4%嘧肽霉素水劑的毒性試驗

4%嘧肽霉素水劑的毒性試驗

0植物病毒病防治新技術(shù)病毒病是番茄、青椒、卷煙和其他作物的主要病害。它每年給當(dāng)?shù)厥卟?、水果和煙草的生產(chǎn)帶來嚴重的損失。在植物病毒病的藥劑防治上,國內(nèi)外已歷經(jīng)了多年的研究,雖然一些抗病毒藥劑如病毒A、植病靈等已開始進入實用化階段,但化學(xué)合成藥劑的開發(fā)具有周期長、成本高、毒性大、污染環(huán)境等缺點,遠遠不能滿足農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的需要。經(jīng)過幾年的室內(nèi)外試驗,我們研制出了防治植物病毒病的新型生物農(nóng)藥—4%嘧肽霉素水劑,現(xiàn)已通過國家農(nóng)藥臨時登記?，F(xiàn)將該藥的毒性測定和田間藥效試驗結(jié)果報告如下。1材料和方法1.1材料表面4%嘧肽霉素水劑由沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院提供。病毒A(20%鹽酸嗎啉胍銅可濕性粉劑)、植病靈為市售。1.2方法1.2.1急性毒性試驗本試驗在國家化學(xué)工業(yè)農(nóng)藥安全評價質(zhì)量監(jiān)督檢測中心完成。根據(jù)國家標準GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法》對4%嘧肽霉素水劑進行急性經(jīng)口毒性試驗、急性經(jīng)皮毒性試驗、急性皮膚刺激試驗、急性眼刺激試驗。1.2.1.灌胃方式設(shè)置選取健康的體重一致的Wistar品系大白鼠雌雄各20只進行急性經(jīng)口毒性試驗,各設(shè)置464、1000、2150、4640mg/kg共4個劑量組,按設(shè)置量將嘧肽霉素配成不同劑量的液體供試。采取灌胃方式給藥,給藥前動物絕食16小時,一次灌胃給足設(shè)計量,灌胃體積1mL/100g。給藥后,連續(xù)觀察30min,而后在1、2、3、4、6小時進行觀察,第二天以后每天上下午各觀察一次至第14天試驗結(jié)束,記錄中毒癥狀和動物死亡率。1.2.1.不同劑量的擬合液對藥物的乳化選取健康的體重一致的Wistar品系大白鼠雌雄各5只,各設(shè)置215、464、1000、2150mg/kg共4個劑量組,按設(shè)置量將嘧肽霉素配成不同劑量的液體供試。在動物背部制造一個脫毛區(qū),面積約4×5cm,觀察24小時,選用無損傷者進行試驗。將所設(shè)劑量的藥液均勻涂于脫毛區(qū)內(nèi),覆以4層紗布,外面再覆蓋1層聚乙烯薄膜,膠布固定。4小時后,去掉所有覆蓋物,以溫水洗凈藥物。動物放回籠內(nèi),自由進食水,觀察并記錄結(jié)果至第14天。1.2.1.無損傷部位試藥試驗選取健康的體重一致的大耳白兔雌雄各2只,在動物背部兩側(cè)各制造一個脫毛區(qū),面積約2×3cm,觀察24小時,選用無損傷部位進行試驗。將0.5mL藥液均勻涂于左側(cè)脫毛區(qū)內(nèi),以右側(cè)脫毛區(qū)作為對照。其余處理同1.2.1.2。于染毒后4小時開始觀察至第14天。1.2.1.外眼效果及眼底結(jié)構(gòu)選取健康的體重一致的大耳白兔雌雄各2只,輕拉其左側(cè)眼瞼,將0.1mL藥液滴入其結(jié)膜囊內(nèi),輕輕閉合眼臉約1min,以自身右眼作為對照。于染毒后1小時開始觀察直到第14天。1.2.2試驗城市防雨試驗1.2.2.水劑對番茄的毒力本試驗在沈陽市東陵區(qū)金家村試驗基地溫室番茄田進行。采用感病番茄品種撫順柿子王906F′,在番茄病毒病發(fā)病初期開始噴藥。供試藥劑稀釋倍數(shù)為4%嘧肽霉素水劑200倍、250倍、300倍液,對照藥劑為病毒A600倍液、植病靈800倍液,以噴清水的處理作為空白對照。采用隨機區(qū)組排列,共6個處理,4次重復(fù),每小區(qū)面積18平方米,約60株番茄。用“MATABI”背負式手動噴霧器在7月22日開始第一次噴藥后每隔7天噴一次,共噴3次。分別于第二次噴藥后7天和第三次噴藥后10天調(diào)查病情指數(shù)。根據(jù)病情指數(shù)計算防治效果。1.2.2.2.青椒病毒防治試驗本試驗在遼寧省法庫縣綠色食品基地辣椒田進行。采用感病品種青椒赤峰1號。其余處理及田間試驗設(shè)計等同1.2.2.1。1.2.2.3.卷煙病的防治本試驗在遼寧省西豐煙草試驗基地進行。采用感病品種NC89,其余處理同1.2.2.1。2結(jié)果與分析2.1毒性試驗2.1.1致死量4%嘧肽霉素水劑大鼠急性經(jīng)口毒性試驗結(jié)果表明,給藥后各劑量組動物均無明顯的中毒癥狀,根據(jù)死亡結(jié)果求得該藥對Wistar品系雌雄大白鼠的半數(shù)致死量LD50均大于4640mg/kg。根據(jù)國家標準GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法》中急性毒性評價標準,低毒農(nóng)藥的經(jīng)口毒性半數(shù)致死量LD50>500mg/kg,因此該藥劑的大鼠急性經(jīng)口毒性屬于低毒級。2.1.2經(jīng)皮毒性試驗急性經(jīng)皮毒性試驗結(jié)果表明,大鼠染毒后4小時內(nèi),部分雄性大鼠出現(xiàn)伏臥狀態(tài),為輕度不適反應(yīng),24小時后恢復(fù)常態(tài),雌雄大鼠染毒14d均無死亡,該藥劑對雌雄大鼠的經(jīng)皮毒性LD50均大于2150mg/kg。根據(jù)國家標準GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法》中急性毒性評價標準,低毒農(nóng)藥的經(jīng)皮毒性半數(shù)致死量LD50>1000mg/kg,因此該藥劑的大鼠急性經(jīng)皮毒性屬于低毒級。2.1.3不良反應(yīng)積分急性皮膚刺激試驗結(jié)果表明,大耳白兔的左側(cè)脫毛區(qū)同右側(cè)脫毛區(qū)相比,均無紅斑、水腫等不良反應(yīng),該項的積分記錄均為零。根據(jù)國家標準GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法》中急性毒性評價標準,該藥劑對皮膚的刺激強度為無刺激性。2.1.4家兔眼不良反應(yīng)試驗結(jié)果急性眼刺激試驗結(jié)果表明(表2),大耳白兔的左眼同右眼相比,角膜沒有發(fā)生混濁、受損的不良反應(yīng),結(jié)膜沒有出現(xiàn)充血、水腫、分泌物等不良反應(yīng),表明該藥劑對兔眼的角膜、虹膜、結(jié)膜均無損害,損害的各項積分記錄均為零。根據(jù)國家標準GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法》中急性毒性評價標準,該藥劑對兔眼的刺激強度為無刺激性。2.2試驗城市防雨試驗2.2.1茄病毒病的防治效果試驗結(jié)果表明(表3),4%嘧肽霉素水劑對番茄病毒病有良好的防治效果,防效最高可達82.23%,顯著高于對照藥劑病毒A和植病靈,但該藥劑各施用濃度之間的防效沒有顯著差異。2.2.2病防治效果試驗結(jié)果表明(表4),4%嘧肽霉素水劑對辣椒病毒病有良好的防治效果。第2次施藥后7天防效調(diào)查結(jié)果表明,4%嘧肽霉素水劑的防效明顯優(yōu)于對照藥劑病毒A和植病靈,并且隨藥劑施用濃度的增高,防效也隨之增高。2.2.3防治效果試驗結(jié)果表明(表5),4%嘧肽霉素水劑對煙草花葉病毒病有良好的防治效果。方差分析的結(jié)果表明:4%嘧肽霉素水劑對煙草花葉病毒病的防效顯著高于對照藥劑病毒A和植病靈。在4%嘧肽霉素水劑的各施用濃度中稀釋200倍液的防效最好,最高可達82.82%。3田間防治試驗4%嘧肽霉素水劑大鼠急性經(jīng)口毒性LD50>4640mg/kg,大鼠急性經(jīng)皮毒性LD50>2150mg/kg,對大白兔的皮膚和眼均無刺激性。根據(jù)國家標準GB15670-1995《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法》中毒性評價標準,4%嘧肽霉素水劑屬于低毒生物農(nóng)藥。田間試驗結(jié)果表明,該藥劑對番茄、辣椒和煙草等多種植物的病毒病具有良好的防治效果,