血糖(GLU)方法學驗證

實用文檔血糖（GLU）方法學驗證驗證時間：驗證次數(shù)：驗證人員：一檢測系統(tǒng)信息：項目：血糖（GLU）儀器名稱：儀器型號：試劑及廠商：檢測方法：葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法)二廠商的相關參數(shù)：需驗證參數(shù)廠家參數(shù)驗證結果分析靈敏度0.3mmol/L沿用廠家參數(shù)分析測量范圍0.3-25已驗證臨床報告范圍0.3-50已驗證參考區(qū)間3.1-6.2已驗證其他參閱說明書版本批內精密度批間精密度平均值標準差變易系數(shù)平均值標準差變易系數(shù)廠家參數(shù)正常值異常值驗證結果正常值異常值三驗證過程1．準確度（Accuracy）：目的：通過檢測數(shù)據(jù)與賦值材料數(shù)據(jù)的對比，得到實驗室檢測數(shù)據(jù)的偏倚，從而評價和驗證實驗室檢測結果的準確性。評價方法：參加衛(wèi)生部臨檢中心或和重慶市臨檢中心組織的室間質評，或者分析廠商提供的已賦值的參考材料或質控品，檢測結果參照廠商的說明，還可以分析多個實驗室（10個以上）參與質量控制過程所用的參考材料，檢測結果與同行間的均值比較。本實驗室已參加室間質評的項目一律用回報結果作為評價指標，沒有參加的項目通過室間比對來評價其準確度。最近一次參加的衛(wèi)生部室間質評：測定日期統(tǒng)計日期回報日期校準物PT平均成績平均VIS各編號樣本測定情況：（mmol/L）樣本編號我室測定結果靶值PT允許范圍PT得分與靶值偏倚VIS允許范圍VIS得分2010112010122010132010142010152．精密度（Precision）：2．1批間精密度：目的：考察候選方法的隨機誤差方法：選擇室內質控作為衡量批間精密度的依據(jù)。選擇具有醫(yī)學決定水平的正常及異常質控品每天按照常規(guī)標本的方法一樣測定，測定結果在遵照廠商參數(shù)不出控的前提下利用前3個20天測定的數(shù)據(jù)逐步累積最終得出最適均值、標準差。以此作為判斷今后該批號質控數(shù)據(jù)是否在控的依據(jù)。質控來源：大部分為廠家配套正常/異常值質控品。個別項目異常值采用留樣復查的方法來衡量是否符合臨床檢測精密度允許范圍。濃度一：月份123單位測定例數(shù)均值標準差變易系數(shù)濃度二：月份123單位測定例數(shù)均值標準差變易系數(shù)2．2批內精密度：目的：考察候選方法的隨機誤差方法：選擇具有醫(yī)學決定水平的高低值標本在相當短的時間內，按規(guī)定的操作方法，在較短得時間內及穩(wěn)定的條件下各作20次重復測定。計算其X、S與CV。標本來源：除個別項目采用病人標本外其他項目均采用高低值配套質控品濃度單位測定時間低值標本來源高值標本來源測定結果：測定次數(shù)血糖正常值異常值1234567891011121314151617181920平均值SDCV%試劑說明書上正常值CV%:0.9%試劑說明書上異常值CV%:0.7%1/4最大允許誤差:2.5%結果判斷方式：正、異常值CV至少小于1/4最大允許誤差。測定評價：批內測定低、高值CV值分別為0.6%、0.7%，均小于1/4最大允許誤差，可判定該項目批內精密度結果為“通過”。3．線性范圍（Linearityrange）：目的：在確定某項目檢測上限的同時檢測其檢測上下限是否呈線性關系,從而保證該濃度范圍檢測結果的準確性。對于高濃度樣本可以用重做功能予以確定，或用0.9%的生理鹽水手工直接稀釋后上機測定，兩種方法稀釋效果差異經(jīng)統(tǒng)計學驗證無明顯差異。（具體操作可詳見“稀釋效果的對比”）羅氏說明書給出血糖（GLU）線性范圍（Linearityrange）為0.11-25.0mmol/L。過程描述：a）以100ul以一個體積單位，將高值標本與0.9%NaCl以4：1、3：2、2：3、1：4的體積比例混合，分別上機按高到低、低到高各重復測定2次，記錄結果。b）線性統(tǒng)計：以直接測定結果計算得出的相應濃度為X，以通過稀釋測定結果為Y，回歸方法學統(tǒng)計，得到a、b及r值。c）結果判斷：若b在0.97-1.03范圍內，若a接近于0，則可直接判斷線性。范圍在實驗已涉及濃度；若b不在0.97-1.03范圍內，a較大，舍去高值或低值組數(shù)據(jù)，另做回歸統(tǒng)計，直至縮小的分析范圍其回歸方程的a和b的判斷符合要求，則該范圍為線性范圍。結論：標本狀態(tài)良好無干擾的情況下血糖（GLU）的測定結果在0.11-25.0mmol/L范圍內呈線性。4．臨床可報告范圍（Clinicalreportablerange，CRR）：目的：分析各稀釋濃度的線性關系，確定最高稀釋倍數(shù)。從而確保高值樣本報告的準確度。驗證方法：羅氏公司血糖（GLU）說明書上不僅給出了在MODULARP上的AMR，同時給出了經(jīng)稀釋后重復測定可達到的延伸范圍，我們將此范圍作為該項目的臨床可報范圍，同時延伸范圍高限值與線性范圍高限值的比值作為最大稀釋倍數(shù)。此倍數(shù)稀釋超限高值標本測定值與預期值的偏差，以1/4CLIA’88總允許誤差范圍為判斷限。項目名稱可測定線性范圍臨床可報上限是否通過驗證實際稀釋倍數(shù)血糖0.3-250.3-50是390%AMR-140%AMR初擬稀釋倍數(shù)22.5-353稀釋倍數(shù)的應用濃度為超出線性范圍且低于臨床可報上限濃度之間的高值標本，為了減少稀釋引起的誤差及降低高值標本尋求的難度，這里將稀釋標本濃度限制在90%AMR-140%AMR。過程描述：a）測定標本為2010室間質評線性驗證標本,同一時間內平行上機測定兩次,測定結果分別為27.69mmol/L,27.76mmol/L,平均值為27.73mmol/L(此結果為MODULARPAMR100.9%上限),按照初擬倍數(shù)將此標本直接稀釋3倍后平行上機測定2次,結果分別為9.23mmol/L,9.23mmol/L,乘以稀釋倍數(shù)后取平均值為27.69mmol/L。b）本次實驗預期值為27.73mmol/L，實測值為27.69mmol/L。測定值與預期值的偏差為0.14%，小于1/4CLIA’88總允許誤差2.5%?？膳卸椤巴ㄟ^”。5.分析靈敏度(AnalyticalSensitivity)：驗證方法：廠商通常給定的分析靈敏度為檢測低限LLD，即樣品單次檢測可以達到的非空白檢測響應量對應的分析物量。通過反復測定空白樣品，均值（X）加上三倍標準差（SD）則為LLD。驗證檢測低限時，重復至少20個數(shù)據(jù)，若不超過3個點大于LLD，則此LLD得到驗證。分析靈敏度僅對那些在接近0的低值有臨床意義的項目有必要進行確定。該項目勿需進行分析靈敏度的驗證，直接引用羅氏說明書上給定的0.11mmol/L。6.干擾物質(InterferingSubstances)：膽紅素：膽紅素低于376.2μmol/L無明顯干擾；溶血：血紅蛋白低于8.5g/L無明顯干擾；脂血:甘油三酯低于3.42mmol/L無明顯干擾,但是脂血混濁的濁度和甘油三酯間相關性很差。7．參考區(qū)間（Referenceintervals）：過程描述：待檢標本需滿足檢測前質量控制要求（見下），收集20例健康人血清標本及時檢測，要求其年齡，性別等均勻分布，對參考范圍進行驗證，只允許5%的數(shù)據(jù)超過所驗證的參考范圍，否則需建立參考范圍。血糖（GLU）檢測前質量控制要求：健康狀況調查表篩選合格候選個體，篩查要求詳見《健康狀況調查表—男性》，《健康狀、況調查表—女性》。離心沉淀（大約3000*g下5分鐘）不能澄清的脂血標本勿用。不超過冷藏溫度（2-8。C）72小時的標本。氟化物或碘乙酸鹽處理血漿：室溫穩(wěn)定24小時.收集后的標本應該盡快檢測,或者在半小時內與細胞進行分離并保存于2-8℃。檢測前離心去除沉淀。調查表顯示有服用VitC者血清標本勿用。項目血糖濃度單位MMOL/L測定日期試劑批號有效期儀器測定分布例數(shù)1-10男性11-20女性是否在控在控測定結果見下表：樣本序列號樣本條碼號測定結果樣本序列號樣本條碼號測定結果1112123134145156167178189191020統(tǒng)計方式：R=測定結果在參考范圍內的例數(shù)/總測定例數(shù)≥95%即合格羅氏說明書提供參考范圍GLU：3.05-6.38mmol/L。結果：本實驗測定正常人結果在廠家提供的參考范圍的比率R≥95%。結論：廠家提供的血