黃體酮緩釋凝膠的體外藥物釋放性質(zhì)研究

黃體酮緩釋凝膠的體外藥物釋放性質(zhì)研究

黃體酮緩沖液是將黃體酮與以卡波普和聚卡波列為基礎(chǔ)的凝膠中制備的陰道粘膜提取物的長期制備。由于聚卡波菲具有良好的生物粘附性,凝膠在用藥部位滯留時間長(可達(dá)72h),并持續(xù)釋放藥物。采用合理的體外釋放度測定方法可以考察藥物溶解度、藥物顆粒大小以及制劑的流變學(xué)性質(zhì)等理化參數(shù)對凝膠性能的影響。目前,體外釋放試驗已經(jīng)逐漸成為評價半固體制劑性能的標(biāo)準(zhǔn)測試方法,FDA建議用體外釋放度研究評價產(chǎn)品質(zhì)量和不同批次間的均一性。參照文獻(xiàn),作者采用自制的擴(kuò)散池裝置和普通的藥物溶出測定儀研究了黃體酮緩釋凝膠的體外藥物釋放性質(zhì),并對釋放度測定方法的建立和藥物釋放特征進(jìn)行分析。1試劑:清基本試劑,如黃體酮緩釋凝膠、黃體酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為8%、4%(自制),黃體酮對照品(中國藥品生物制品檢定所),十二烷基硫酸鈉(純度>86.4%,沈陽化學(xué)試劑廠),異丙醇(分析純,沈陽試劑三廠),其他試劑均為分析純。透析膜(截留分子質(zhì)量8000~10000)和微孔濾膜(0.45、0.8、3.0μm,MilliporeCorporation,Bedford,MA),ZDR—6B藥物溶出測定儀(上海黃海藥檢儀器廠),聚四氟乙烯樣品池(自制),恒溫水浴振蕩儀(丹東實(shí)驗儀器廠),高效液相色譜儀(日本島津)。2方法和結(jié)果2.1黃體酮濃度測定將過量的黃體酮加入體積分?jǐn)?shù)為30%的異丙醇水溶液(ISO)、5g·L-1十二烷基硫酸鈉水溶液(SDS)和5g·L-1十二烷基硫酸鈉溶液(SDS-4,以pH4.0的枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液為溶劑),(37±0.5)℃恒溫振蕩48h,用0.45μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液用溶劑適當(dāng)稀釋后,按《中華人民共和國藥典》(2000年版),采用HPLC法測定黃體酮的濃度,結(jié)果見表1。2.2藥液釋放度測定稱取黃體酮緩釋凝膠(約1.125g)置于樣品池中(如圖1所示),在樣品上覆蓋一張微孔濾膜(或透析膜),再依次放置硅橡膠密封墊和聚四氟乙烯墊圈,用螺栓固定。將上述裝置放入溶出杯中,釋放溶劑的容積為500mL,采用槳法裝置(轉(zhuǎn)速50r·min-1)測定藥物釋放度,釋放溶劑溫度為(37℃±0.5)℃。間隔一定時間取樣、過濾,取續(xù)濾液用HPLC測定。t時刻的累積藥物釋放量Mt對時間作圖,結(jié)果見圖2(A)、圖3和圖4。3討論3.1溶劑滿足溶解度要求FDA推薦半固體制劑的體外釋放度試驗采用Franz擴(kuò)散池,由于擴(kuò)散池容積的限制(一般為10∽15mL),對于水不溶性藥物很難選擇適當(dāng)?shù)尼尫湃軇M足溶解度要求,同時又不改變制劑的物理狀態(tài)。這一問題可以通過增加釋放介質(zhì)的容積解決,如歐洲藥典中透皮貼劑釋放度測定用的浸出池(extractioncell)或類似的裝置(如Vankel公司的EnhancerCellTM),可以與普通的溶出度儀配合使用,釋放溶劑的體積可在100∽1000mL內(nèi)變化,容易滿足漏槽條件,同時避免了使用易碎的擴(kuò)散池、循環(huán)泵和電磁攪拌等裝置,可獲得與Franz擴(kuò)散池法相似的釋放度測定結(jié)果。3.2釋放溶劑和釋放方式的選擇黃體酮為水不溶性藥物,用水作溶劑根本無法滿足釋放度測定所要求的漏槽條件,通?？梢栽卺尫湃軇┲屑尤肷倭勘砻婊钚詣┗虿捎糜袡C(jī)溶劑與水的混合溶劑以增加其溶解度。按照“2.2”條的釋放度測定條件,用500mLISO、SDS或SDS-4為釋放溶劑,在相當(dāng)長的釋放過程中能夠很好滿足漏槽條件。不同釋放溶劑中的體外藥物釋放度曲線見圖2(A)。ISO中藥物釋放速率較高,而SDS和SDS-4中的釋放緩慢,并且釋藥速率接近。在選擇釋放溶劑時,還應(yīng)考慮到釋放溶劑應(yīng)盡可能不對制劑的物理狀態(tài)產(chǎn)生影響,以免導(dǎo)致測定的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性差。黃體酮緩釋凝膠為陰道給藥制劑,其pH值與正常生理狀態(tài)下陰道粘液的pH值(4~5)一致,在此pH條件下,凝膠基質(zhì)中卡波普和聚卡波菲的羧基為游離態(tài),凝膠的粘膜粘附性強(qiáng)。如以SDS或ISO為釋放溶劑,隨著藥物的釋放,凝膠均吸收溶劑而發(fā)生明顯溶脹,而SDS-4為釋放溶劑,制劑的物理狀態(tài)無明顯變化,并且藥物累積釋放量與文獻(xiàn)中所報道的體內(nèi)吸收量接近。3.3膜孔徑對藥物釋放度的影響透析膜(截留分子質(zhì)量8000-10000)對藥物釋放的阻滯作用大,12h累積藥物釋放度小于0.5%;用微孔濾膜為支持膜,藥物釋放速率較快,膜孔徑對藥物釋放速率無明顯影響(圖3)。但使用孔徑大的微孔濾膜,往往會有較多的大分子物質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)入釋放溶劑,可能給樣品測定帶來不便。3.4黃體酮緩釋凝膠的藥物釋放度曲線作者分別采用Higuchi、一級和二級速率方程對累積藥物釋放量Mt的數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,結(jié)果見圖2(A)∽(C),黃體酮的釋放符合一級速率過程(r>0.99)。這一結(jié)果表明,黃體酮緩釋凝膠的藥物釋放可能是由固體藥物的溶解過程所控制的,而不同于多數(shù)凝膠制劑,其藥物的釋放為擴(kuò)散控制。聚卡波菲的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%,2%和4%的黃體酮緩釋凝膠(黃體酮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均為8%)的累積藥物釋放度曲線見圖4。由圖4可知,聚卡波菲含量增加,則藥物的釋放速率降低