人體解剖生理學(xué)實驗基本操作-1016概述

人體解剖生理學(xué)試驗根本操作常用的試驗動物動物的捉持動物的秤重試驗動物分組及編號的標(biāo)記方法動物的麻醉試驗動物的給藥方法試驗動物的取血方法試驗動物的處死方法常用的試驗動物小鼠在哺乳類試驗動物中，由于小鼠體小，飼養(yǎng)治理便利，易于掌握，生產(chǎn)生殖快，爭論最深，有明確的質(zhì)量掌握標(biāo)準(zhǔn)，已擁有大量的近交系、突變系和封閉群，因此在各種試驗爭論中，用量最大，用途最多。常用的試驗動物大鼠白化型大鼠在生物醫(yī)學(xué)爭論中占據(jù)著重要的地位，常用的大鼠近交品系有十幾個如ACI、BVF、F344、PA、M520、WAB、WAC、WKA、SD、RF等品系。常用的非近交的純種大鼠有7種，其中以Wistar大鼠用得最多，我國醫(yī)藥爭論中應(yīng)用也比較廣泛。此種大鼠白色，相當(dāng)于小鼠的瑞士〔Swiss〕種。常用的試驗動物豚鼠豚鼠對某些藥物極為敏感，因此它是爭論這些藥物的“特地動物”。例如豚鼠對組織胺極敏感，所以很適合作平喘藥和抗組織胺藥的爭論；豚鼠對人型結(jié)核桿菌具有高度的敏感性，因此常用作抗結(jié)核病藥物的藥理學(xué)爭論。

常用的試驗動物家兔家兔體小力弱、膽小怕驚、怕熱、怕潮，寵愛安靜、清潔、枯燥、涼快的環(huán)境，不能忍受污穢的條件。家兔對體溫變化特別靈敏。最易產(chǎn)生發(fā)熱反響，而且發(fā)熱反響典型、恒定。小鼠、大鼠和豚鼠恒溫機能差。對發(fā)熱刺激的反響低。有時熱原性物質(zhì)的刺激時。體溫反響下降。

常用的試驗動物犬犬在各個方面的爭論，如心血管外科、腦外廣泛用于試驗外科科、斷肢再植、器官或組織移植等中都比較常用。犬是目前根底醫(yī)學(xué)爭論和教學(xué)中最常用的動物之一，尤其在生理、藥理、病理生理等試驗爭論中起著重要作用。動物的麻醉揮發(fā)性麻醉藥乙醚乙醚麻醉的優(yōu)點：深度易于把握，比較安全，麻醉后恢復(fù)比較快。缺點：需要專人治理，麻醉初期消失猛烈的興奮現(xiàn)象，對呼吸道有較強的刺激性，需在麻醉前給肯定量的嗎啡和阿托品〔根底麻醉〕。非揮發(fā)性麻醉藥苯巴比妥鈉戊巴比妥鈉氨基甲酸乙酯水合氯醛試驗動物的給藥方法皮下注射皮內(nèi)注射腹腔注射肌肉注射靜脈注射灌胃給藥法試驗動物的取血方法尾靜脈眼眶動脈和靜脈后眼眶靜脈叢連續(xù)穿刺斷頭心臟頸靜脈耳緣靜脈大/小鼠解剖血液凝固【試驗?zāi)康摹勘驹囼灣惺芡妙i總動脈放血，通過測定各種條件下的血液凝固時間，了解影響血液凝固的一些因素。【試驗原理】血液凝固可分為內(nèi)源性凝血系統(tǒng)和外源性凝血系統(tǒng)。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是指參與凝血過程的因子全部存在于血漿中，外源性凝血系統(tǒng)是指在組織因子參與的凝血過程?！驹囼灢牧稀考彝猛檬中g(shù)臺、哺乳動物手術(shù)器、動脈夾、細塑料管、20毫升注射器、25%烏拉坦、試管8支、小燒杯2個，竹簽1支、冰塊、棉花，石蠟、肝素、草酸鉀、生理鹽水、肺組織浸液?！驹囼灧椒ā?、用烏拉坦將兔麻醉，仰臥固定于兔手術(shù)臺上，分別一側(cè)頸總動脈，上端用線結(jié)扎阻斷血液，下端夾上動脈夾，在動脈當(dāng)中剪一小口，插入細塑料管，結(jié)扎插管備取備用。2、將以下試管預(yù)備好試驗用品后，每管參加血液2毫升。試管1內(nèi)放少許棉花；試管2用石蠟油潤滑整個內(nèi)外表試管3不加任何處理試管4置于有冰塊的小燒杯中試管5內(nèi)加肝素8單位試管6內(nèi)加草酸鉀1-2毫克將多余的血盛于小燒杯中，不斷用竹簽攪動直至纖維蛋白形成3、記錄凝血時間：每個試管加血2毫升后，即可開頭計時，每隔15秒，將試管傾斜一次，觀看血液是否凝固。至血液成為凝膠狀不再流淌為止，幾下所經(jīng)時間即凝血時。另一燒杯內(nèi)參加血液后馬上用竹簽攪動，去除纖維蛋白。5、6號試管，參加血液后，用拇指蓋住試管口將管顛倒兩次。將結(jié)果及在各條件下的凝血時間按表1填寫，并進展解釋

表1各條件下凝血時間實驗儀器編號實驗條件結(jié)果及凝血時間解釋試管（放血2毫升）12粗糙面的影響預(yù)先在試管內(nèi)放入少許棉花預(yù)先用石蠟油潤滑整個使館內(nèi)表面34溫度的影響預(yù)先置于室溫中試管置有冰塊的小燒杯中56試管內(nèi)先加肝素8單位試管里先加草酸鉀1-2毫克小燒杯（放血10毫升）放血于燒杯時用竹簽不斷攪動，約2-3分鐘后取出竹簽，用水洗凈竹簽上的血液，觀察纖維蛋白，燒杯內(nèi)為去除纖維蛋白血，觀察其是否會發(fā)生凝血。血紅蛋白含量的測定【試驗?zāi)康摹堪盐毡壬y定血紅蛋白含量的方法?！驹囼炘怼繙y定血紅蛋白含量的方法很多，試驗常用比色法。其原理是在肯定量的血液中，血紅蛋白經(jīng)少量鹽酸的作用，使亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色。用水稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色比較，求出每100ml血液中所含的血紅蛋白克數(shù)。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子為13.1?！驹囼灢牧稀客醚?，沙利氏血紅蛋白計一套，采血針，玻璃棒，滴管，75%酒精，95%酒精，棉球，蒸餾水，乙醚，0.1N鹽酸【試驗方法】1．血紅蛋白計包括①標(biāo)準(zhǔn)比色架，架的兩側(cè)鑲有兩個棕色標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱。②血紅蛋白稀釋管，有方形也有圓形的。兩側(cè)有刻度，一側(cè)以g為計數(shù)單位，對側(cè)以百分率計。2．用滴管加0.1mol/LHCl于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度10處。3．用血紅蛋白吸管的尖端吸上個試驗中燒杯中的血，吸血至刻度20mm3處〔0.02ml〕。4．用濾紙片或棉球擦凈吸管口四周的血液，將吸管插入血紅蛋白稀釋管的鹽酸內(nèi)，輕輕吹出血液至管底部，反復(fù)吸入并吹出稀釋管內(nèi)上層的鹽酸，洗滌吸管屢次，使吸管內(nèi)的血液完全洗入稀釋管內(nèi)。搖勻或用小玻璃棒攪勻后，放置10min，使鹽酸與血紅蛋白充分作用。5．把稀釋管插入標(biāo)準(zhǔn)比色架兩色柱中心的空格中，使無刻度的兩側(cè)面位于空格的前前方，便于透光和比色。6．用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴參加蒸餾水〔每加一滴要攪拌〕，邊滴邊觀看顏色，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱一樣為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100ml血液血紅蛋白的克數(shù)。家兔動脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)整【試驗?zāi)康摹?．把握測定動脈血壓直接法及動脈插管方法。2．了解溫血動物的麻醉、固定及手術(shù)方法。3．觀看心血管活動的某些影響因素?！驹囼炘怼啃呐K受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)支配。心交感神經(jīng)興奮，對心臟產(chǎn)生正性變時、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量增加。心迷走神經(jīng)興奮，對心臟產(chǎn)生負性變時、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量削減。支配血管的植物神經(jīng)主要是交感縮血管神經(jīng)，其興奮時主要引起縮血管效應(yīng)，外周阻力增加。中樞通過反射活動調(diào)整心血管的活動，轉(zhuǎn)變心輸出量及外周阻力，從而調(diào)整動脈血壓。心血管活動尚受體液因素的調(diào)整。其中主要有腎上腺素和去甲腎上腺素。本試驗是以動脈血壓為指標(biāo)，在整體條件下，施加某些因素，觀看神經(jīng)、體液因素對心、血管的調(diào)整作用?！驹囼灢牧稀考彝枚嗟郎碛涗泝x、血壓換能器、動脈插管、三通管。兔手術(shù)臺、哺乳類手術(shù)器破、注射器、有色絲線、紗布、棉花。25％氨基甲酸乙酯、1％肝素。生理鹽水、l／萬去甲腎上腺素?！驹囼灧椒ā?.麻醉和動物固定：兔稱重后，按1g／kg體重的劑量由兔耳緣靜脈緩慢注入25％氨基甲酸乙酯溶液將動物麻醉。注射過程中留意觀看動物的肌張力、呼吸頻率及角膜反射的變化，防止麻醉過深。麻醉好的動物仰臥固定于手術(shù)臺上，留意頸部必需放正拉直。2.分別頸部血管和神經(jīng)：用彎剪刀剪去頸部的毛，作長5—7厘米的正中切口，鈍性分別皮下組織和肌肉，即可見到氣管，將氣管兩旁的肌肉拉開，便可在氣管兩側(cè)的深部找到頸動脈鞘，內(nèi)有頸總動脈、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)。認真識別并留神分別，在左側(cè)減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)下穿不同顏色濕絲線備用．然后分別雙側(cè)的迷走神經(jīng)和頸總動脈，穿線備用。3.動脈插管：分別右側(cè)頸總動脈3厘米左右，近心端用動脈夾夾閉，遠心端用線結(jié)扎．耳緣靜脈注入肝素1ml，然后在結(jié)扎的近端剪一斜口，向心臟方向插入動脈插管，用線將插管與動脈扎緊，防止滑脫。放開動脈夾，記錄動脈血壓。觀看工程1、觀看正常血壓曲線。2、用動脈夾夾閉左側(cè)頸總動脈5—10秒，觀看血壓變化。3、刺激減壓神經(jīng)：以中等強度，頻率為10-15次/秒，波寬2毫米的連續(xù)電脈沖。刺激一次減壓神經(jīng)，觀看血壓有何變化？然后用兩根絲線在該神經(jīng)中部兩處接扎，并在兩結(jié)扎間將神經(jīng)切斷，分別刺激切斷后的神經(jīng)中樞端和外周端，觀看對血壓影響有何不同？4、刺激迷走神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng)，觀看血壓變化．刺激右側(cè)外周端，觀看血壓變化。5、靜脈注射去甲腎上腺素：由耳緣靜脈注入1／萬去甲腎上腺素0.3ml，觀看血壓變化。6、刺激交感神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷左側(cè)交感神經(jīng)，觀看左側(cè)耳都血管的變化，然后用中等強度電流連續(xù)刺激其頭端，觀看左側(cè)耳部血管變化。尿生成的影響因素【試驗?zāi)康摹?．學(xué)習(xí)輸尿管插管技術(shù)。2．觀看影響尿量的幾種因素?！驹囼炘怼磕虻纳蛇^程包括：腎小球的過濾作用；腎小管與集合管的重吸取作用；腎小管與集合管的分泌作用。在整體內(nèi)，這3個過程往往受到生理性的調(diào)整。凡影響這些過程的因素，都可影響尿的生成而引起尿量的轉(zhuǎn)變?！驹囼灢牧稀考彝谩⑹中g(shù)臺、常用手術(shù)器械、或細塑料管、、刻度試管、2ml及20ml注射器、25%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、生理鹽水、垂體后葉素〔5單位/ml〕【試驗方法】1.麻醉：家兔一只，用25%氨基甲酸乙酯〔1g/kg〕耳緣靜脈注射，麻醉后，仰位固定于手術(shù)臺上。2.插管：導(dǎo)尿管直接由試驗動物的尿道插入，試驗動物應(yīng)選擇雄性，插導(dǎo)尿管時用液體石蠟浸潤后順尿道輕輕插入膀胱。插管是假設(shè)遇阻力，不行強插，應(yīng)拔出重插。依次進展以下工程試驗。留意：每項試驗前都要記錄尿量作為比照。試驗觀對待尿流量穩(wěn)定后，即可進展以下各項試驗觀看。每項試驗開頭時，都應(yīng)先記錄一段尿量曲線作為比照；然后進展注射或刺激，并連續(xù)記錄和觀看至效應(yīng)明顯和恢復(fù)過程。〔組間比照、自身前后比照〕〔1〕自耳緣靜脈注射的生理鹽水20ml，觀看尿量的變化。〔2〕自耳緣靜脈注射20%葡萄糖液15ml，觀看其變化?！?〕自耳緣靜脈注射垂體后葉素0.2ml，觀看和記錄其變化20min。(4)自耳緣靜脈注射呋塞米0.2ml，觀看和記錄其變化20min。結(jié)果：記錄兔尿量并觀看其變化。小白鼠破壞小腦引起的共濟失調(diào)【試驗?zāi)康摹恳粋?cè)小腦損傷后的動物，軀體運動表現(xiàn)特別，通過對特別運動的觀看，了解小腦的機能。【試驗原理】小腦具有維持身體平衡，調(diào)整肌緊急和協(xié)調(diào)肌肉運動等機能。當(dāng)小腦損傷后，隨著破壞程度的不同，可表現(xiàn)出不同程度的肌緊急失調(diào)及平衡失調(diào)。絨球小結(jié)葉——古小腦——前庭小腦——調(diào)整肌緊急，維持身體平衡小腦前葉——舊小腦——脊髓小腦——掌握肌肉的張力和協(xié)調(diào)小腦后葉——新小腦——大腦小腦——影響運動的起始、打算和協(xié)調(diào)，包括確定運動的力氣、方向和范圍【試驗材料】小白鼠4只、探針?！驹囼灧椒ā?.觀看正常小鼠的活動狀況。2.用探針破壞某一側(cè)小腦，切勿損傷中腦，然后快速取出探針。3.放開縛線觀看小白鼠的活動狀