幾種藥劑對煙草花葉病毒的生物活性

幾種藥劑對煙草花葉病毒的生物活性

世界卷煙年產(chǎn)量約為1200萬噸，其中中國的卷煙產(chǎn)量約為350萬噸，占世界的1.3%。煙草花葉病毒病是由TMV(Tobaccomosaicvirus)引起的一類世界性重要病害,在我國各煙區(qū)普遍發(fā)生,一般年份造成減產(chǎn)20%~30%,流行年份則毀種甚至絕收,嚴(yán)重影響了煙葉產(chǎn)量和質(zhì)量,挫傷了煙農(nóng)的生產(chǎn)積極性。對于煙草花葉病毒病的防治,國內(nèi)外進(jìn)行了大量的研究,并取得了一定的成果。但由于種種原因,對煙草花葉病的防治還不能達(dá)到預(yù)期的效果。因此,研制和篩選控制煙草花葉病的病毒抑制劑,已成為當(dāng)前煙草生產(chǎn)中急需解決的問題。1材料和方法1.1煙草植株的消毒處理寄主為心葉煙(Nicotianaglutinosa)。煙草種子用0.1%(質(zhì)量濃度,下同)硝酸銀消毒10~15min,然后用流水沖洗3~4次,將其播種于基質(zhì)(購于黔南金福有限責(zé)任公司)。整個試驗期間煙草植株培養(yǎng)于(25±2)℃的溫室中。大約4周后分苗,移栽于直徑6cm、高15cm的塑料杯中,待幼苗長至5葉期可以進(jìn)行不同的處理。試驗在貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理實驗室溫室進(jìn)行。1.2新葉和刷葉片煙草花葉病毒(TMV)由貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理教研室提供。TMV接種濃度為25μg/mL,每株接種4張新葉。接種時先打頂,然后在需接種的葉片表面均勻噴灑一薄層粒度為38μm的金剛砂,用蘸有病毒的毛筆輕輕均勻地刷葉片表面。方法采用半葉枯斑法。接種病毒3d后,統(tǒng)計枯斑數(shù)目,計算防效。1.3藥劑、藥劑和藥劑植病靈(2.5%可濕性粉劑,山東亞星農(nóng)藥有限公司);金毒冠氨基寡糖素(0.5%水劑,河北奧德植保藥業(yè)有限公司);花葉凈(40%可濕性粉劑,重慶市山丹生物農(nóng)藥有限公司);嗎胍·乙酸銅(20%可濕性粉劑,山東鑫星農(nóng)藥有限公司);金珠蔬美(98%寧南霉素水劑,四川金珠生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司)。1.4枯斑宿主的抑制率采用接種方式為治療(先接種病毒,1h后再噴藥劑)、保護(hù)(先噴藥,12h后再接種病毒)和鈍化(將藥劑與等體積的病毒汁液混合鈍化30min)3種。每種濃度至少處理3株,枯斑寄主的抑制率采用半葉枯斑法以如下公式計算,均以平均抑制率進(jìn)行評價?？莅咭种坡?(對照枯斑數(shù)-處理枯斑數(shù))/對照枯斑數(shù)×100%1.4.1接種及藥劑防治選長勢一致的心葉煙,先用毛筆蘸取病毒汁液全葉接種病毒,接種后用水沖洗。待葉片干后,在左半葉涂施滅菌水作對照,右半葉涂施藥劑。3~4d后記錄枯斑數(shù)。1.4.2施藥劑及接種選長勢一致的心葉煙,用毛筆輕輕在左半葉涂施滅菌水作對照,右半葉涂施藥劑,待葉片干后(12h后),接種病毒。用毛筆蘸取病毒汁液,人工摩擦接種于撒有金剛砂的葉片上。1.4.3藥物對mtv的生物活性試驗將藥劑與等體積的病毒汁液混合鈍化30min,摩擦接種心葉煙右半葉,滅菌水與病毒汁液混合接種左半葉。3~4d后記錄枯斑數(shù)。2結(jié)果與分析2.1總抑制率和總抑菌率由表1可知,各藥劑對TMV均有一定的活體治療效果,其中金珠蔬美對病毒的抑制率最高,在250μg/mL時平均抑制率達(dá)到66.24%,高于其他抑制劑的防效。其次是植病靈和花葉凈,濃度在25μg/mL和700μg/mL時抑制率分別達(dá)到59.09%和53.06%。金毒冠氨基寡糖素對病毒的抑制率較低。2.2單次給藥后平均抑制率及總由表2可知,各藥劑對TMV活體保護(hù)效果中,金珠蔬美對病毒的抑制率最高,在250μg/mL時平均抑制率達(dá)到了54.55%,高于其他抑制劑的防效。其次是花葉凈,濃度在700μg/mL時抑制率達(dá)到了45.83%。嗎胍·乙酸銅對病毒的抑制率較低。2.3氨基寡糖素的抑制率由表3可知,各藥劑對TMV活體鈍化效果中,金毒冠氨基寡糖素的抑制率最高,在5μg/mL時平均抑制率達(dá)到了60.32%。花葉凈、嗎胍·乙酸銅和金珠蔬美在最高濃度時的抑制率也都達(dá)到了50%以上。3煙草病毒病的防治技術(shù)1)本試驗采用發(fā)病期短,發(fā)病效果明顯的心葉煙作為處理植株,以快速篩選最佳病毒抑制劑。250μg/mL的金珠蔬美對病毒的抑制率最高,是較為理想的防治煙草花葉病的病毒抑制劑,只要防治時間適宜,完全能夠控制病情發(fā)展和病害蔓延,減輕病情和危害程度。2)目前能有效防治煙草病毒病的商品藥劑品種較少,且沒有很好的單一防治措施,在病害發(fā)生后又缺乏有效的治療手