誤差：10%）血清后備種豬按照預估流行率的公式計算（置信區(qū)間：95%，預期流行率：90%可接受誤差：10%）血清

（規(guī)范性附錄）

規(guī)模場豬偽狂犬病凈化