2021-2022學(xué)年新教材人教版高中生物選擇性必修3第一章發(fā)酵工程 課后練習(xí)及綜合測(cè)驗(yàn)

第一章發(fā)酵工程

1.1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用...................................................1

1.2.1微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)..............................................8

1.2.2微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)...........................................14

1.3發(fā)酵工程及其應(yīng)用....................................................22

章末綜合測(cè)評(píng)...........................................................29

1.1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

題組一發(fā)酵與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)

1.下列有關(guān)發(fā)酵的敘述，正確的是（）

A.植物細(xì)胞無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的過(guò)程屬于發(fā)酵

B.乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過(guò)程屬于發(fā)酵

C.動(dòng)物細(xì)胞無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸的過(guò)程屬于發(fā)酵

D.發(fā)酵特指微生物細(xì)胞進(jìn)行無(wú)氧呼吸的過(guò)程

B［發(fā)酵利用的是微生物，A、C項(xiàng)錯(cuò)誤；微生物可通過(guò)無(wú)氧呼吸或有氧呼

吸將原料轉(zhuǎn)化為人類(lèi)所需要的產(chǎn)物，B項(xiàng)正確，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

2.下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.腐乳制作過(guò)程中，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸

B.腐乳制作過(guò)程中，酵母菌沒(méi)有參與豆腐的發(fā)酵

C.腐乳的制作利用了豆腐和空氣中天然存在的微生物

D.利用前一次發(fā)酵保存下來(lái)的面團(tuán)進(jìn)行發(fā)面，屬于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)

B［腐乳制作過(guò)程中，酵母菌、曲霉和毛霉等微生物參與了豆腐的發(fā)酵，其

中起主要作用的是毛霉。］

題組二泡菜的制作

3.下列關(guān)于乳酸菌的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）

A.乳酸菌的遺傳物質(zhì)是DNA

B.乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸和C02

C.乳酸菌與醋酸菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)相似

D.在泡菜制作過(guò)程中，起主要作用的是乳酸菌

B［乳酸菌屬于細(xì)胞生物，它的遺傳物質(zhì)為DNA,A項(xiàng)正確；乳酸菌只能

進(jìn)行無(wú)氧呼吸，其呼吸產(chǎn)物只有乳酸一種，B項(xiàng)錯(cuò)誤；乳酸菌與醋酸菌都是原核

生物，所以細(xì)胞結(jié)構(gòu)相似，C項(xiàng)正確；在泡菜制作過(guò)程中，起主要作用的是乳酸

菌，D項(xiàng)正確。］

4.下列關(guān)于泡菜發(fā)酵過(guò)程的敘述，正確的是（）

A.發(fā)酵時(shí)間越長(zhǎng)，亞硝酸鹽的含量越高

B.發(fā)酵過(guò)程中只有乳酸菌一種微生物發(fā)揮作用

C.發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌可以分解蛋白質(zhì)和果膠

D.發(fā)酵過(guò)程中要經(jīng)常補(bǔ)充水槽中的水

D［隨著發(fā)酵的進(jìn)行，亞硝酸鹽含量先逐漸增加，后又逐漸降低，A項(xiàng)錯(cuò)誤；

泡菜發(fā)酵過(guò)程中，發(fā)揮主要作用的是乳酸菌，此外酵母菌也發(fā)揮了作用，B項(xiàng)錯(cuò)

誤；發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌不分解蛋白質(zhì)和果膠，因而能使蔬菜脆嫩而不軟化，C項(xiàng)

錯(cuò)誤；經(jīng)常補(bǔ)充水槽中的水，目的是保持壇內(nèi)的無(wú)氧狀態(tài)，D項(xiàng)正確。］

5.為了在市場(chǎng)上有競(jìng)爭(zhēng)力，泡菜廠家需要不斷地開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品。下面哪項(xiàng)不

是開(kāi)發(fā)新產(chǎn)品所考慮的內(nèi)容（）

A.對(duì)泡菜菜料進(jìn)行創(chuàng)新拓展

B.對(duì)水與鹽的比例進(jìn)行調(diào)整

C.對(duì)香辛料的種類(lèi)和比例進(jìn)行調(diào)整

D.對(duì)通氣發(fā)酵和密封發(fā)酵的時(shí)間比例進(jìn)行調(diào)整

D［可以改善泡菜品質(zhì)的措施：制作材料的選擇、水與鹽的比例、香辛料的

種類(lèi)和比例等。泡菜制作時(shí)不進(jìn)行通氣發(fā)酵，D符合題意。］

題組三果酒和果醋的制作

6.下列有關(guān)酵母菌和醋酸菌的敘述，不正確的是（）

A.兩者的正常繁殖都離不開(kāi)氧氣

B.在無(wú)氧條件下，酵母菌可以生產(chǎn)酒精，醋酸菌則不能生產(chǎn)乙酸

C.兩者都是異養(yǎng)生物，生存都離不開(kāi)葡萄糖

D.醋酸菌可以酵母菌的某種代謝產(chǎn)物為原料來(lái)合成乙酸

C［醋酸菌是好氧生物，在氧氣充足的環(huán)境中才能完成其正常的生理活動(dòng)：

酵母菌屬于兼性厭氧生物，在有氧和無(wú)氧環(huán)境中都能生存，但其無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的

能量少，僅能滿足其自身代謝的需求，在無(wú)氧時(shí)酵母菌基本不繁殖，所以兩者的

正常繁殖都離不開(kāi)氧氣。醋酸菌在然乏糖源時(shí)，能以酒精為原料合成乙酸，而酵

母菌在無(wú)氧環(huán)境中能產(chǎn)生酒精。］

7.家庭中利用鮮葡萄制作葡萄酒時(shí)，操作不正確的是（）

A.沖洗后的葡萄破碎后裝入發(fā)酵瓶

B.葡萄漿不裝滿發(fā)酵瓶，留有1/3空間

C.發(fā)酵瓶及葡萄漿進(jìn)行煮沸處理

D.28c左右密閉發(fā)酵并適時(shí)排氣

C［沖洗后的葡萄破碎后裝入發(fā)酵瓶，A正確；葡萄漿不裝滿發(fā)酵瓶，留有

1/3空間，為酵母菌的增殖提供氧氣，B正確；果酒制作過(guò)程利用的是葡萄皮上

攜帶的野生酵母菌，煮沸處理會(huì)將酵母菌殺死，C錯(cuò)誤；酵母菌無(wú)氧呼吸時(shí)產(chǎn)生

酒精，28°C左右密閉發(fā)酵能得到酒精，并適時(shí)排出二氧化碳，以降低壓強(qiáng)，D

正確。］

8.下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，不正確的是（）

A.果酒和果醋的發(fā)酵菌種不同，代謝類(lèi)型也不同

B.在釀葡萄酒之前要先除去枝梗，再?zèng)_洗葡萄

C.沖洗葡萄，目的是去掉葡萄表面的污物，但不能沖洗次數(shù)過(guò)多

D.在變酸的果酒表面觀察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的

B［果酒制作用到的微生物主要是酵母菌，代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型；果

醋制作用到的微生物主要是醋酸菌，代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型，A項(xiàng)正確：在釀葡

萄酒之前栗先沖洗葡萄，再除去枝梗，B項(xiàng)錯(cuò)誤；沖洗葡萄，目的是去掉葡萄表

面的污物，但不能沖洗次數(shù)過(guò)多，否則會(huì)使附著在葡萄表面的酵母菌數(shù)量太少，

不利于發(fā)酵，C項(xiàng)正確；在變酸的果酒表面觀察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁

殖而形成的，D項(xiàng)正確。］

9.果醋有消除疲勞和減肥等功效，深受廣大女士的喜愛(ài)。某酒廠的果酒滯

銷(xiāo)，計(jì)劃將生產(chǎn)的部分果酒“轉(zhuǎn)變”為果醋。研究人員設(shè)置了如下圖所示的裝置,

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)果酒和果醋的制作分別利用了(填微生物名稱(chēng))。果酒制

作時(shí)溫度應(yīng)控制在________,果醋制作時(shí)溫度應(yīng)控制在o

(2)由果酒“轉(zhuǎn)變”成果醋的制作過(guò)程中需要改變的環(huán)境條件是

(3)乙裝置瓶為發(fā)酵瓶，你認(rèn)為甲、丙兩個(gè)裝置瓶中，盛有果酒和果醋的裝

置瓶分別是。在乙裝置瓶中，發(fā)酵菌先將乙醇變?yōu)?最后變?yōu)橐?/p>

酸。

［解析］(1)果酒、果醋的制作菌種分別是酵母菌和醋酸菌，二者的最適生長(zhǎng)

溫度不同，果酒制作的最適溫度為18—30℃,果醋制作的最適溫度為30—35℃o

(2)果酒發(fā)酵主要為無(wú)氧發(fā)酵的過(guò)程，而果醋發(fā)酵為有氧發(fā)酵的過(guò)程，二者的發(fā)

酵溫度不同，因此由果酒“轉(zhuǎn)變”成果醋的制作過(guò)程需要改變發(fā)酵溫度和氣體條

件(氧氣)。(3)由題圖可知，甲裝置瓶?jī)?nèi)應(yīng)為果酒，丙裝置瓶?jī)?nèi)應(yīng)為果醋，在糖源

不足時(shí)，醋酸菌先將乙醇變?yōu)橐胰?，最后變?yōu)橐宜帷?/p>

［答案］(1)酵母菌和醋酸菌28℃左右30?35℃(2)溫度和氧氣(3)

甲、丙乙醛

10.(2021?順義區(qū)統(tǒng)考)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)操作及原理的敘述，正確的是

()

A.毛霉可將豆腐中蛋白質(zhì)分解為氨基酸

B.果醋制作中，產(chǎn)生乙酸需要無(wú)氧條件

C.泡菜制作中，水封的主要目的是防止污染

D.果酒制作中，瓶中裝滿果汁保證無(wú)氧環(huán)境

A［制作腐乳主栗是利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐內(nèi)的

蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪分解成甘油和脂肪酸，從而改變豆腐的

成分和口味，A正確；參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)

需氧型，B錯(cuò)誤；制作泡菜是利用乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸的原理，故制作泡菜

時(shí)要用特殊的壇子，壇子需加水密封，主要目的是提供無(wú)氧環(huán)境，C錯(cuò)誤；果酒

制作中，瓶中果汁裝至2/3處，保證前期發(fā)酵過(guò)程中酵母菌的有氧呼吸，增加酵

母菌的數(shù)量，后期由于氧氣耗盡形成無(wú)氧環(huán)境，保證酵母菌無(wú)氧環(huán)境產(chǎn)生酒精，

D錯(cuò)誤。］

11.（2021.常熟檢測(cè)）下列關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作的敘述，正確的是（）

A.在果酒、果醋和腐乳制作全過(guò)程中，都需要嚴(yán)格滅菌

B.果酒發(fā)酵、果醋發(fā)酵過(guò)程中溫度分別控制在30℃、20℃

C.果醋發(fā)酵過(guò)程中，要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣

D.利用酵母菌釀酒時(shí)，密封時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)生的酒精量就越多

C［在制作果酒、果醋和腐乳的全過(guò)程中，不需要嚴(yán)格滅菌，A錯(cuò)誤；果酒

的適宜發(fā)酵溫度是28°C：果醋發(fā)酵的適宜溫度是30?35°C,B錯(cuò)誤；由于醋酸

菌是需氧型生物，在果醋發(fā)酵過(guò)程中，要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣，C正確；利用酵

母菌釀酒時(shí)，在一定范圍內(nèi)，發(fā)酵時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)生的酒精量越多，但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)后，

由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗等原因，酒精產(chǎn)量減少，D錯(cuò)誤。］

12.下列有關(guān)果酒、果醋制作的說(shuō)法，正確的是（）

A.在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中始終通入無(wú)菌空氣制作果酒

B.傳統(tǒng)發(fā)酵中，果酒和果醋的制作都沒(méi)有接種菌種，而是利用了天然存在

的菌種

C.將果酒流經(jīng)發(fā)酵瓶制成果醋，則生成果醋的過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生CO2

D.在用果汁制果酒的過(guò)程中，發(fā)酵瓶溶液中pH的變化是先減小后增大

B［果酒的制作需要利用酵母菌的無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，A項(xiàng)錯(cuò)誤；傳統(tǒng)發(fā)酵

中，果酒和果醋的制作都利用了天然存在的菌種，不需要再接種菌種，B項(xiàng)正確；

將果酒流經(jīng)發(fā)酵瓶制成果醋時(shí)，醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變?yōu)橐宜岬倪^(guò)程中無(wú)C02生成，

C項(xiàng)錯(cuò)誤；在用果汁制果酒的過(guò)程中，發(fā)酵瓶溶液中pH減小，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

13.從古至今人們廣泛利用微生物發(fā)酵進(jìn)行食品加工，如釀酒、制醋等。請(qǐng)

回答下列相關(guān)問(wèn)題。

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)經(jīng)常采用野生菌種，在家庭中以葡萄為原料制作葡萄酒時(shí),

可以不添加菌種，原因是，但現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)常采用純化的優(yōu)良

菌種，這樣可以O(shè)

(2)釀酒時(shí)，溫度應(yīng)該控制在________o某同學(xué)在通過(guò)發(fā)酵制作果酒時(shí)，發(fā)

現(xiàn)在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是0

在制作葡萄酒的過(guò)程中，如果密封不嚴(yán)混入空氣，發(fā)酵液會(huì)變酸，可能的原

因是，反應(yīng)簡(jiǎn)式是0

(3)在果酒制作中，加入的新鮮葡萄汁沒(méi)有經(jīng)過(guò)滅菌處理，但是在制出的果

酒中基本檢測(cè)不出酵母菌以外的雜菌，從生態(tài)學(xué)角度分析：一是酵母菌與雜菌之

間存在_____________關(guān)系；二是由于果酒中的不利于雜菌的生長(zhǎng)。

［解析］(1)在家庭中以葡萄為原料制作葡萄酒時(shí)，不添加酵母菌，原因是在

葡萄皮表面附著有大量的野生酵母菌；現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵用純化的優(yōu)良菌種進(jìn)行發(fā)

酵，可以避免雜菌污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。(2)酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18—

30℃o制作果酒時(shí)，在原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是酵母

菌可以利用糖進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精；在制作葡萄酒的過(guò)程中，如果密封不嚴(yán)混

入空氣，發(fā)酵液會(huì)變酸，可能的原因是醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸。在書(shū)寫(xiě)反應(yīng)式時(shí)，

反應(yīng)物是C2H50H和。2，生成物是CH3coOH和水，還有能量，箭頭上注明酶。

(3)加入的新鮮葡萄汁沒(méi)有進(jìn)行滅菌處理，但是在制出的果酒中基本檢測(cè)不出酵

母菌以外的雜菌，從生態(tài)學(xué)角度分析：一是酵母菌在與雜菌之間的競(jìng)爭(zhēng)中取得優(yōu)

勢(shì)，二是果酒中的酒精不利于雜菌生長(zhǎng)，從而淘汰掉雜菌。

［答案］(1)葡萄皮表面附著有大量的野生酵母菌避免雜菌污染，保證產(chǎn)品

的質(zhì)量(2)18?30℃酵母菌可以利用糖進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精醋酸菌發(fā)酵

產(chǎn)生乙酸C2H5OH+O2——>CH3coOH+H2O+能量(3)競(jìng)爭(zhēng)酒精

14.葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒，請(qǐng)利用相關(guān)的知識(shí)回答問(wèn)題：

注：各發(fā)酵瓶的左側(cè)管為充氣管，右側(cè)管為排氣管。

(1)利用葡萄制作葡萄酒的過(guò)程中，發(fā)揮作用的微生物是

⑵該微生物通過(guò)無(wú)氧呼吸可分解，產(chǎn)生的終產(chǎn)物是和

（3）甲、乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度

等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如圖所示。發(fā)酵過(guò)程中，每隔一段時(shí)間均需排氣一次。

據(jù)圖分析，甲和丙同學(xué)的操作有誤，其中甲同學(xué)的錯(cuò)誤是,

導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異?，F(xiàn)象是o丙同學(xué)的錯(cuò)誤是

,導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異?，F(xiàn)象是o上述發(fā)酵

過(guò)程結(jié)束后，甲、乙、丙同學(xué)實(shí)際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是、、

（4）在上述制作葡萄酒的過(guò)程中，假設(shè)乙同學(xué)的某一步驟操作錯(cuò)誤導(dǎo)致發(fā)酵

瓶瓶塞被沖開(kāi)，該錯(cuò)誤操作是o

I解析］（1）（2）果酒制作過(guò)程是利用酵母菌的無(wú)氧呼吸分解葡萄糖產(chǎn)生酒精

和CO2o（3）甲瓶充氣管沒(méi)有夾子。丙瓶發(fā)酵液的液面過(guò)高，淹沒(méi)了排氣管在瓶

內(nèi)的管口。甲瓶中酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的C02使瓶?jī)?nèi)氣壓增大，排氣管不

能排氣，因此發(fā)酵液會(huì)從充氣管流出，甲瓶中有氧氣會(huì)進(jìn)行醋酸發(fā)酵。丙瓶中酵

母菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的C02使瓶?jī)?nèi)氣壓增大，排氣時(shí)發(fā)酵液從排氣管流出。（4）乙

同學(xué)的操作錯(cuò)誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開(kāi)，則該錯(cuò)誤操作一定是沒(méi)有及時(shí)排氣。

［答案］（1）酵母菌（2）葡萄糖酒精C02（3）未夾住發(fā)酵瓶的充氣管

發(fā)酵液從充氣管流出，發(fā)酵液變酸瓶中發(fā)酵液過(guò)多，淹沒(méi)了排氣管在瓶?jī)?nèi)的管

口排氣時(shí)發(fā)酵液從排氣管流出葡萄醋（或果醋）葡萄酒（或果酒）葡萄酒

（或果酒）（4）未及時(shí)排氣

15.（2020.江蘇無(wú)錫一模）下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，正確的是（）

A.果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵所需的

B.果酒發(fā)酵后期擰松瓶蓋的間隔時(shí)間應(yīng)縮短

C.在制作果醋時(shí)適當(dāng)加大菌種接種量可以提高發(fā)酵速率

D.醋酸菌在無(wú)氧條件下可以利用乙醇產(chǎn)生乙酸

C［果酒發(fā)酵所需的最適溫度低于果醋發(fā)酵所需的，A項(xiàng)錯(cuò)誤；在果酒發(fā)酵

后期，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少、代謝廢物積累等因素，酵母菌呼吸速率減慢，產(chǎn)生的

二氧化碳減少，因此擰松瓶蓋的間隔時(shí)間可延長(zhǎng)，B項(xiàng)錯(cuò)誤；在制作果酒和果醋

時(shí)，適當(dāng)加大菌種接種量，可以提高發(fā)酵速率，并抑制雜菌繁殖，C項(xiàng)正確；醋

酸菌是好氧細(xì)菌，其發(fā)酵產(chǎn)生乙酸必須在有氧條件下進(jìn)行，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

121微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

題組一制備培養(yǎng)基

1.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是（）

A.培養(yǎng)基所含物質(zhì)的成分都相同

B.培養(yǎng)基只能用于培養(yǎng)微生物

C.向固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基

D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可形成肉眼可見(jiàn)的菌落

D［培養(yǎng)基的成分不一定都相同，根據(jù)培養(yǎng)物的不同可進(jìn)行調(diào)整，A錯(cuò)誤；

培養(yǎng)基既能用于培養(yǎng)微生物，也可用于微生物的分離、純化和鑒定，B錯(cuò)誤；固

體培養(yǎng)基中去除瓊脂即可制成液體培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤。］

2.下列關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法，正確的是（）

A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源

B.凡是碳源都能提供能量

C.除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽

D.無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量

D［對(duì)一些微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、0、N的化合物既是碳源，又是氮源。

C02是光能自養(yǎng)細(xì)菌的碳源，但不能提供能量。C02和N2都是無(wú)機(jī)物，也是微

生物的碳源和氮源。硝化細(xì)菌所利用的氮源是氮，氮為無(wú)機(jī)氟源，同時(shí)氮也為硝

化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能源。］

3.培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物和培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物的主要區(qū)別是（）

A.培養(yǎng)過(guò)程對(duì)氧氣的需求不同

B.培養(yǎng)基中碳源不同

C.培養(yǎng)基中氮源不同

D.培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽不同

B［自養(yǎng)型微生物可以把無(wú)機(jī)物合成為有機(jī)物，在培養(yǎng)過(guò)程中不需要添加有

機(jī)碳化合物，異養(yǎng)型微生物需要利用現(xiàn)成的有機(jī)物，在培養(yǎng)過(guò)程中需要添加有機(jī)

碳化合物，B項(xiàng)符合題意。］

題組二無(wú)菌技術(shù)

4.下列操作與消毒或滅菌無(wú)關(guān)的是（）

A.接種前用酒精燈火焰灼燒接種環(huán)

B.接種前用酒精擦拭雙手

C.將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

D.在酒精燈的火焰旁完成接種

C［接種用具、器皿、空氣中都存在大量微生物，必須進(jìn)行嚴(yán)格地消毒或滅

菌。A、B、D三項(xiàng)都是實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中涉及的消毒或滅菌的措施。將平板倒置，

放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)與滅菌無(wú)關(guān)。］

5.下列關(guān)于滅菌和消毒的理解，不正確的是（）

A.滅菌是指殺滅物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽抱和抱子

B.常用消毒方法有加熱法、紫外線法、化學(xué)藥劑法

C.接種環(huán)用灼燒法滅菌

D.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的

D［滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽花和

施子，A項(xiàng)正確；常用消毒方法有煮沸消毒法（加熱法）、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑

消毒法、紫外線消毒法等，B項(xiàng)正確；接種環(huán)用灼燒法滅菌，C項(xiàng)正確；滅菌是

將物體內(nèi)外的所有微生物全部殺滅，包括芽施和施子，消毒是殺死物體表面或內(nèi)

部的一部分微生物，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

6.防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列

敘述錯(cuò)誤的是（）

A.實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒

B.接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌

C.在實(shí)驗(yàn)室中，切不可吃東西、喝水，離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手，防止被

微生物感染

D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境

B［接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部

位灼燒滅菌，B錯(cuò)誤。］

題組三微生物的純培養(yǎng)

7.下列有關(guān)倒平板操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上

B.使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰

C.將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上

D.等待培養(yǎng)基冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置

C［整個(gè)倒平板過(guò)程要防止外來(lái)雜菌的入侵，因此滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿應(yīng)放在火

焰旁，打開(kāi)的錐形瓶瓶口應(yīng)迅速通過(guò)火焰，培養(yǎng)皿應(yīng)打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，

而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開(kāi)，等待培養(yǎng)基冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置。］

8.將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37°C恒溫箱的目的是

（）

A.對(duì)比觀察培養(yǎng)基有沒(méi)有被微生物利用

B.對(duì)比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染

C.沒(méi)必要放入未接種的培養(yǎng)基

D.為了下次接種時(shí)再使用

B［對(duì)未接種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，起到對(duì)照作用，可用來(lái)確定培養(yǎng)基是否被

雜菌污染。］

9.下列關(guān)于平板劃線操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.每次劃線前都要灼燒接種環(huán)

B.灼燒接種環(huán)后，要立即用接種環(huán)接種，防止雜菌污染接種環(huán)

C.要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

D.接種前，要將菌種試管口通過(guò)火焰

B［灼燒接種環(huán)后，將接種環(huán)伸入管內(nèi)，讓環(huán)端先接觸培養(yǎng)基上未長(zhǎng)菌的部

位，使其冷卻，然后輕輕挑取少量菌體，再進(jìn)行接種。灼燒接種環(huán)后，不可立即

用接種環(huán)接種，以免接種環(huán)溫度過(guò)高，將菌種殺死。］

10.下圖是某同學(xué)分離和培養(yǎng)土壤中微生物的部分操作步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意

圖?；卮鹣铝袉?wèn)題:

(1)利用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物時(shí)，除考慮各種營(yíng)養(yǎng)條件外，還需

要控制的培養(yǎng)條件有(至少寫(xiě)兩點(diǎn))等。接種前應(yīng)該先檢測(cè)固

體培養(yǎng)基是否被污染，檢測(cè)的具體方法是。

(2)圖示中用平板劃線法接種的操作順序是A-B-；以上操作步

驟中存在明顯錯(cuò)誤的是(用字母表示)，該操作的正確方法是

［解析］(1)若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤中的微生物，除考慮各種營(yíng)養(yǎng)條件外，還

要考慮溫度、pH、氧氣、無(wú)菌和滲透壓等條件。檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否被污染的

方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌

落產(chǎn)生。(2)圖示是平板劃線法接種操作示意圖，其操作順序是

A-B-E-D-C-F;為了防止雜菌污染，接種應(yīng)該在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，因

此以上操作中存在錯(cuò)誤的步驟是Co

［答案］(1)溫度、pH、氧氣、無(wú)菌將未接種的培養(yǎng)基在適宜的環(huán)境中放置

一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(2)E-*D-C-FC在酒精燈的火

焰旁劃線

11.下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，正確的是()

A.配制細(xì)菌培養(yǎng)基過(guò)程中，需要在倒平板時(shí)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH

B.配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂，其作用是為微生物生長(zhǎng)提供碳源

C.平板劃線法接種時(shí)，每次劃線之前都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌

D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用完的培養(yǎng)基可以直接丟棄

C［配制細(xì)菌培養(yǎng)基過(guò)程中，需要在滅菌前調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,A錯(cuò)誤；配

制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂，其作用是作為凝固劑，而不是為微生物生長(zhǎng)提供碳源，

B錯(cuò)誤；平板劃線法接種時(shí)，每次劃線之前和之后都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，C正

確；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用完的培養(yǎng)基需要經(jīng)過(guò)滅菌操作后才可以丟棄，D錯(cuò)誤。］

12.下圖表示培養(yǎng)和純化X細(xì)菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是

()

①②③

A.對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌處理

B.步驟①倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)立即將其倒過(guò)來(lái)放置

C.步驟②應(yīng)多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋?zhuān)囵B(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落

D.步驟③劃線結(jié)束后在培養(yǎng)皿蓋上做好標(biāo)注

C［圖中①是倒平板，②是進(jìn)行平板劃線，③是培養(yǎng)。對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、

操作者的衣著和手需要進(jìn)行消毒處理，A項(xiàng)錯(cuò)誤；倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿蓋，

冷卻后將平板倒過(guò)來(lái)放置，B項(xiàng)錯(cuò)誤；步驟②應(yīng)多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀

釋?zhuān)囵B(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落，C項(xiàng)正確；圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)皿底標(biāo)注菌種及

接種日期等信息，而不是在培養(yǎng)皿蓋上做標(biāo)注，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

13.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，錯(cuò)誤的是()

A.第一次操作前灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培

養(yǎng)物

B.每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌

種

C.在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液

D.劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)

境或感染操作者

C［平板劃線法通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集

的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，以形成單菌落。因此，每次劃線時(shí)，都應(yīng)

將接種環(huán)上原有的菌體殺死，劃線時(shí)分散的菌體來(lái)自上次劃線結(jié)束時(shí)的菌體。］

14.請(qǐng)回答下列與大腸桿菌純培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題：

(1)制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行,

培養(yǎng)基在接種前要進(jìn)行滅菌。

⑵純化大腸桿菌

①通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種

逐步分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)

的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體，這種方法稱(chēng)為o

②用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)（填“需要”或“不需要”）設(shè)置對(duì)

照組，為什么？。

（3）討論分析

①純化大腸桿菌時(shí)，（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防

止雜菌感染。

②用該方法分離大腸桿菌時(shí)，從第二次劃線操作起，每次總是要從上一次劃

線的末端開(kāi)始劃線，并劃線數(shù)次，其原因是o

③大腸桿菌與酵母菌的最本質(zhì)區(qū)別是。

［解析］（1）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)節(jié)pH,培養(yǎng)

基在接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（2）①題干所述接種方法為平板劃線法。②平

板劃線法接種微生物時(shí)，需要進(jìn)行不接種的空白培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，以判斷培養(yǎng)基是否被

污染，所以用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組。（3）①大腸桿菌屬于細(xì)

菌，對(duì)抗生素敏感，培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)不能用加入抗生素的方法防止雜菌感染。②

平板劃線法分離大腸桿菌時(shí)，從第二次劃線操作起，每次總是栗從上一次劃線的

末端開(kāi)始劃線，并劃線數(shù)次，其原因是線條的末端的細(xì)菌數(shù)量少，最終可以得到

由單個(gè)細(xì)菌繁殖而形成的菌落。③大腸桿菌屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，

它們最本質(zhì)的區(qū)別是大腸桿菌無(wú)成形的細(xì)胞核。

［答案］（1）調(diào)節(jié)pH高壓蒸汽（2）①平板劃線法②需要可用來(lái)判斷培

養(yǎng)基是否被污染（3）①不可②線條末端的細(xì)菌數(shù)量少，最終可得到由單個(gè)細(xì)

菌繁殖而形成的菌落③大腸桿菌無(wú)成形的細(xì)胞核

15.微生物培養(yǎng)過(guò)程中，要重視無(wú)菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也

要進(jìn)行無(wú)菌操作，防止雜菌污染，請(qǐng)分析下列操作，正確的是（）

A.煮沸消毒法中100℃煮沸5-6min可以殺死全部微生物的細(xì)胞和芽抱、

抱子

B.將接種環(huán)直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速?gòu)氐椎販缇?/p>

C.加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌

D.家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌

B［煮沸消毒可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽抱，而滅菌能殺滅環(huán)境中

一切微生物，包括抱子和芽匏，A錯(cuò)誤；指示劑和染料可能混有微生物，因此加

入培養(yǎng)基中的指示劑和染料也需栗滅菌，C錯(cuò)誤；家庭制作葡萄酒時(shí)，要將容器

進(jìn)行滅菌或消毒，但是葡萄不能滅菌，因?yàn)榘l(fā)酵用的酵母菌來(lái)自葡萄，D錯(cuò)誤。］

1.2.2微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

題組一選擇培養(yǎng)基

1.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對(duì)培養(yǎng)基的要求是()

①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡

萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽

A.①③⑤⑦B.②④⑥⑧

C.①③⑤⑧D.①④⑥⑦

C［尿素和硝酸鹽都能作為氮源，而培養(yǎng)尿素分解菌的培養(yǎng)基應(yīng)是以尿素為

唯一氮源的固體培養(yǎng)基。因此培養(yǎng)基中應(yīng)不加硝酸鹽，加入尿素和瓊脂。葡萄糖

作為碳源，也需要加入。］

2.某同學(xué)成功分離出了土壤中的固氮菌，結(jié)果如圖所示。該實(shí)驗(yàn)使用了

()

A.平板劃線法"二F三%

B.液體培養(yǎng)基

C.不含氮源的培養(yǎng)基7"一二^

D.不含碳源的培養(yǎng)基

C［圖示結(jié)果呈現(xiàn)的是單個(gè)菌落，故該實(shí)驗(yàn)采用了稀釋涂布平板法，A項(xiàng)錯(cuò)

誤；在固體培養(yǎng)基上才能形成菌落，B項(xiàng)錯(cuò)誤；要分離土壤中的固氮菌，應(yīng)該用

不含氮源的選擇培養(yǎng)基，C項(xiàng)正確；固氮菌為異養(yǎng)型生物，因此所用培養(yǎng)基需要

加入碳源，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

3.為了從土壤中分離獲得尿素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了A、B兩種

培養(yǎng)基，其成分如下表所示。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題:

項(xiàng)目葡萄糖尿素瓊脂水

KH2P。4Na2HPO4MgSO4-7H2O

培養(yǎng)

++++—++

基A

培養(yǎng)

+++++一+

基B

注："+"表示有，"一”表示無(wú)。

（1）培養(yǎng)基中的葡萄糖能為細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖提供和o通

常情況下，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)微生物的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原

因是o

（2）據(jù)表判斷，培養(yǎng)基A（填“能”或“不能”）用于分離獲得尿素分

解菌的單菌落，原因是;

培養(yǎng)基B不能用于分離尿素分解菌，原因是o

［解析］（1）培養(yǎng)基中的葡萄糖作為能源物質(zhì)能作為細(xì)菌細(xì)胞呼吸的底物，為

細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖提供能量；葡萄糖氧化分解的中間產(chǎn)物能為合成其他有機(jī)物提供

原料。不同微生物生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同，如培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將pH調(diào)至

酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)至中性或微堿性。（2）培養(yǎng)基A沒(méi)有添加尿素或

其他氮源物質(zhì)，尿素分解菌不能獲得氮源而無(wú)法生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)基B沒(méi)有添加

凝固劑——瓊脂，屬于液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基不能將培養(yǎng)的目的菌分散成單個(gè)

的細(xì)菌，而無(wú)法獲得單菌落。

［答案］（1）能量（能源）碳源（合成其他有機(jī)物的原料或中間物質(zhì)）不同微

生物生長(zhǎng)繁殖所需要的適宜pH不同（2）不能該培養(yǎng)基缺少氮源，尿素分解菌

不能獲得氮源而無(wú)法生長(zhǎng)繁殖培養(yǎng)基沒(méi)有凝固劑，是液體培養(yǎng)基，不能將目

的菌分散成單個(gè)細(xì)菌而無(wú)法獲得單菌落

題組二微生物的選擇培養(yǎng)

4.原油中含有大量有害的、致癌的多環(huán)芳燒。土壤中有些細(xì)菌可以利用原

油中的多環(huán)芳煌為碳源，在培養(yǎng)基中形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌

株并投入除污，某小組同學(xué)設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是

A.應(yīng)配制來(lái)源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用

B.配制以多環(huán)芳姓為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基

C.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇培養(yǎng)基上

D.在選擇培養(yǎng)基上能形成分解圈的即為所需菌種

C［為了篩選、獲取能利用多環(huán)芳燒為碳源的菌種，首先是取材，應(yīng)配制來(lái)

源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用，A項(xiàng)正確；其次配制以多環(huán)芳煌為唯一

碳源的選擇培養(yǎng)基，B項(xiàng)正確；然后進(jìn)行接種，在無(wú)菌環(huán)境下，將土壤稀釋液接

種到選擇培養(yǎng)基上，在適宜的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，若將土壤稀釋液進(jìn)行滅菌，就不

能篩選出能高效降解原油的菌株，C項(xiàng)錯(cuò)誤；在選擇培養(yǎng)基上形成的菌落，若該

菌落周?chē)蟹纸馊?，即為所需菌種，D項(xiàng)正確。］

5.下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的過(guò)程示意圖，有關(guān)

敘述錯(cuò)誤的是（）

①制備紅棕②在選擇培③篩選、純化分④細(xì)菌分解尿素能

壤浸出液養(yǎng)基中培養(yǎng)解尿素的細(xì)菌力的鑒定和比較

A.在配制步驟②③的培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.步驟③純化分解尿素的細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散，可以獲得單細(xì)

胞菌落

C.步驟③采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基中加入尿素

D.步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細(xì)菌分解尿素的能力

C［配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A項(xiàng)正確；步驟③純

化分解尿素的細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌通過(guò)稀釋涂布平板法分散，獲得單細(xì)胞

菌落，B項(xiàng)正確；步驟③篩選分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一氮源，

C項(xiàng)錯(cuò)誤；步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細(xì)菌分解尿素的能力，

D項(xiàng)正確。］

6.某種菌在30C的環(huán)境下，經(jīng)過(guò)6周后會(huì)產(chǎn)生2種不同的酶，幾乎可將

PET塑料完全分解。下圖是分離、純化和保存菌株的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是

樣品樣品懸液平板1平板2

A.塑料垃圾中含有大量微生物，是分離該菌株的首選樣品

B.篩選培養(yǎng)基中需要加入PET塑料粉末，通過(guò)菌落特征挑出分解PET塑

料的菌落

C.通過(guò)涂布平板法可以獲得單菌落

D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可在常溫下長(zhǎng)期保存菌株

B［塑料垃圾中含有大量微生物，但不一定含有分解PET塑料的菌株，A

項(xiàng)錯(cuò)誤；篩選培養(yǎng)基中需要加PET塑料粉末，通過(guò)菌落特征挑出分解PET塑料

的菌落，從而獲得分解PET塑料的菌株，B項(xiàng)正確；在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落,

可以通過(guò)劃線或稀釋涂布平板法進(jìn)一步純化得到單個(gè)菌落，C項(xiàng)錯(cuò)誤；斜面培養(yǎng)

基中含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可在低溫下臨時(shí)保存菌株，如果長(zhǎng)期保存菌株應(yīng)選擇甘

油管藏法，D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

題組三微生物數(shù)量的測(cè)定

7.下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法的敘述，不正確的是（）

A.采用稀釋涂布平板法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的活菌數(shù)

B.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，一個(gè)活菌往往會(huì)形成一個(gè)菌落

C.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般采用菌落密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

D.在某一濃度下涂布三個(gè)平板，若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)差別不大，則應(yīng)

以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果

C［稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高

時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，值得注意的

是，該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞

連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，A、B正確。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，

一般選擇菌落數(shù)在30?300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)；設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要至少用三個(gè)平

板做重復(fù)實(shí)驗(yàn)，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力和準(zhǔn)確性；分析結(jié)果時(shí)，一定要考慮所設(shè)

置的重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是否一致，差別不大時(shí)；取平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果，C錯(cuò)誤，

D正確。］

8.某同學(xué)將1mL土壤樣液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法

分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57和

58o下列敘述錯(cuò)誤的是()

A.可得出土壤樣液中活菌大約為5.7X107個(gè)人

B.此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際的活菌數(shù)目低

C.一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

D.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的是稀釋液中的活菌數(shù)

D［將1mL樣品稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適

當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58,據(jù)此可得出每升樣品中的

活菌數(shù)為(56+57+58)+3+0.1X1000X100=5.7><1()7(個(gè))，A正確；由于兩個(gè)或

多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，在平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往

比實(shí)際的活菌數(shù)目低，B正確：為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30?300的

平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C正確；顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的是稀釋液中所有菌體的數(shù)目，

包括活菌和死菌，D錯(cuò)誤。］

9.下面是探究如何從土壤中分離出自生固氮菌與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列

問(wèn)題。

實(shí)驗(yàn)原理：農(nóng)田的表層土壤中自生固氮菌的數(shù)量比較多。將用表層土壤制成

的稀泥漿，接種到無(wú)氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能

生長(zhǎng)繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌分離。

材料用具：農(nóng)田的表層土壤、配制無(wú)氮培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的材料、

盛有9mL無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂布器、無(wú)菌培養(yǎng)皿、盛有90mL無(wú)

菌水的錐形瓶、恒溫箱等。

(1)方法步驟

①培養(yǎng)基的制備：分別配制無(wú)氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，倒平板應(yīng)在

__________________________操作。

②制備土壤稀釋液：取土樣10g加入盛有90mL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分

搖勻。用無(wú)菌吸管吸取上清液1mL,轉(zhuǎn)至盛有9mL無(wú)菌水的試管中，依次稀釋

到IXIO;稀釋度。

③涂布平板操作：按照由1X107?I*］。?稀釋度的順序分別吸取01mL進(jìn)

行涂布平板操作，每個(gè)稀釋度下，無(wú)氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布個(gè)平板，牛肉

膏蛋白陳培養(yǎng)基涂布個(gè)。

④培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在28?30℃下培養(yǎng)3?4d。

⑤計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。如果

在稀釋倍數(shù)為1X105的平板上測(cè)定的平均值為50,則每克樣品中的菌體數(shù)是

________個(gè)。

(2)預(yù)期結(jié)果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上的菌落數(shù)(填

"多于"或“少于")無(wú)氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。原因是o

f解析］(1)在酒精燈火焰旁倒平板，可以減少雜菌的污染。為了保證結(jié)果準(zhǔn)

確，一般每個(gè)稀釋度下設(shè)置3個(gè)或3個(gè)以上平板，選擇菌落數(shù)在30?300的平板

進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值，則每克樣品中的菌體數(shù)為(50+0.1)X105=5XI()7(個(gè))。

(2)可用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作為對(duì)照組來(lái)說(shuō)明無(wú)氮培養(yǎng)基的選擇作用，牛肉膏

蛋白豚培養(yǎng)基適合其他細(xì)菌生存，所以它比無(wú)氮培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目多。

［答案］⑴①酒精燈火焰附近③31⑤30?3005X1O7⑵多于無(wú)

氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌能生長(zhǎng)繁殖，而牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上幾乎

允許土壤中所有微生物生長(zhǎng)

10.為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染和選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需

要設(shè)置的對(duì)照組的培養(yǎng)基分別是()

A.未接種的選擇培養(yǎng)基、未接種的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

B.未接種的培養(yǎng)基、接種了的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

C.接種了的選擇培養(yǎng)基、接種了的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

D.接種了的培養(yǎng)基、未接種的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

B［要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，可將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培

養(yǎng)，一段時(shí)間后，若有菌落產(chǎn)生，說(shuō)明培養(yǎng)基被污染，若無(wú)菌落產(chǎn)生，說(shuō)明培養(yǎng)

基沒(méi)有被污染。要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，接種了的選擇培養(yǎng)基是

實(shí)驗(yàn)組，將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基上，作為對(duì)照

組，在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，觀察比較對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組中的菌落數(shù)，牛肉膏蛋

白陳培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目。綜上所述，B正

確。］

11.生長(zhǎng)圖形法是一種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的簡(jiǎn)便方法。為探究某嗜熱菌所

需生長(zhǎng)因子的種類(lèi)，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長(zhǎng)因子但含有其他必

需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒入平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三

種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.倒入平板后直接培養(yǎng)可判斷培養(yǎng)基有無(wú)污染

B.倒入平板后培養(yǎng)基需要進(jìn)行滅菌處理

C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長(zhǎng)因子乙和丙

D.生長(zhǎng)圖形法還可用于某些菌種的篩選

B［平板上不含任何生長(zhǎng)因子，若倒入平板后直接培養(yǎng)，出現(xiàn)菌落說(shuō)明培養(yǎng)

基已被雜菌感染，因?yàn)樵撌葻峋荒茉谌狈ιL(zhǎng)因子的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，A正確；

制備培養(yǎng)基時(shí)，先滅菌再倒平板，B錯(cuò)誤；圖中菌落生活在乙、丙區(qū)域之間，說(shuō)

明同時(shí)需要乙和丙，C正確：不同菌種所需生長(zhǎng)因子不同，可利用生長(zhǎng)圖形法篩

選菌種，D正確。］

12.為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過(guò)的土

壤進(jìn)行下圖A所示的實(shí)驗(yàn)。

?A

油

石

樣

取測(cè)

污染

石

油

接種定

過(guò)

的

含量

的

土

壤④無(wú)機(jī)固

①制取②擴(kuò)大③無(wú)機(jī)液體體培養(yǎng)基

細(xì)菌懸培養(yǎng)培養(yǎng)基+石+石油恒⑤無(wú)機(jī)液體

液油振蕩培養(yǎng)溫培養(yǎng)培養(yǎng)基+石

油振蕩培養(yǎng)

A

B

（1）配制好的培養(yǎng)基滅菌通?？梢允褂梅?。步驟③與步驟②中

培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是o這種培養(yǎng)基從功能上看屬

于（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基。

(2)同學(xué)甲進(jìn)行步驟④的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所

示。該同學(xué)的接種方法是;推測(cè)同學(xué)甲用此方法接種時(shí)出現(xiàn)圖

B結(jié)果可能的操作失誤是；在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先

行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是o

(3)同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了步驟④的操作：將1mL樣品稀釋

100倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌

落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為o這種計(jì)

數(shù)方法得到的結(jié)果一般比實(shí)際值偏小，原因可能有0

(4)步驟⑤需要振蕩培養(yǎng)，其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時(shí)使

,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率。

(5)步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是o

［解析］(1)根據(jù)題意，要分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，配制好的培養(yǎng)基

滅菌通?？梢允褂酶邏赫羝麥缇?。圖中步驟②是擴(kuò)大培養(yǎng)來(lái)自被石油污染過(guò)的

土壤中的細(xì)菌，步驟③是利用石油擴(kuò)大培養(yǎng)分解石油的細(xì)菌，步驟③與步驟②中

培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源。這種培養(yǎng)基從功能

上看屬于選擇培養(yǎng)基。(2)步驟④是對(duì)分解石油的細(xì)菌進(jìn)行分離，分析圖B可知，

分解石油的細(xì)菌在培養(yǎng)基上所形成的是單個(gè)菌落，說(shuō)明同學(xué)甲進(jìn)行過(guò)程④的操作

中接種方法是稀釋涂布平板法；圖B中培養(yǎng)基表面左側(cè)的菌落數(shù)目明顯比右側(cè)

多，推測(cè)同學(xué)甲用此方法接種時(shí)可能涂布不均勻；在接種前隨機(jī)取若干滅菌后的

空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。(3)

同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了步驟④的操作，據(jù)題干信息計(jì)算，可得出

每升樣品中的活菌數(shù)為(56+58+57)+3+0.1X100X1000=5.7X1。7(個(gè))。由于細(xì)

菌會(huì)相互重疊，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，形成菌落后，平板上觀察到的只

是一個(gè)菌落，所以導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目少。(4)步驟⑤需要振蕩

培養(yǎng)，其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物

質(zhì)利用率。(5)步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最好的

細(xì)菌，其中石油剩余量最少的一組所含的細(xì)菌就是分解石油能力最好的細(xì)菌。

［答案］(1)高壓蒸汽滅菌步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源選擇(2)

稀釋涂布平板法涂布不均勻檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格

(3)5.7XI()7(個(gè))當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，形成菌落后，平板上觀察到的

只是一個(gè)菌落（4）菌體和培養(yǎng)液充分接觸（5）篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌

13.下列關(guān)于稀釋涂布平板法和平板劃線法的敘述，不正確的是（）

A.接種用具都需要進(jìn)行嚴(yán)格滅菌

B.都只用于固體培養(yǎng)基接種

C.接種培養(yǎng)后都能獲得單個(gè)菌落

D.都可以用于微生物的計(jì)數(shù)

D［為防止雜菌污染，接種工具需要滅菌后使用，A項(xiàng)正確；將微生物接種

到固體培養(yǎng)基中的方法通常為平板劃線法和稀釋涂布平板法，B項(xiàng)正確；兩種接

種方法在培養(yǎng)基中都能形成單個(gè)菌落，C項(xiàng)正確；稀釋涂布平板法接種可以形成

單個(gè)菌落，所以常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)，平板劃線法常用來(lái)篩選分離微生物，

D項(xiàng)錯(cuò)誤。］

1.3發(fā)酵工程及其應(yīng)用

題組一發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)

1.下列選項(xiàng)中不是發(fā)酵工程特點(diǎn)的是（）

A.原料來(lái)源豐富，價(jià)格低

B.產(chǎn)物專(zhuān)一，產(chǎn)量高

C.廢棄物對(duì)環(huán)境污染小，容易處理

D.生產(chǎn)條件需要高溫高壓

D［發(fā)酵工程是運(yùn)用微生物的功能進(jìn)行的生產(chǎn)，生產(chǎn)條件溫和，即在常溫常

壓條件下進(jìn)行，D錯(cuò)誤。］

2.生物學(xué)家將大腸桿菌的質(zhì)粒取出，連接上人生長(zhǎng)激素的基因以后，重新

置于大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，然后用這種帶有人生長(zhǎng)激素基因的大腸桿菌進(jìn)行發(fā)酵，該

處理過(guò)程在發(fā)酵中屬于（）

A.菌種選育B.擴(kuò)大培養(yǎng)

C.接種D.誘變育種

A［發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、

發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵和產(chǎn)品的分離、提純等。題中所述將大腸桿菌質(zhì)粒取出連接上人生

長(zhǎng)激素基因再重新置于大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，然后用該菌進(jìn)行發(fā)酵，整個(gè)過(guò)程應(yīng)屬于

利用基因工程手段培育發(fā)酵新菌種，即菌種選育過(guò)程。］

3.發(fā)酵過(guò)程的滅菌范圍不包括()

A.操作人